Extrusion process of Acanthopanax senticosus leaves enhances the gastroprotective effect of compound 48/80 on acute gastric mucosal lesion in rats

OBJECTIVE:To investigate the gastroprotective effects of Acanthopanax senticosus leaves(ASLs)extrusion on acute gastric mucosal lesion in rats induced by compound 48/80(C48/80).METHODS:Rats were divided into six groups:normal;C48/80-induced gastric lesion control;gastric lesion positive control(famotidine 4 mg/kg);gastric lesion administered with two levels of extruded ASLs(ASLE,40 and 200 mg/kg);and gastric lesion treated with ASLs(ASL 200 mg/kg).Mucus secretion/damage was determined by immunohistological staining.Immunofluorescence and western blotting were performed to determine gastric mucosal Bax and Bcl-2 expression.Gastric mucosal oxidative-stress-related enzymes and malondialdehyde were determined.RESULTS:C48/80-induced mucus depletion and inflammation in the gastric mucosa were significantly attenuated by ASLs.The increased serum serotonin and histamine concentrations in C48/80-treated rats were also attenuated by ASLs.Gastric mucosal Bax protein expression was increased and Bcl-2 expression was decreased after C48/80 treatment,and ASLs ameliorated Bax and Bcl-2 expression.The extrusion process significantly augmented the effects of ASLs in a dosedependent manner.ASLEs at 200 mg/kg normalized mucus damage/secretion,C48/80-induced increases of mucosal myeloperoxidase activity(index of inflammation),xanthine oxidase,and malondialdehyde content(index of lipid peroxidation).The effects of ASLs on Bax and Bcl-2expression were also enhanced by extrusion.Furthermore,these effects of ASLEs at 200 mg/kg were similar to those of famotidine,a histamine H2-receptor antagonist commonly used to treat gastric ulcers.CONCLUSION:ASLEs prevented acute gastric mucosal lesion progression induced by C48/80,possibly by inducing mucus production,and reduced inflammation and oxidative stress in gastric mucosa through an anti-apoptotic mechanism.

微生物发酵对刺五加叶黄酮类成分生物合成的影响

旨在高效生产刺五加叶中黄酮类成分。分别采用乳酸杆菌及酿酒酵母发酵刺五加叶,以金丝桃苷及槲皮素为指标,采用HPLC法,观察其发酵后含量的动态变化,并在此基础上,对刺五加叶发酵样品中黄酮成分采用D101大孔树脂柱及硅胶柱色谱进行分离。结果表明,经乳酸杆菌发酵后,刺五加叶中金丝桃苷含量显著降低,由4.00±0.15(mg/g)降低到1.71±0.09(mg/g),槲皮素含量显著增加,由0.03±0.33(mg/g)增加到0.437±0.15(mg/g);经酿酒酵母发酵后,其金丝桃苷及槲皮素含量均显著增加,金丝桃苷含量由4.00±0.15(mg/g)增加到5.97±0.48(mg/g),槲皮素含量由由0.03±0.33(mg/g)增加到1.40±0.65(mg/g)。经柱色谱分离,从刺五加叶发酵样品中分离得到了金丝桃苷及槲皮素。研究结果可为采用酿酒酵母发酵刺五加叶定向高产金丝桃苷及槲皮素及探讨黄酮类成分生物合成机制提供参考。

平凉刺五加叶生药学研究及其有效成分含量测定

采用性状鉴别和显微鉴别法对平凉刺五加植株进行定性分析,并采用高效液相色谱法测定平凉刺五加叶中有效成分的含量。性状鉴别观察到平凉刺五加叶的形态多为椭圆状倒卵形或长圆形,基部阔楔形,边缘重锯齿,具有特殊香气。显微鉴别显示,平凉刺五加叶粉末中多含有不定式气孔、螺纹导管、草酸钙簇晶、纤维等。刺五加苷B、刺五加苷E的回归方程具有良好的线性关系,精密度、稳定性、重复性试验的RSD均小于5.00%。3种提取方法中微波超声协同萃取法有效成分含量最高,刺五加苷B、刺五加苷E含量分别为0.085%、0.358%;微波萃取法次之,含量分别为0.075%、0.328%;超声辅助提取法含量最低,分别为0.054%、0.222%。

刺五加叶化学成分及药理作用研究进展

刺五加叶作为传统药材已经被大量应用于现代化工研究、医药研究和日常饮食中,在古今中外均有着广泛的应用。已经被鉴定出的皂苷类、黄酮类、氨基酸、酚酸及有机酸类化合物等多种成分,表现出保护神经系统、镇静催眠、降糖降脂、抗氧化及抗炎等药理作用。本文对刺五加叶的化学成分及其药理作用研究进展予以归纳综述,以期能够为日后更进一步探索刺五加叶应用前景提供科学依据。

反相高效液相色谱法测定刺五加叶中绿原酸和金丝桃苷含量

目的:建立HPLC法定量分析东北地区不同产地刺五加叶中绿原酸和金丝桃苷的含量。方法:采用三种不同品牌C18色谱柱,流动相A为0.3%磷酸溶液,流动相B为乙腈,梯度洗脱:0~3 min,95%A;3~10 min,95%~80%A;10~40 min,80%A;40~50 min,80%~10%A;流速1.0 m L/min;柱温35℃;进样量5μL;检测波长为354 nm。结果:绿原酸和金丝桃苷分别在0.39~5.9μg、0.08~1.2μg范围内呈良好的线性关系;精密度、稳定性、重复性试验RSD<1.1%,绿原酸和金丝桃苷的加样回收率分别为102.3%、98.4%。不同产地样品绿原酸含量范围为1.01 mg/g~10.71 mg/g;金丝桃苷含量范围为0.25 mg/g~1.49 mg/g。结论:建立的HPLC法可有效考察刺五加叶中多成分含量,不同地区间刺五加叶中绿原酸和金丝桃苷含量有差异。

不同产地刺五加叶中14种微量元素含量测定与分析

目的:了解不同产地刺五加叶中钠(Na)、钙(Ca)、镁(Mg)、钴(Co)、镍(Ni)、钒(V)、铬(Cr)、锂(Li)、锑(Sb)、砷(As)、镉(Cd)、汞(Hg)、铅(Pb)、铜(Cu)14种微量元素的含量。方法:采用电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)测定,选取同位素铍(Be)、铋(Bi)、铟(In)、钪(Sc)、锗(Ge)作为内标溶液进行测定。结果:各元素线性关系均良好(r>0.997),各元素精密度试验RSD值均小于5.91%,重复性RSD值在1.91%~6.05%之间,平均回收率为73.94%~108.75%,不同产地刺五加叶中Ca、Mg元素含量最高,远高于其他元素,同时药材安全性均符合要求。结论:该方法具有分析速度快和准确度高的优点,可用于刺五加叶中14种微量元素的含量测定。

三波长-分光光度法测定千山刺五加叶和果总黄酮的含量

采用三波长-分光光度法测定千山刺五加叶和果中黄酮的含量,消除了由于刺五加叶和果中黄酮光谱吸收峰不对称给定量分析造成的影响,并校正了由于干扰组分的吸收光谱具有线性吸收产生的基线倾斜。结果表明:回归方程ΔA=88.795C-0.2060;相关系数r=0.9994;黄酮浓度在0～40.6μg/ml范围内,分别在波长λ1=463nm、λ2=417nm、λ3=382nm测吸光度时,则ΔA与浓度C之间呈良好的线性关系,可按标准曲线法进行定量分析。本法的回收率为96.86%～102.46%;变异系数小于0.136%。方法的准确度与精密度均令人满意,而且操作简便易行。

刺五加叶中总黄酮的分离提取及抗氧化活性研究

对刺五加叶总黄酮提取工艺进行了研究,同时利用1,1-二苯基-2-苦基苯肼自由基(DPPH)法和羟基自由基(OH)法对刺五加叶总黄酮提取物进行了的抗氧化评价。结果表明:超声提取法对刺五加叶总黄酮提取效果最佳。超声提取正交试验结果表明,刺五加叶总黄酮的最佳提取工艺为:以50%乙醇溶液提取,提取时间为1.5h,提取次数为2次,溶媒倍量为20倍,提取率为5.192%。抗氧化活性结果表明,刺五加叶总黄酮对DPPH和.OH均有良好的清除作用,且随着其浓度的增加,清除能力增强。

乳酸菌发酵对刺五加叶活性成分、体外抗氧化作用与降血糖相关酶的影响

为了对刺五加叶在益生菌发酵保健品领域的应用提供理论基础,以刺五加叶为原料,采用嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌、植物乳杆菌3种乳酸菌进行发酵,对发酵前后刺五加叶中活性成分含量变化进行研究,并评价刺五加叶乳酸菌发酵物的体外抗氧化作用与对降血糖相关酶的影响。结果表明:不同菌种的发酵能力存在差异,植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌发酵显著增加了刺五加叶总黄酮的含量(P<0.05),较对照组增加2.02倍与1.45倍。3种乳酸菌发酵都显著增加了刺五加叶多糖、皂苷和异嗪皮啶的含量(P<0.05),其中多糖含量干酪乳杆菌发酵组最高,可达12.7 mg/g;皂苷含量植物乳杆菌发酵组最高,是对照组的1.9倍;异嗪皮啶含量干酪乳杆菌发酵组最高,是对照组的3.2倍。体外功能性评价实验显示,3种乳酸菌发酵都提高了刺五加叶1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除能力、羟基自由基清除能力、超氧阴离子自由基清除能力和α-淀粉酶与α-葡萄糖苷酶抑制能力,且随发酵产物的浓度增加而增强。综合上述,乳酸菌发酵刺五加叶可以富集活性成分,增强抗氧化作用与降血相关酶的抑制能力,可作为刺五加叶功能食品加工重要手段。

刺五加叶药物成分脑内代谢动力学及治疗脑缺血作用的在线微透析-质谱分析

考察了刺五加叶中金丝桃苷和1,5-二咖啡酰奎宁酸入脑及脑内代谢动力学过程,同时评价刺五加叶对脑缺血大鼠脑内神经递质的影响。结扎大鼠双侧颈总动脉构建急性不完全性脑缺血模型,利用在线微透析-液相色谱-串联质谱法,ACE 5 C18-AR液相色谱柱等度洗脱,MRM负离子模式下监测金丝桃苷和1,5-二咖啡酰奎宁酸在健康及缺血大鼠脑内代谢动力学差异,正离子模式检测不同组别大鼠脑内谷氨酸(Glu)、天冬氨酸(Asp)、γ-氨基丁酸(GABA)、乙酰胆碱(Ach)、5-羟色胺(5-HT)、多巴胺(DA)6种神经递质含量。实验结果表明,在线方法线性良好(R2>0.99),准确度、精密度满足分析要求;金丝桃苷和1,5-二咖啡酰奎宁酸均能透过血脑屏障到达脑部,代谢迅速,在缺血大鼠脑内吸收降低,消除加快;相比模型大鼠,预防性刺五加叶给药7天后,缺血大鼠脑内氨基酸类神经递质Glu、Asp、GABA和单胺类神经递质DA的水平显著降低(p<0.01),Ach水平显著升高(p<0.05)。

刺五加叶的HPLC-UV和ESI-MS指纹图谱研究

对12批不同来源的刺五加叶提取物进行指纹图谱研究,并利用ESI-MS指纹图谱鉴别刺五加叶与山楂叶。分别采用高效液相色谱(HPLC-UV)和电喷雾电离质谱(ESI-MS)测定12批不同来源的刺五加叶提取物,利用ESI-MS技术测定刺五加叶与山楂叶提取物,得到了分离度、精密度和重现性均较好的刺五加叶HPLC-UV及ESI-MS指纹图谱;同时,利用刺五加叶与山楂叶ESI-MS指纹图谱的差异,成功鉴别了二者,可为刺五加叶药材的质量控制提供参考。

毛细管电泳法同时检测刺五加叶中的芦丁和金丝桃苷含量

目的建立简单、快速且能同时分离测定刺五加叶中芦丁、金丝桃苷含量的毛细管电泳法。方法采用毛细管电泳法,缓冲体系为0.2mol.L-1NaH2PO4,0.1mol.L-1Borax及双蒸水(10:7:3,pH8.8),熔融石英毛细管柱(25μm×45cm),分离电压为20kV,检测波长为254nm,进样时间为30s,进样高度10cm。结果芦丁、金丝桃苷在125～750,200～1200mg.L-1与峰面积线性关系良好,线性方程分别为:Y=144145ρ+423.8(r=0.9999)及Y=216836ρ-191.57(r=0.9999),样品平均回收率为99.38%及100.39%。结论该方法简单、快速、准确、重现性好,不同生长时期、不同产地的刺五加叶中两成分均存在一定的差异。

HPLC法测定不同产地刺五加叶中绿原酸和金丝桃苷含量

目的建立刺五加叶中绿原酸及金丝桃苷的含量测定方法,测定不同产地刺五加叶中绿原酸和金丝桃苷的含量。方法采用Hedera?ODS-2 C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),乙腈-0.4%磷酸(17∶83)为流动相,检测波长为360 nm。结果绿原酸和金丝桃苷质量浓度分别在10.2～306μg/mL(r=0.999 5)和10.4～312μg/mL(r=0.999 8)之间,与峰面积均呈良好的线性关系;平均回收率分别为97.14%和98.21%,RSD分别为2.65%和1.89%。不同产地样品中所含的量相差较大。结论本法操作简便、准确、具有良好的重复性,为刺五加叶的进一步开发应用及质量控制奠定了基础。

刺五加叶化学成分及药理作用研究

目的将刺五加叶的国内外研究进展概况进行整理总结,为刺五加叶的开发利用提供参考。方法查阅近30年相关文献,对刺五加叶所含化学成分、药理作用以及现代临床应用等内容进行归纳整理。结果刺五加叶中主要含有皂苷类、黄酮类以及有机酸类等化合物,有调控心脑血管系统,抑制癌细胞增殖,降低尿糖、血糖,抗炎、抗菌、抗应激、增强免疫力、抗疲劳等药理作用。结论刺五加叶具有保护心脑血管系统、抗肿瘤、降血糖等药理作用。刺五加注射液、刺五加片(胶囊)广泛应用于临床医疗,保健食品五加参茶能够明显改善神经衰弱、失眠等症。

刺五加叶化学成分、药理作用及现代临床应用研究进展

目的将刺五加叶的国内外研究进展概况进行整理总结,为刺五加叶的开发利用提供参考。方法查阅近三十年相关文献,对刺五加叶所含化学成分、药理作用以及现代临床应用等内容进行归纳整理。结果刺五加叶中主要含有皂苷类、黄酮类以及有机酸类等化合物,具有保护心脑血管系统、抗肿瘤、降血糖等药理作用。刺五加注射液、刺五加片(胶囊)广泛应用于临床医疗,保健食品五加参茶能够明显改善神经衰弱、失眠等症。结论刺五加叶具有重要的临床和保健价值,其有效成分及药理作用均有待深入研究。

刺五加叶研究新进展

刺五加(Acanthopanax senticosus)为五加科植物。对刺五加叶中皂苷类、黄酮类、多糖类和有机酸类等有效活性成分在保护心脑血管、抗肿瘤、降血压、抗疲劳等药理活性及在食品、药品领域开发利用等方面研究作综合概述。

不同采收期刺五加叶中多糖含量测定

目的为了对刺五加的质量进行综合评价。方法采用蒽酮-硫酸比色法,以葡萄糖作为对照品,在620nm波长下测定吸光度,分别测定刺五加叶中可溶性多糖和粗多糖的含量。结果在0.083mg^0.338mg范围内,葡萄糖mg数与吸光度A值线性关系良好,平均回收率为100.32%,RSD=0.223%,R2=0.9990。刺五加叶的部位可溶性多糖含量为1.770%,粗多糖含量为1.290%。结论不同采收期刺五加叶中多糖含量差别很大,9月份采收的苇沙河地区的刺五加叶总多糖含量较高。从方法学考察可看出,本方法简便、快速、可靠、易行、重现性好,适合刺五加多糖的含量测定。

不同采收期刺五加叶中多糖含量测定

目的:为了对刺五加的质量进行综合评价。方法:采用蒽酮-硫酸比色法,以葡萄糖作为对照品,在620nm波长下测定吸光度,分别测定刺五加叶中可溶性多糖和粗多糖的含量。结果:在0.083mg～0.338mg范围内,葡萄糖mg数与吸光度A值线性关系良好,平均回收率为100.32%,RSD=0.223%,R2=0.9990。刺五加叶的部位可溶性多糖含量为1.770%,粗多糖含量为1.290%。结论:不同采收期刺五加叶中多糖含量差别很大,9月份采收的苇沙河地区的刺五加叶总多糖含量较高。从方法学考察可看出,本方法简便、快速、可靠、易行、重现性好,适合刺五加多糖的含量测定。

刺五加嫩叶中黄酮和酚酸的分离与鉴定

目的:研究刺五加嫩叶中的黄酮和酚酸类成分。方法:通过95%乙醇回流提取,采用ODS、硅胶、半制备型HPLC等分离纯化方法,利用UV、MS及NMR等波谱检测技术确定结构。结果:从刺五加嫩叶醇提物中分离纯化得到13个化合物,包括5个黄酮及8个酚酸类,分别鉴定为:芦丁(1)、quercetin-3-O-α-L-rhamnopyranosyl-(1→6)-β-D-galactopyranoside(2)、kaempferol-3-O-β-glucopyranosyl-(1→2)-[α-rhamnopyranosyl(1→6)]-β-glucopyranoside(3)、kaempferol-3-O-xylopyranosyl-(1→2)-rhamnopyranosyl-(1→6)-glucopyranoside(4)、山柰酚-3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)-[α-L-吡喃鼠李糖-(1→6)]-β-D-吡喃葡萄糖苷(5)、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸(6)、3,5-二咖啡酰基奎尼酸甲酯(7)、3,4-二咖啡酰基奎尼酸甲酯(8)、1,5-O-二咖啡酰基奎尼酸(9)、3,4-O-二咖啡酰基奎宁酸(10)、1,3-O-二咖啡酰基奎宁酸(11)、2-新橙皮糖基-2,6-二羟基苯甲酸苯甲酯(12)、绿原酸(13)。结论:其中,化合物2~5、7、8、12为首次从五加属植物分离得到。

HPLC法同时检测刺五加叶中原儿茶酸、绿原酸、刺五加苷E、金丝桃苷及槲皮苷的含量

建立HPLC同时定量刺五加叶中原儿茶酸、绿原酸、刺五加苷E、金丝桃苷及槲皮苷五种主要成分的方法。方法:色谱柱:Agilent Extend C18(4.6mm×25mm,5μm),柱温:30℃;流速1 mL/min;进样量:10μL;流动相A:0.3%磷酸-水溶液,流动相B:0.3%磷酸-乙腈;梯度洗脱,洗脱条件:0～3 min,95%A;3～10 min,95%～80%A;10～35 min,80%～70%A;35～40 min,70%～10%A;40～50 min,10%A;紫外检测波长:265 nm。结果:金丝桃苷和槲皮苷在20～240μg/mL,原儿茶酸、绿原酸、刺五加苷E分别在5～60μg/mL、167.2～2010μg/mL及6～72μg/mL下与峰面积呈良好的线性关系;平均加样回收率在99.6%～103.1%,RSD为1.5%～2.7%。结论:本方法简便可靠,适用于刺五加叶中的多成分含量测定。