Unusual Detection of Lathosterol in Amniotic Fluids Investigated for the Determination of Cholesterol and 7-Dehydrocholesterol for Suspected Smith-Lemli-Opitz Syndrome

The Smith-Lemli-Opitz syndrome (SLOS), is an autosomal recessive disorder caused by a 7-dehydrocholesterol reductase deficiency, which is characterized by abnormally elevated amniotic fluid 7-DHC (7-dehydrocholesterol) concentrations. A GC/FID (gas-chromatography with a flame ionization detector) and GC/MS (gas-chromatography with a mass detector) method was optimized for the detection of cholesterol and 7-DHC in amniotic fluids. The quantitative determination of cholesterol in 39 control amniotic fluids evidenced that between the fourth and fifth month of pregnancy the levels of this analyte are quite constant, the concentration of total and free cholesterol being respectively 10.3 μg·mL﹣1 (SD = ±3.6) and 1.7 μg·mL﹣1 (SD = ±0.91), while the analysis of 60 amniotic fluids potentially related to SLOS, showed a higher variability of cholesterol levels. Moreover, in 13 samples an analyte which did not correspond either to cholesterol or to 7-DHC was detected. A GC/MS investigation allowed us to identify this compound as lathosterol, a precursor of cholesterol in the biosynthetic pathway.

依折麦布联合阿托伐他汀类对低密度脂蛋白胆固醇未达标的急性冠脉综合征患者胆固醇代谢的影响

目的探讨依折麦布联合阿托伐他汀类对低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)未达标的急性冠脉综合征(acute coronary syndrome,ACS)患者血清胆固醇代谢标记物7烯胆甾醇、24-脱氢胆甾烷醇、油菜甾醇、豆固醇和谷甾醇的影响。方法入选2012年6月-2014年6月于我院住院的ACS患者,常规应用他汀类药物4周后LDL-C未达标80例,随机分为双倍阿托伐他汀钙治疗组(40 mg,每晚1次)38例和阿托伐他汀钙联合依折麦布治疗组(阿托伐他汀钙20 mg,每晚1次;加用依折麦布10 mg,每晚1次)42例,治疗12周后,分析两组治疗前后血清胆固醇代谢标记物的变化。结果治疗12周后阿托伐他汀钙联合依折麦布治疗组LDL-C水平较双倍阿托伐他汀钙治疗组明显下降[(1.81±0.38)mmol/L vs(2.01±0.43)mmol/L,P<0.05],两治疗组7烯胆甾醇和24-脱氢胆甾烷醇水平较治疗前均下降,双倍阿托伐他汀钙治疗组下降更明显(P均<0.05)。治疗后12周后,阿托伐他汀钙联合依折麦布治疗组油菜甾醇、豆固醇和谷甾醇水平均明显下降,而双倍阿托伐他汀钙治疗组油菜甾醇、豆固醇和谷甾醇水平均明显上升。结论对于应用他汀类药物后LDL-C不达标的ACS患者,阿托伐他汀钙联合依折麦布可同时降低胆固醇代谢标记物7烯胆甾醇、24-脱氢胆甾烷醇、油菜甾醇、豆固醇和谷甾醇,更有效地降低LDL-C水平。

气质联用法同时测定人血浆中4种非胆固醇类固醇含量

目的建立同时测定人血浆中植物固醇和胆固醇合成前体物质的气相色谱-质谱(GC-MS)定量分析方法,为研究患者胆固醇代谢提供检测手段。方法色谱柱为HP-5MS石英毛细管柱(30 m×0.25μm×0.25 mm),初始柱温200℃,保持2 min,程序升温15℃.min-1至280℃,保持30 min,不分流进样。血浆经碱性醇溶液皂化后用正己烷萃取,再用衍生化试剂(BSTFA+1%TMCS)衍生后进样,采用全扫描(Scan)定性,选择离子监测(SIM)内标法定量。结果胆固醇、2,4-脱氢胆固醇、7-烯胆固醇、菜油固醇、β-谷固醇线性关系良好,日内日间精密度均分别小于7.9%与9.8%,加样回收率分别在89.5%～106.3%之间。应用本方法分别测定20名高血脂患者中非胆固醇类固醇的含量,其中2,4-脱氢胆固醇的含量为(0.39±0.08)mg.L-1,7-烯胆固醇的含量为(3.41±0.83)mg.L-1,菜油固醇的含量为(3.12±0.53)mg.L-1,β谷固醇的含量为(4.22±0.67)mg.L-1。结论 GC-MS法可同时测定人血浆中4种非胆固醇类固醇含量,并具有良好的准确度与精密性,适用于患者胆固醇代谢个体差异的分析。

GC-MS法检测血清中血脂新型标志物的方法学建立及评价

目的建立气相色谱与质谱联用法（GC—MS）同时检测人血清中角鲨烯、2，4-脱氢胆固醇、7-烯胆甾烷醇、菜油固醇、p-谷固醇5种血脂新型标志物的分析方法，建立各物质的参考值范围，用于客观地评价个人胆固醇代谢。方法血清经过碱性醇溶液皂化、正己烷提取、BSTFA＋TMCS（99：1）进行硅烷化等前处理，采取GC—MS测定各年龄组、不同性别组各物质的含量。结果5种血脂新型标志物线性关系良好，日内精密度CV％为0．878％-7．16％，日间精密度CV％为2．78％-8．75％，加标回收率在90．8％-104．5％。各年龄组的非胆固醇类固醇参考值无显著性差异；性别组中角鲨烯、7-烯胆甾烷醇、2，4-脱氢胆固醇中无显著性差异，菜油固醇、β-谷固醇有显著性差异。结论．利用GC—MS法可同时检测血清中5种血脂新型标志物并具有良好的准确性和精密性，可选7-烯胆甾烷醇、β-谷固醇评价个体胆固醇代谢差异。