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基于CRISPR/Cas9系统的番茄LeMYB330突变体制作及突变位点分析
1
作者
康志强
邓小大
+6 位作者
袁永强
蔡书静
郑礼军
赵利锋
叶雯华
王燕
王新荣
《分子植物育种》
CAS
北大核心
2022年第23期7785-7795,共11页
植物MYB转录因子在植物防卫反应过程中发挥重要作用,番茄LeMYB330是与根结线虫效应蛋白MiPDCD6互作的靶标蛋白。本研究利用在线软件CRISPR-GE (http://skl.scau.edu.cn/)设计了番茄LeMYB330基因编辑双靶点,在番茄LeMYB330基因第3外显子...
植物MYB转录因子在植物防卫反应过程中发挥重要作用,番茄LeMYB330是与根结线虫效应蛋白MiPDCD6互作的靶标蛋白。本研究利用在线软件CRISPR-GE (http://skl.scau.edu.cn/)设计了番茄LeMYB330基因编辑双靶点,在番茄LeMYB330基因第3外显子区域找到彼此相距124 bp的2个靶点,分别为TG1:5’-ATGCAACAGTGGTACAACTGAGG-3’和TG2:5’-GGTGGTCAAGAAGTTGTATGAGG-3’。将靶点T1和靶点T2的sg RNA表达盒进行Golden Gate克隆连接到pYLCRISPR/Cas9Pubi-H双元表达载体,成功获得CRISPR/Cas9重组双元载体(pCas9-MYB330T1T2)。利用农杆菌介导的遗传转化将重组载体转入‘新金丰一号’番茄愈伤组织,经潮霉素抗性筛选获得共计50株CRISPR/Cas9突变番茄植株。番茄转基因后代测序结果表明,有3株阳性植株发生突变,由此成功构建了番茄LeMYB330突变体。试验结果可为加快番茄LeMYB330功能基因资源的开发利用提供有力的理论与方法支持。
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关键词
番茄
lemyb330
基因
CRISPR/Cas9
原文传递
题名
基于CRISPR/Cas9系统的番茄LeMYB330突变体制作及突变位点分析
1
作者
康志强
邓小大
袁永强
蔡书静
郑礼军
赵利锋
叶雯华
王燕
王新荣
机构
华南农业大学植物保护学院
出处
《分子植物育种》
CAS
北大核心
2022年第23期7785-7795,共11页
基金
广东省基础与应用基础基金项目(2019A1515012080)
国家自然科学基金项目(31171825,30771409)共同资助。
文摘
植物MYB转录因子在植物防卫反应过程中发挥重要作用,番茄LeMYB330是与根结线虫效应蛋白MiPDCD6互作的靶标蛋白。本研究利用在线软件CRISPR-GE (http://skl.scau.edu.cn/)设计了番茄LeMYB330基因编辑双靶点,在番茄LeMYB330基因第3外显子区域找到彼此相距124 bp的2个靶点,分别为TG1:5’-ATGCAACAGTGGTACAACTGAGG-3’和TG2:5’-GGTGGTCAAGAAGTTGTATGAGG-3’。将靶点T1和靶点T2的sg RNA表达盒进行Golden Gate克隆连接到pYLCRISPR/Cas9Pubi-H双元表达载体,成功获得CRISPR/Cas9重组双元载体(pCas9-MYB330T1T2)。利用农杆菌介导的遗传转化将重组载体转入‘新金丰一号’番茄愈伤组织,经潮霉素抗性筛选获得共计50株CRISPR/Cas9突变番茄植株。番茄转基因后代测序结果表明,有3株阳性植株发生突变,由此成功构建了番茄LeMYB330突变体。试验结果可为加快番茄LeMYB330功能基因资源的开发利用提供有力的理论与方法支持。
关键词
番茄
lemyb330
基因
CRISPR/Cas9
Keywords
Tomato
lemyb330 gene
CRISPR/Cas9
分类号
S641.2 [农业科学—蔬菜学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
基于CRISPR/Cas9系统的番茄LeMYB330突变体制作及突变位点分析
康志强
邓小大
袁永强
蔡书静
郑礼军
赵利锋
叶雯华
王燕
王新荣
《分子植物育种》
CAS
北大核心
2022
0
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参考文献
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