长沙地区健康成年居民胃蛋白酶原参考范围的建立

目的建立长沙地区健康成年人血清中胃蛋白酶原(PG)的参考值范围,并探讨其分布规律及相关影响因素。方法利用乳胶增强免疫比浊法对长沙地区1 279例健康人进行血清中PGⅠ和PGⅡ浓度的测定,并计算PGⅠ/PGⅡ。结果1 279例健康成年居民血清中PGⅠ、PGⅡ和PGⅠ/PGⅡ均呈偏态分布。男性血清PGⅠ浓度为62.0ng/mL、PGⅠ/PGⅡ为4.3,女性分别为59.4ng/mL、4.1,均低于男性,差异有统计学意义(P<0.05),PGⅡ的浓度与年龄呈正相关(r=0.278,P<0.01),PGⅠ/PGⅡ值与年龄呈负相关(r=-0.173,P<0.01)。男性健康成年居民血清中PGⅠ、PGⅡ和PGⅠ/PGⅡ的95%正常参考范围分别为:≥56.8ng/mL、≤22.6ng/mL、≥3.3;女性健康成年居民PGⅠ、PGⅡ和PGⅠ/PGⅡ的95%正常参考范围分别为:≥51.4ng/mL、≤23.1ng/mL、≥3.0。结论长沙地区居民血清PG水平呈明显偏态分布,受性别、年龄影响,建立当地的血清PG参考范围有助于临床对胃相关疾病的筛查与诊断。

两种方法检测超敏C反应蛋白诊断2型糖尿病患者颈动脉内中膜厚度的价值

目的探讨两种方法检测超敏C反应蛋白(hs-CRP)对2型糖尿病(T2DM)患者颈动脉内中膜厚度(IMT)增加的诊断价值。方法选择2013年4月至2015年4月我院收治的84例T2DM患者,以彩色多普勒超声诊断仪检查患者颈动脉的结果为标准,按IMT<0.9 mm和IMT≥0.9 mm分成颈动脉正常组40例和颈动脉增厚组44例。同期另选42例健康查体者为正常对照组,分别采用乳胶增强免疫散射比浊法和颗粒增强免疫透射比浊法检测所有受检者的全血hs-CRP和血清hs-CRP的水平,用受试者工作特征(ROC)曲线评价两种方法检测hs-CRP对T2DM患者IMT增加的诊断效能。另用总胆固醇(TC)联合全血hs-CRP检测评价对T2DM患者IMT增加的诊断效能。结果两种方法显示IMT增厚组的全血[(4.78±1.04)mg/L]和血清hs-CRP水平[(4.43±0.95)mg/L]均高于IMT正常组[(1.85±0.78)mg/L和(1.70±0.89)mg/L]和正常对照组[(0.98±0.67)mg/L和(0.87±0.59)mg/L],差异均有统计学意义(P<0.05)。用ROC曲线分析得全血hs-CRP的诊断灵敏度(76.2%)较高,而特异性(47.1%)较低,曲线下面积为0.612,而颗粒增强免疫透射比浊法检测血清hs-CRP的诊断灵敏度(69.0%)较低,特异性(52.9%)较高,曲线下面积为0.596;全血hs-CRP联合总胆固醇(TC)诊断的灵敏度(83.3%)和特异性(64.7%),曲线下面积为0.732,均高于hs-CRP单项指标诊断效能。结论 T2DM患者IMT增加时,血液中hs-CRP水平升高;乳胶增强免疫散射比浊法检测hs-CRP对T2DM患者IMT增加的诊断效能优于颗粒增强免疫透射比浊法;全血hs-CRP联合TC检测能提高对T2DM患者IMT增加的诊断灵敏度和特异性。

胶乳增强免疫比浊法测定心型脂肪酸结合蛋白的方法学评价

目的对胶乳增强免疫比浊法定量测定血清心型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)的方法进行临床实验评价。方法分析胶乳增强免疫比浊法测定H-FABP的精密度、线性范围、前带反应、回收率和干扰因素,并考察其与酶联免疫吸附法的相关性。结果胶乳增强免疫比浊法测定血清H-FABP批内精密度的高值与低值变异系数分别为0.54%、1.56%;批间精密度的高值与低值变异系数分别为0.58%、1.8%,回收率为96.2%~99.3%。线性测定良好,可检测范围为2.5 ng/m L^160 ng/m L,标准品曲线回归方程为Y=1.02X+0.31,标准品检测相关性R2≥0.995。跟国外同类试剂相比较,曲线回归方程为Y=0.97X+0.13,检测相关性R2=0.998。实验组血清H-FABP检测结果为(78.3±10.4)ng/m L,与对照组相比差异有统计学意义。结论胶乳增强免疫比浊法测定血清H-FABP快速、准确、可靠,适用于临床急性心肌梗死的早期诊断。

羧基化聚乙烯基萘纳米微球的制备和应用

以乙烯基萘(VN)为聚合单体,采用乳液聚合法制备聚乙烯基萘(PVN)纳米微球。通过对其羧基化与β2微球蛋白(β2-M)抗体偶联,制成免疫检测试剂。分别用聚苯乙烯(PS)和PVN检测试剂测定β2-M含量,数据经统计学处理和分析,对自制的PVN纳米微球胶乳增强免疫比浊(LETIA)检测试剂的性能进行评价。自制的羧基化PVN纳米微球免疫试剂成功对标准样本进行了检测并在一定范围内有较好的线性,比PS检测试剂更加灵敏。利用该研究采用的方法和条件可以成功制备粒径大小可控、单分散的羧基化PVN纳米微球,是比PS更优的LETIA新载体,具有很好的临床应用前景。

聚乙烯基萘纳米微球制备及在胶乳增强免疫比浊法检测中的应用

目的:采用乳液聚合法制备聚乙烯基萘(PVN)纳米微球,将其用作β2微球蛋白(β2-M)胶乳增强免疫比浊(LETIA)检测试剂的新型载体。方法:以乙烯基萘(VN)为聚合单体,十二烷基硫酸钠(SDS)为乳化剂,碳酸盐缓冲液为水相,制备PVN纳米微球,并对微球的理化性能进行表征。以物理吸附的方式分别将β2-M的抗体连接到PVN及聚苯乙烯微球表面,制备得到用于β2-M检测的两种LETIA试剂,并在生化分析仪上对试剂的性能进行评价。结果:制备的PVN纳米微球具有均一的粒径分布。利用自制的以PVN纳米微球为载体的LETIA免疫检测试剂在一定范围内有较好线性,同时与自制的以同等粒径PS纳米微球为载体的LETIA检测试剂相比具有更高灵敏度。结论:PVN纳米微球作为LETIA检测试剂的载体具有很好应用前景。

小颗粒免疫胶乳的制备及应用研究

用乳液聚合法制备了０．２μｍ的小颗粒聚苯乙烯及羧化聚苯乙烯胶乳，并探索了致敏的免疫胶乳在临床检验中的应用。在凝集试验方面，以弓形虫抗体检测为模式，用弓形虫抗原化学交联致敏羧化聚苯乙烯胶乳，建立了微量板法胶乳凝集试验。初步临床检测，敏感性和特异性分别为９４．４％和９３．３％。在免疫浊度方面，以Ｃ－反应蛋白（ＣＲＤ）测定为模式，用羊抗ＣＲＰ物理吸附致敏聚苯乙烯胶乳，建立了胶乳增强的免疫透射浊度测定法，在８０～４００μｇ／Ｌ范围内有良好的线性关系。

β2微球蛋白胶乳增强免疫比浊试剂制备的影响因素

【目的】以β2微球蛋白(β2 microglobin,β2-M)为目标物,研究胶乳增强免疫比浊试剂(latex-enhanced turbidimetric immunoassay,LETIA)的制备条件对其检测性能的影响。【方法】采用碳二亚胺法将β2-M抗体偶联到羧基化聚苯乙烯微球(carboxylated polystyrene,PS)的表面,制备了β2-M-LETIA检测试剂。考察胶乳微球的粒径、偶联试剂的用量以及抗体加入量等条件对β2-M-LETIA试剂检测性能的影响。【结果】粒径为120 nm和150 nm的微球具有较好的效果;抗体偶联量随1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC)和N-羟基琥珀酰亚胺(N-hydroxysuccinimide,NHS)两种偶联试剂用量的增加而增大,当其用量达到0.25 mg/ml球时抗体的偶联量达到最大值;最佳的抗体加入量为6 mg/ml。【结论】得到了作为载体的微球粒径、EDC和NHS的用量以及抗体的加入量等制备条件对β2-M-LETIA检测试剂的抗体偶联量和检测性能的影响规律。