人乳头瘤病毒16型晚期基因L1的原核表达质粒的构建和鉴定

目的 构建人类乳头瘤病毒 (HPV) 16型晚期基因 L1的原核表达质粒 ,以期从中选出能够高效表达 HPV16 L1的重组子 ,为进一步表达 L1蛋白奠定基础。方法 应用定向克隆策略 ,将 HPV16 L1基因分别克隆到原核表达载体 p Trac99A和 p ET- 2 1c中。结果 通过酶切鉴定选出了重组子 p Trc99A- HPV16 L1和 p ET- 2 1c-HPV16 L1。结论 HPV16

HPV18 L1基因重组DNA构建及其免疫小鼠体内特异抗体的测定

目的：人类乳头瘤病毒18型（HPV18）感染与宫颈癌的发生高度相关。其晚期基因L1编码的L1结构蛋白是刺激机体产生中和抗体的主要抗原。利用HPVL1基因重组质粒进行DNA疫苗的初步免疫学实验研究。方法：从HPV18－pBR322质粒中扩增HPV18L1基因，测序证明扩增片段的可靠性，构建了两个真核表达重组质粒HPV18L1-pcDNA3和HPV18L1－peEP4。将提纯的质粒DNA直接免疫小鼠，用HPV18L1抗原经ELISA检测小鼠血清相应抗体。结果：HPV18L1-pcDNA3和HPV18L1-pcEP4质粒DNA均能在小鼠体内表达并诱导产生HPV18特异性抗体。结论：HPV18L1重组质粒DNA直接注射小鼠可以刺激机体产生抗体。