乳杆菌Lb.casei.Zhang对小鼠血清中细胞因子水平的影响

目的:观察及评价乳杆菌Lb.caseiZhang对小鼠血清中IFN-γ、IL-12、IL-1α、TNF-α水平的影响。方法:应用分离自酸马奶,并经过耐酸性实验、人工胃肠消化液中存活能力筛选的L.caseiZhang,制备成热致死菌体和活菌制剂各分成高、中、低三个剂量组灌服小鼠至15d,采用ELISA法检测血清中IFN-γ、IL-12、IL-1α、TNF-α的含量。结果:活菌制剂高、中剂量组小鼠血清中IFN-γ、IL-12含量明显高于对照组(p<0.05),IL-1α、TNF-α含量明显低于对照组(p<0.01);灭活菌制剂对细胞因子的影响与对照相比无显著差异。结论:Lb.caseiZhang活菌制剂的免疫调节作用优于热致死菌体制剂。活菌制剂对小鼠的细胞免疫功能产生了多方面的、有利于机体免疫功能状态的调节作用。

益生菌Lb.casei Zhang在酸乳酪制作中的发酵特性

在传统乳酪制作中添加不同量(0～3%)的Lb.casei Zhang,以不添加组作为空白对照,观察Lb.casei Zhang的发酵特性。结果表明,实验组在发酵3～6 h达到对数生长期,发酵6 h时Lb.casei Zhang活菌数可达到6.03×107 g-1,12 h时活菌数达1.58×108 g-1。实验组样品黏度均较对照组显著增加(p<0.05);与对照组相比实验组蛋白质水解程度略高,但差异不显著。在4℃冷藏过程中,实验组后酸化现象不明显;28 d后,添加3.00%Lb.casei Zhang的活菌数达9.77×108 g-1;对照组在冷藏中黏度几乎不变化,其余各组样品的黏度在冷藏7～14 d中显著降低,之后到28 d黏度变化不明显。

喂饲Lactobacillus casei Zhang对大鼠体内脂质代谢的影响

从内蒙古锡林郭勒盟正蓝旗传统酸马奶中分离筛选到1株降胆固醇功效较好的乳杆菌Lactobacillus．casei Zhang。用Lb．casei Zhang灌胃高脂血症模型大鼠研究其对血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的影响。结果表明:灌胃14 d后,Lb．casei Zhang热致死菌体组大鼠血清中TC浓度较对照组显著降低(P<0．01),TG浓度虽有降低但不呈显著性,同时HDL-C浓度显著升高(P<0．05);Lb．casei Zhang活菌体组大鼠血清中TC、TG浓度均有所降低,HDL-C浓度升高,但未呈显著性。灌胃28 d后,Lb．casei Zhang热致死菌体组大鼠血清中TC浓度较对照组显著降低(P<0．05),Lb．casei Zhang活菌体组TC浓度及两组TG、LDL-C浓度降低,但差异不显著,HDL-C未发生明显的改变。Lb．casei Zhang热致死菌体组和活菌体组粪便中的胆酸含量均增高,但只有热致死菌体组差异显著(P<0．05)。通过实验表明Lb．casei Zhang通过菌体对胆固醇的吸收吸附及减少肝肠循环中的胆酸来达到降血脂的功效。

益生菌Lactobacillus casei Zhang对酸奶风味、质地及感官特性的影响

将益生菌Lactobacillus casei Zhang(Lb.casei Zhang)以1.0×107g-1的添加量与商业酸奶发酵剂YC-X11共同接种进行发酵乳制备。发酵结束(pH=4.5)于4℃冷藏24h后,分别测定发酵乳样品的酸度、黏度、脱水收缩性、挥发性风味物质、L.delbrueckii subsp.Bulgaricus、S.thermophilus和Lb.casei Zhang活菌数及对其进行感官鉴评。结果表明,Lb.caseiZhang对发酵乳样品的酸度、黏度、脱水收缩性、S.thermophilus活菌数无影响(P>0.05),可促进L.delbrueckii subsp.Bulgaricus生长(P<0.05),并使酸奶样品中挥发性风味物质总的质量分数提高17.1%,从而总体上提高发酵乳的感官品质。同时Lb.casei Zhang在发酵乳中具有良好的稳定性,因而益生菌Lb.casei Zhang与商业酸奶发酵剂YC-X11复配进行发酵乳生产具有极大的可行性。

Lb．casei．Zhang肽聚糖体内外抗肿瘤作用

为研究干酪乳杆菌Lb.casei.Zhang细胞壁肽聚糖(peptidoglycan;PG)的抗肿瘤作用,用流式细胞仪检测肽聚糖对人胃癌BGC-823细胞生长周期的影响。以肝癌H22细胞移植瘤昆明小鼠为模型,分别采用原位杂交和免疫组化方法检测小鼠移植瘤增殖细胞核抗原(PCNA)mRNA的表达以及凋亡因子Bcl-2和Bax基因的蛋白表达。结果显示,肽聚糖能够阻滞人胃癌BGC-823细胞生长于G0/G1期;实验组PCNA mRNA的表达和Bcl-2基因的蛋白表达平均光密度值均明显低于对照组,而Bax基因蛋白表达情况则相反,与对照组比较,均差异显著(α=0.05),且抑瘤率达37.21%。提示干酪乳杆菌Lb.casei.Zhang细胞壁肽聚糖具有抗肿瘤作用。

益生菌Lb. casei Zhang 在酸乳中发酵特性研究

将益生菌Lb.casei Zhang分别以0、2×106、4×106、1×107cfu/g的添加量,与商业酸乳发酵剂YC-X11共同接种进行酸乳制备。分别在发酵及贮藏期间测定酸乳样品的pH值、粘度及S.thermophilus,L.delbrueckii subsp.bulgaricus和Lb.casei Zhang的活菌数,并对上述指标之间的相关性进行了分析。结果表明,在发酵6h后,添加Lb.casei Zhang的酸乳样品,其pH值变化及S.thermophilus和L.delbrueckii subsp.bulgaricus的活菌数均与对照组差异不明显(p<0.05),且各组酸乳样品测定指标间无相关性(p<0.05)。变温贮藏21d期间,添加Lb.casei Zhang的酸乳样品,其pH值、粘度、脱水收缩敏感性及S.thermophilus的活菌数与对照组差异不显著(p<0.05);添加Lb.casei Zhang的酸乳样品中L.delbrueckii subsp.bulgaricus的活菌数明显低于对照组(p<0.05)。Lb.casei Zhang的添加量为2×106和1×107cfu/g时,样品pH值均与粘度呈显著正相关(p<0.05),添加量4×106cfu/g的Lb.casei Zhang时,样品粘度与脱水收缩敏感性及pH值与活菌数均呈显著负相关(p<0.05)。

乳酸杆菌Lactobacillus casei.Zhang的抗肿瘤作用及机制

目的观察益生菌Lactobacillus casei.Zhang(Lb.casei Zhang)对H22荷瘤小鼠的抑瘤作用,初步探讨其可能的作用机制。方法以荷H22肝癌小鼠为模型,免疫组化法检测小鼠肿瘤细胞中癌基因Bcl-2和抑癌基因Bax蛋白的表达。结果 Lb.casei Zhang对H22移植性肿瘤的生长有一定的抑制作用,中高剂量组的抑瘤率分别达到40.22%(P<0.01)和41.90%(P<0.01)。可显著提高小鼠血清中TNF-β含量,分别达到(15.19±4.90)ng/mL(P<0.05)、(23.32±4.37)ng/mL(P<0.01)。H22肿瘤细胞Bcl-2蛋白表达明显降低,Bax蛋白表达增强。结论益生菌Lb.casei Zhang对H22荷瘤小鼠肿瘤生长有明显抑制作用,其抗肿瘤机制可能是通过增强荷瘤小鼠免疫功能及同时促进肿瘤细胞表达Bax蛋白,抑制Bcl-2蛋白表达,诱导肿瘤细胞凋亡发挥抗肿瘤的作用。

乳杆菌Lb．casei Zhang诱生小鼠脾细胞IL-2和IL-2Rα的作用

目的：研究乳杆菌Lb．casel Zhang对小鼠脾细胞IL-2和其受体IL-2R仪的诱生作用，从基因转录水平探讨其免疫调节的特点。方法：利用分离自酸马奶，并经过耐酸性实验、人工胃肠消化液中存活能力筛选的Lb．caseiZhang，制备活菌制剂分高、中、低三个剂量组灌服小鼠，分别于第3、7、11、15d，摘取脾脏，计算脾指数，RT—PCR法测定睥脏中IL-2和IL-2R仪mRNA的转录水平。结果：脾指数在连续灌服7d后开始明显增加，至11d时仍保持较高水平，并具有一定的剂量依赖效应；IL-2和IL-2R仪mRNA的转录水平与脾指数相适应在连续灌服7d后开始明显增加，至11d时达到高峰，且具有一定的剂量依赖效应。结论：乳杆菌Lb．caseiZhang能够诱导脾脏淋巴细胞自分泌生长因子IL-2及其活化受体IL-2R仅的转录及分泌，进而激活Till细胞，从而发挥免疫调节作用。

益生菌Lb. casei Zhang对H22荷瘤小鼠化疗的减毒增效作用

目的:研究益生菌Lb.casei Zhang对荷H22肿瘤小鼠化疗的减毒增效作用。方法:以荷H22肝癌化疗小鼠为模型,以腹腔注射环磷酰胺(CTX)联用Lb.casei Zhang活菌制剂高、中、低三个剂量灌服小鼠12d后,计算脾指数和肿瘤生长抑制率,采用碘化丙啶(PI)染色利用流式细胞仪检测肿瘤细胞细胞周期和凋亡率。结果:益生菌Lb.casei Zhang对荷瘤鼠化疗所引起的免疫功能低下具有明显的恢复作用,Lb.casei Zhang具有协同增强CTX将肿瘤细胞周期阻滞于S期,抑制肿瘤细胞的增殖。结论:益生菌Lb.casei Zhang能够拮抗化疗所引起的免疫抑制,可以改善化疗荷瘤小鼠一般状况,提高其生存质量,协同增强化疗药物的抗肿瘤作用,具有明显的化疗减毒增效作用。

干酪乳杆菌Zhang在模拟人工胃液下膜脂肪酸的变化分析

微生物为应对不利于其生长的环境变化,细胞膜脂肪酸组分和含量等细胞内部成分均会发生改变。为了探究干酪乳杆菌Zhang在模拟人工胃液下细胞膜脂肪酸变化,将干酪乳杆菌Zhang对数生长末期的菌体分别置于pH为2.5、3、3.5的人工胃液中处理,不同时间点取样,提取脂肪酸后通过气相色谱法测定其组分和含量。结果显示,在模拟人工胃液下,干酪乳杆菌Zhang有主要的7种脂肪酸发生了变化,从相对百分含量上看,细胞中不饱和脂肪酸增加,饱和脂肪酸减少。推测干酪乳杆菌Zhang通过调节脂肪酸的种类和含量改变细胞膜流动性来维持其生存能力,这为初步解析干酪乳杆菌Zhang逆境生存机理奠定了基础。