HIV存储库:清除HIV的障碍与目标

高效抗逆转录病毒治疗(HAART)的广泛使用很大程度上控制HIV/AIDS患者的HIV,使血浆HIV-RNA下降到检出限之下,显著降低了AIDS及其相关病症的发生,但实践证明感染者体内仍有病毒潜伏存储库。静息型CD4+T细胞HIV潜伏存储库是主要的存储库,同时也是根除HIV的主要障碍,具有半衰期长、持续时间长、容易反弹等特点,现有的治疗策略无法对其清除,寻找有效的抑制HIV存储库的治疗策略已成为治疗HIV/AIDS的重要目标。

HIV潜伏库形成与维持机制的研究进展

人体感染人类免疫缺陷病毒(Human immunodeficiency virus,HIV)后,虽然抗逆转录病毒疗法(Antiretroviral therapy,ART)可有效控制病毒复制,却无法彻底清除HIV,这主要是由于潜伏病毒库的存在。HIV潜伏库是目前治愈HIV感染的主要挑战,其形成及维持机制是近几年的研究热点,本文从HIV RNA代谢角度探讨HIV潜伏库的形成机制、从细胞克隆扩增方面分析HIV潜伏库的维持机制,并对HIV RNA代谢和克隆扩增途径治愈HIV潜伏库的研究进展进行系统综述,以期为根除潜伏病毒提供新思路。

HIV潜伏病毒库清除策略的研究进展

艾滋病是严重危害人体健康的慢性传染性疾病,目前尚无有效疫苗和根治药物。HIV潜伏病毒库的存在是体内病毒不能被彻底清除的主要障碍,如何清除HIV潜伏病毒库是现阶段艾滋病治愈的研究热点。本文通过阐述HIV潜伏病毒库的形成及维持机制、存储位置、检测方法、清除策略等方面的研究进展,旨为艾滋病功能性治愈的研究提供新思路。

高效抗逆转录病毒治疗对HIV感染者外周血病毒储存库的影响

目的 探讨接受与未接受HAART的HIV-1感染者外周血淋巴细胞亚群内HIV-1病毒储存库的差异.方法 采集及分离21例未经HAART和22例经HAART的HIV-1感染者外周血单核细胞(PBMC),采用磁珠分选法分选出CD4+T细胞、CD8+T细胞和非T细胞亚群,采用高敏感度实时荧光定量PCR法检测患者外周血HIV-1 RNA及上述3类分选后淋巴细胞亚群内HIV-1整合DNA容量(Alu-PCR方法);流式细胞术检测患者血中的CD3+、CD4+、CD8+T细胞数.结果 两组非T细胞中HIV-1整合DNA容量比较差异有统计学意义(Z=-3.326,P＜0.01),CD4+和CD8+T细胞中的HIV-1整合DNA容量比较差异均无统计学意义(Z=-1.871、-1.360,P＞0.05).未HAART组患者CD4+T细胞中HIV-1整合DNA容量与外周血HIV-1 RNA水平呈正相关(r=0.594,P＜0.05),与CD4+T细胞数和CD4+/CD8+比值呈负相关(r=-0.547、-0.482,P＜0.05),与CD8+T细胞数无相关性(P＞0.05);CD8+T细胞和非T细胞中HIV-1整合DNA与CD4+T、CD8+T细胞数和CD4+/CD8+比值均无相关性(P均＞0.05).HAART组患者T细胞亚群中HIV-1整合DNA容量与CD4+T、CD8+T细胞数和CD4+/CD8+比值均无相关性(P均＞0.05).结论 HIV-1感染者病毒储存库主要存在于外周血CD4+T细胞中,少量存在于CD8+T细胞和非T细胞中;接受HAART可能并不能有效减少T细胞中的病毒储存库.

HIV-1储存库激活剂体外激活效应研究

目的探讨人类免疫缺陷病毒-1(HIV-1)储存库激活剂的体外激活效应,为临床应用提供参考。方法分离得到健康供血者外周血中的CD4^+T细胞,构建HIV-1潜伏感染的原代细胞模型。用不同浓度(0.5、1、2μmol/L)的帕比司他(Panobinostat)、伏立诺他(SAHA)(Vorinostat)、BIX-01294、JQ-1、Bryostatin-1、GS-9620、地西他滨(Decitabine)、戒酒硫(Disulfiram)、Sirolimus分别处理细胞,在不同作用时间(1、3、5 d)后利用流式细胞分析仪检测每种药物对HIV-1储存库细胞的绿色荧光蛋白(GFP)表达效率及细胞存活率,并确定每种激活剂的最佳激活浓度和作用时间。结果通过对由HIV-1启动子驱动的GFP表达效率及细胞存活率的统计分析,明确了在该细胞模型中这9种HIV-1储存库激活剂的最佳作用浓度和作用时间:Panobinostat的最佳激活浓度为1μmol/L,最佳作用时间为3 d;SAHA的最佳激活浓度为2μmol/L,最佳作用时间为1 d;JQ-1、Bryostatin-1和GS-9620在该模型中的最佳激活浓度均为1μmol/L且最佳作用时间均为1 d;BIX-01294、Decitabine、Disulfiram、Sirolimus在该模型中的最佳激活浓度均为0.5μmol/L且最佳作用时间均为1 d。横向对比发现,浓度为1μmol/L,作用时间为3 d的Panobinostat与浓度为0.5μmol/L,作用时间为1 d的Sirolimus在这9种药物中的激活效率最高,且对细胞存活无明显影响。结论系统比较确认了9种病毒储存库激活药物在体外细胞模型中的激活效率,及最佳作用浓度和时间,为后续这些药物的临床实验研究提供重要参考。

HIV-1潜伏感染的细胞模型

人类免疫缺陷病毒1型(human immunodeficiency virus type 1,HIV-1)感染导致艾滋病(acquired immunodeficiency syndrome,AIDS),严重危害人类健康.抗逆转录病毒疗法(antiretroviral therapy,ART)可高效抑制HIV-1复制,但无法治愈艾滋病,主要原因是HIV-1可在机体建立潜伏感染,形成稳定的病毒储存库.这些含有沉默的整合病毒的储存库细胞在ART治疗的个体中频率极低,人们难以对其直接分离而进行研究.因此,为研究HIV-1潜伏感染的机制及靶向治疗病毒储存库的方法,建立HIV-1潜伏感染的细胞模型非常重要.本文总结概述了多种常用的HIV-1潜伏感染的细胞模型及其应用,并分析了这些模型各自的优点和局限性,可为进一步深入研究HIV-1潜伏感染和艾滋病功能性治愈提供有效的工具参考和理论依据.