皮肤镜及反射式共聚焦显微镜在日光性角化病辅助诊断、治疗中的应用

日光性角化病(actinic keratosis, AK)作为一种常见的皮肤癌前病变,早期准确诊断、个体化治疗尤为重要。皮肤组织病理学检查在皮损整体评估和重复取样方面有一定局限性,皮肤镜及反射式共聚焦显微镜(reflectance confocal microscopy, RCM)作为无创诊断工具具有实时、在体、动态观察等优势,在AK的辅助诊断、疗效评估和随访方面具有较大的潜力。本文主要介绍皮肤镜和反射式共聚焦显微镜在AK的辅助诊断、治疗和随访AK方面的应用。

人工智能在角膜共聚焦显微镜检查角膜神经病变中的应用进展

角膜共聚焦显微镜是目前用来评估角膜神经病变的有力工具,因其操作快速、无创、可重复性高的优点,开始应用于糖尿病周围神经病变的早期诊断中。近年来,随着人工智能的蓬勃发展,利用人工智能分析角膜神经病变的算法日渐成熟,本文对利用角膜共聚焦显微镜分析糖尿病性角膜神经病变的角膜神经改变及多种人工智能分析在角膜共聚焦显微镜检查角膜神经病变的临床应用进展做一综述。1共聚焦显微镜原理共聚焦显微镜是一种快速、非侵入性和重复性的技术,能够以高分辨率对人类角膜进行显微结构评估。

激光共聚焦显微镜应用于本科生的实验教学设计

激光共聚焦显微镜等大型仪器的实验教学是实现“新工科”建设的重要推动力,然而目前针对本科生的大型仪器教学却未得到有效普及。通过选取适合于本科生实践操作的微生物荧光染色观察实验以及基于“雨课堂”进行线上线下教学,发挥激光共聚焦显微镜可视化强的特点,激发本科生的求知欲望和探索热情,增强学生的主观能动性,促进以教师为主导向以学生为中心的教学模式转变。实践教学表明,易于操作、可视化强的实验方案有助于学生理解和掌握激光共聚焦显微镜相关的基础知识和未来应用,拓宽学生的知识面和科研视野,提高本科生的实践创新能力。

活体共聚焦显微镜在不同类型干眼检查中的应用进展

干眼发病机制复杂,各种病因最终都会导致角结膜损伤而引起一系列眼部不适症状,了解干眼患者眼表病理改变对疾病诊治有重要意义。近年来,活体共聚焦显微镜(in vivo confocal microscopy,IVCM)越来越多地用于研究干眼的微观世界。IVCM是一种非侵入性成像工具,可无创实时检查角膜细胞及神经纤维的变化、评估睑板腺等各种结构,为了解干眼的发病机制和细胞组织层面变化提供更好的帮助。本文总结了不同类型干眼在IVCM下的眼表改变,以期进一步了解各类型干眼的病理改变,辅助临床诊疗。

尼康共聚焦显微镜使用的大数据分析

激光共聚焦显微镜是目前最精密的光学成像仪器,是生命领域重要的研究工具。兰州大学生命科学研究实验中心的尼康共聚焦显微镜两年多时间工作了1万多小时,获取了大量的观测数据。对使用记录的分析表明,仪器在每天上午9点到晚上22点处于饱和工作状态,只有在寒假期间有所降低,说明了全天候开放使用的必要性。观测结果分析得到了很多有价值的信息,例如,488 nm和561 nm激光器使用率都超过了三分之一,单激光和双激光观测占比分别是72%和24%,高灵敏检测通道使用率接近90%等。综合这些信息,可以为共聚焦显微镜的管理和培训提供科学的依据。

皮肤镜联合皮肤共聚焦显微镜观察表皮囊肿破裂伴异物巨细胞反应1例

患儿男性,13岁,因左肘部淡红色结节半年就诊,予皮肤镜联合皮肤共聚焦显微镜(皮肤CT)观察后,行手术切除治疗,组织病理示表皮囊肿(EC)破裂伴异物巨细胞反应,本例详细描述了EC破裂伴异物巨细胞反应的皮肤镜、皮肤CT及组织病理学表现。

反射式共聚焦显微镜联合光学相干断层成像在黄褐斑微观辨证中的作用

目的探讨不同中医证型女性黄褐斑皮损的微观差异。方法收集2023年1月—2023年12月在华中科技大学同济医学院附属武汉中西医结合医院皮肤科门诊确诊的113例女性黄褐斑患者,在判断其符合纳入标准并征得患者知情同意后,收集整理患者资料并对其进行中医分型,将黄褐斑分为肝郁血瘀型、脾虚型、肾阳虚型及肝肾阴虚型。同时对各型患者行反射式共聚焦显微镜(RCM)、光学相干断层成像(OCT)检查,观察和分析女性黄褐斑各中医证型皮肤组织形态学特征。结果113例女性黄褐斑患者中,中医辨证分型包括肝郁血瘀型51例(45.13%),脾虚型34例(30.09%),肾阳虚型16例(14.16%),肝肾阴虚证12例(10.62%)。入选对象皮损处RCM下表皮色素数量分布均见增加,以patternⅡ、patternⅢ模式占比居多;均有显著的黑素细胞活跃现象,主要以patternⅠ、patternⅡ模式占比居多,四种主要证型间无显著差异。肝肾阴虚型RCM下以混合型改变为主,表皮黑素颗粒分布明显增多,黑素细胞明显活跃,黑素细胞悬垂及真皮层噬黑素细胞浸润均显著;脾虚型RCM下以表皮型改变为主,真皮内噬黑素细胞浸润出现比例较低;OCT观察发现黄褐斑皮损毛细血管网深度,平均分布在皮下54.57±14.19μm之间,四种主要证型间无统计学差异。肝郁血瘀型黄褐斑皮损中,血管扩张改变较其他三型显著。结论不同中医证型黄褐斑皮损,其组织学改变具有一定差异性和规律性,皮肤影像学指标可为中医辨证,个体精准化治疗提供必要的客观参考依据。

皮肤镜和反射式共聚焦显微镜在角质形成细胞皮肤肿瘤中的应用

角质形成细胞皮肤肿瘤(KSC)是一类发病率逐年上升的肿瘤,与年紫外线辐射量直接相关,根据不同阶段可以分为光线性角化病(actinic keratosis, AK)、鲍温病(Bowen′s disease, BD)和侵袭性鳞状细胞癌(invasive squamous cell carcinoma, SCC)。KSC的诊断主要通过组织病理学确诊,但早期筛查以及后期随访,无创诊断显得尤为重要。皮肤镜(dermoscopy)和反射式共聚焦显微镜(reflectance confocal microscopy, RCM)属于在体观测皮肤表面以及表皮以下细微结构的无创诊断技术,在皮肤疾病诊断中具有极高的应用价值。本文主要总结并探讨KSC在皮肤镜和RCM下的表现特征以及皮肤镜和RCM在KSC的诊断、筛查和随访中的应用。

应用活体共聚焦显微镜观察糖尿病患者的角膜细胞

活体角膜共聚焦显微镜是一种无创、快速且全层面的技术,可以实时、动态地观察角膜组织的所有层面。共聚焦显微镜可以通过直接可视化检查角膜不同层面的形态和细胞密度。随着糖尿病患病率的不断上升,眼部并发症已经变得越发常见,并引起眼科临床工作者和科研工作者越来越多的兴趣和逐渐深入的研究。文章旨在通过采用活体角膜共聚焦显微镜观察糖尿病患者角膜组织各层的研究进展进行综述。

反射式共聚焦显微镜在白癜风患者疗效评估中的应用价值

目的分析反射式共聚焦显微镜(RCM)在白癜风患者疗效评估中的应用价值。方法纳入73例白癜风患者100处色素减退皮损为研究对象,皮损均接受单一疗法,其中28处皮损外用糖皮质激素(TCS)治疗,30处皮损外用维生素D3衍生物(TVDA)治疗,42处皮损外用钙调磷酸酶抑制剂(TCI)治疗。0~16周均分别采用Wood灯、基于白癜风可视化程度量表(VNS)、RCM监测疗效,观察3种治疗方法的起效时间,并回顾分析和比较3种监测手段的评估结果。结果RCM观察不同治疗组的起效时间均早于Wood灯观察时间,差异有统计学意义(P<0.05);Wood灯评估结果与RCM评估结果比较,0~6周RCM下起效例数明显多于Wood灯下起效例数(P<0.05),7~16周两者评估结果差异无统计学意义(P>0.05);Wood灯评估结果与VNS评估结果比较,0~16周均差异无统计学意义(P>0.05);以Wood灯评估结果为标准,RCM早期评估的灵敏度与特异性明显高于VNS(P<0.05)。结论RCM特征对白癜风疗效评估的价值较高,具有灵敏度高、特异性强的优势,可作为白癜风早期疗效评估的客观工具。

眼表综合分析仪联合角膜激光共聚焦显微镜检查对睑缘炎相关性角结膜病变45例的价值

目的应用眼表综合分析仪和角膜激光共聚焦显微镜(IVCM),探讨睑缘炎相关性角结膜病变(BKC)病人角膜细胞密度和眼表功能的变化及与蠕形螨感染的关系。方法选取2020年9月至2022年3月就诊于沧州市中心医院的45例BKC病人为观察组,同期的健康志愿者45例为对照组。根据观察组是否感染蠕形螨,分为蠕形螨感染组和未感染组。对所有研究对象使用眼表综合分析仪和IVCM进行检查,收集观察组和对照组的非侵入式平均泪膜破裂时间(NITBUTav)、非侵入式首次泪膜破裂时间(NIBUTf)、角膜荧光素染色(FL)评分、泪液分泌试验(SⅠt)、蠕形螨感染情况和角膜细胞密度。Pearson相关性分析蠕形螨感染数量与病人角膜细胞密度及眼表功能的相关性。结果观察组的NITBUTav[(6.31±2.95)s比(14.85±3.88)s]和NIBUTf[(4.65±2.03)s比(11.88±3.14)s]低于对照组,FL评分高于对照组(P<0.05)。观察组蠕形螨感染阳性率高于对照组,中央角膜浅基质层的细胞密度低于对照组(P<0.05)。观察组下方角膜基底细胞层和浅基质层的细胞密度低于对照组(P<0.05)。蠕形螨感染组的FL评分高于未感染组,下方角膜基底细胞层、浅基质层和中央角膜浅基质层的细胞密度低于未感染组(P<0.05)。蠕形螨感染数量与BKC病人下方角膜基底细胞层、浅基质层和中央角膜浅基质层的细胞密度呈负相关,与FL评分呈正相关(均P<0.05)。结论眼表综合分析仪联合IVCM可对BKC病人的眼表损害进行综合评价;BKC病人下方角膜基底细胞层、浅基质层和中央角膜浅基质层的细胞密度降低,FL评分增加,与蠕形螨感染数量增多有关。

雄激素性秃发的反射式共聚焦显微镜征象及意义

目的观察雄激素性秃发(AGA)患者皮损区反射式共聚焦显微镜(RCM)特征性变化,并测量毛囊口大小,寻找该病特异性影像学征象。方法收集30例早期AGA患者(AGA组),26例健康对照者(对照组)的RCM征象及相关临床资料,并进行比较分析。结果使用毛囊口的周长和直径作为其大小的衡量指标,对照组毛囊口周长(521.01±144.55)μm,直径(165.84±46.01)μm,AGA组毛囊口周长(410.09±167.68)μm,直径(130.54±53.37)μm,2组比较差异具有统计学意义(P=0.000)。AGA组患者的毛囊RCM下征象按照出现频率由高到低依次为:规则的外轮廓(92.2%)、模糊的内轮廓(59.4%)、非反射性边界(76.6%)、毛囊角栓(38.9%)、洋葱圈样边界(7.8%);RCM下毛囊及周围组织征象按照出现频率由高到低依次为明亮的真皮乳头边界(76.7%)、毛囊周围和真皮浅层炎性细胞浸润(73.3%)、真皮以及附属器周围纤维组织硬化(46.7%)、真皮乳头血管扩张(33.3%)。结论RCM在早期诊断AGA具有重要的临床意义。

活体激光共聚焦显微镜观察蠕形螨感染与麦粒肿关系的临床研究

目的 采用活体激光共聚焦显微镜(IVCM)观察麦粒肿和霰粒肿患者眼部蠕形螨感染情况,为分析蠕形螨感染对麦粒肿发生的影响提供参考依据。方法 选取2022年6—12月在上海爱尔眼科医院就诊为霰粒肿的患者45例(45眼)称霰粒肿组及无霰粒肿史的麦粒肿患者45例(45眼)称麦粒肿组。每位患者采取活体激光共聚焦显微镜观察患眼睑缘蠕形螨感染情况,上下睑缘选取累及所在位置8个毛囊、8个睑板腺。以蠕形螨检出≥3只为阳性、1≤蠕形螨<3只为可疑阳性、未检出为阴性。结果 活体激光共聚焦显微镜下,麦粒肿组和霰粒肿组蠕形螨感染阳性率分别为73.30%(33眼)、44.44%(20眼),可疑阳性率为31.11%(14眼)、11.10%(5眼),阴性率为15.60%(7眼)、24.44%(11眼);麦粒肿组阳性感染率明显高于霰粒肿组,差异具有统计学意义(P=0.013)。结论 与霰粒肿患者相比,麦粒肿患者的蠕形螨感染率更高,蠕形螨感染可能亦是麦粒肿发生的致病因素之一。

原子力显微镜-扫描电子显微镜共定位表征系统的研发与应用

微纳加工过程中,常有样品需要进行聚焦离子束(FIB)溅射、切割,扫描电子显微镜(SEM)以及原子力显微镜(AFM)表征,而这三类仪器都需要将样品固定在样品台上才可测试,固定不佳会影响表征结果.但固定好的样品在不同仪器之间转移、拆卸、再固定的过程中极易受到破坏.基于以上问题,设计了AFM-SEM-FIB样品共定位系统,可实现样品在此三种仪器之间的无损转移及共定位,避免珍贵样品破坏及目标丢失,以及解决AFM扫描无法控制方向、迅速调整位点等问题.在微纳表征中有优异的表现,系统已被开发成产品并量产销售.

融合免疫荧光技术的共聚焦显微镜实验教学实践

为了建立完整的科研实验技能学习体系,构建了高效可行的实验教学课程,并对近年开展的激光扫描共聚焦显微镜技术实验教学课程内容和方法进行了优化和实践。课程将科学理论与实验技能有机结合,把间接免疫荧光技术融合到共聚焦显微镜实验教学中,克服大型成像仪器教学中时间和空间限制。该教学课程帮助学生掌握共聚焦显微镜技术原理、应用和实验方法,提高学生们的实验动手能力和科研素养。

不典型疥疮的皮肤镜、皮肤反射式共聚焦显微镜及组织病理学特征分析:附60例报告

目的总结分析不典型疥疮的皮肤镜、皮肤反射式共聚焦显微镜(RCM)及组织病理学的特征。方法对60例不典型疥疮患者的一般资料、病程、临床特点等进行分析,对皮疹进行皮肤镜、RCM观察,对其中25例行组织病理学检查。结果60例不典型疥疮患者年龄以18~65岁为主(24例,40.00%)。职业主要为退休人员(22例,36.67%)、学生(12例,20.00%)及务工人员(11例,18.33%)。平均病程为(38.12±22.56)d。27例(45.00%)患者有明确疥疮接触史。皮疹主要分布在手掌(52例,86.67%)、腹部(49例,81.67%)、腕部(44例,73.33%)及外阴(38例,63.33%)。原发性皮疹类型以丘疹(55例,91.67%)为主。大部分患者(45例,75.00%)都误诊2次以上。误诊类型以瘙痒症(17例,28.33%)、特应性皮炎(16例,26.67%)及湿疹(14例,23.33%)为主。误诊后使用药物种类以糖皮质激素类为主(38例,63.33%)。皮肤镜检查示,48例表现为白色隧道及其末端棕色或深褐色小三角形结构。42例可观察到灰界线。RCM检查示,55例可看出较为典型的虫体、隧道结构及粪便结构。25例行组织病理检查显示,17例角质层中可见虫体或虫卵,12例表皮可呈急性或亚急性海绵水肿性皮炎,18例真皮中主要以嗜酸性粒细胞为主,7例真皮中以淋巴细胞浸润为主。结论不典型疥疮临床特征具有异质性,皮肤镜、RCM及组织病理学检查对不典型疥疮具有一定的诊断价值。

反射式共聚焦激光扫描显微镜在会阴色素减退性疾病中的应用

目的探讨反射式共聚焦激光扫描显微镜(reflectance confocal microscopy,RCM)在会阴色素减退性疾病中的应用价值。方法回顾性分析2018年1月—2021年12月就诊于新疆维吾尔自治区人民医院皮肤科37例患者会阴色素减退性疾病的临床、RCM及组织病理学特征。结果37例患者中白癜风15例,硬化性苔藓13例,无色素痣2例,神经性皮炎4例,皮脂腺异位1例,非特异性炎症后色素减退2例。37例患者的皮损在RCM检测的同一部位进行组织病理检查,诊断均符合RCM。结论RCM有助于会阴色素减退性疾病的诊断及鉴别诊断,对白癜风及硬化性苔藓的分期也有辅助作用。

共聚焦显微镜观察2型糖尿病患者角膜神经纤维变化情况

目的使用活体共聚焦显微镜观察2型糖尿病患者角膜神经纤维变化情况。方法本研究纳入2型糖尿病患者及正常对照人群。收集纳入人群的年龄、性别、糖尿病病程等基本信息。纳入人群均进行基本眼科检查,包括散瞳下眼底检查及角膜共聚焦显微镜检查,测量并记录角膜神经纤维长度(NFL)、角膜神经纤维密度(NFD)、角膜神经纤维分支密度(NFB)以及角膜神经纤维弯曲度(NFT)。按视网膜损害程度将糖尿病患者分为有糖尿病但无糖尿病视网膜病变组(NDR),非增殖期糖尿病视网膜病变组(NPDR)和增殖期糖尿病视网膜病变组(PDR)。结果本研究共纳入30例正常人群(30只眼)和90例2型糖尿病患者(90只眼),其中NDR组30只眼,NPDR组30只眼及PDR组30眼。对比正常组,NDR组、NPDR组及PDR组的NFL、NFD、NFB均显著降低(P<0.05),而NFT显著升高(P<0.05)。多元线性回归分析结果显示,NFL与糖尿病病程呈负相关(P<0.05);NFD与年龄、糖尿病病程呈负相关(P<0.05);NFT与年龄、糖尿病病程呈正相关(P<0.05)。结论在糖尿病视网膜病变出现前,通过活体共聚焦显微镜即可发现糖尿病患者角膜出现神经纤维的损害。随着糖尿病视网膜损害的进展,角膜神经纤维损害亦显著增加。

超高分辨率激光扫描共聚焦显微镜的成像技术与应用

超高分辨率激光扫描共聚焦显微镜在生命科学研究领域中的应用日益广泛。该文以Zeiss LSM 880 Airyscan with STEDYCON超分辨率激光共聚焦显微镜为例,介绍了Airyscan技术和基于受激发射现象的超分辨技术(STED)的原理、应用和参数设置,以期能够为科研工作者究竟采用哪种模式进行图像采集提供参考,以获得最佳的成像效果。

激光扫描共聚焦显微镜辅助诊断诺卡菌性角膜炎1例

患者,女,57岁,因无明显诱因出现右眼异物感、视力下降1个月余,于2020年1月至成都东区爱尔眼科医院就诊后收治入院。否认糖尿病病史。患者曾于外院诊断为角膜炎,于10 d前在外院行角膜激光扫描共聚焦显微镜检查,报告发现菌丝,给予常规抗细菌治疗无效转至本院就诊。眼科检查:视力右眼0.02(-2.00 DS/-0.50 DC×90°=0.15),左眼0.08(-3.50 DS/-2.00 DC×90°=1.0);右眼眼压12.4 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa),左眼眼压15.9 mmHg;右眼结膜混合充血(+),角膜中央瞳孔区可见一直径约2 mm灰白色圆形浸润灶,溃疡达浅基质层,溃疡底部较清洁,可见2个灰白色隆起针尖状病变(图1A),角膜中央直径2 mm荧光素钠染色阳性(图1B),右眼KP(-),Tyndall征(-),晶状体透明,玻璃体和视网膜未见明显异常。左眼前后节均未见明显异常。患者空腹血糖12.38 mmol/L。入院后立即行角膜刮片细胞学检查和细菌、真菌微生物培养,结果均为阴性。激光扫描共聚焦显微镜(HRT3,德国海德堡公司)检查在角膜浅基质层可见纤细分支、略微弯曲的高反光丝状结构,初次报告为“菌丝”(图2)。