松阳县松针褐斑病发病情况及分布规律

于2022年,选取浙江省松阳县松针褐斑病发病严重的4个马尾松林分,从坡向、坡位和枝条方位3个维度,以病斑数为指标,分析病害的发生、发展进程。结果表明,坡向、坡位和枝条方位对松针褐斑病的影响大小分别为:南坡>北坡>东坡、西坡;上坡>中坡>下坡>全坡;枝条东西向>南向>北向。

松针褐斑病菌毒素LA-Ⅱ的分离纯化及其化学结构

松针褐斑病 (Lecanostictaacicola)是中国南方松树上的一种重要病害。松针褐斑病菌的代谢产物中含有可致松针萎蔫的有毒物质 ,经Rp 1 8柱反复分离松针褐斑病菌的次生代谢产物 ,获得有活性的黄色固体物质 ,采用丙酮结晶和重结晶纯化得到一无色针状晶体 ,生测有活性 ,记为LA Ⅱ。高效液相检测表明 :LA Ⅱ为一纯物质。采用质谱、红外光谱、核磁共振等波谱手段分析可知 :LA Ⅱ分子量为 1 1 8,其化学组成为C4H6O2 S ,分子结构为CH3COSCOCH3。

松针褐斑病菌毒素LA-I的分离纯化及其化学结构

采用柱层析和高效液相色谱分离相结合 ,从松针褐斑病菌的PD培养液中分离提纯到一种致毒活性物质LA -I,该物质为无色油状物。紫外扫描显示LA -I的最大吸收波长为 2 0 7nm。在 36 5nm和 2 5 4nm波长下LA -I无吸收。FAB- MS和HRFAB- MS分别显示该毒素物质的相对分子质量和分子式为 16 2和C6 H1 0 O5;氢谱中的 2个信号 (δ1 2 6 ,δ4 2 2 )表明该毒素物质存在—OCH(CH3)—基团。碳谱显示有 3个碳信号 (δ181 0 9,δ6 6 99,δ2 1 6 9) ,证明存在—COOH ,—CH ,—CH3基团。综合质谱、核磁共振谱分析确定LA -I为COOHCH(CH3)OCH(CH3)COOH(α ,α′ -二丙酸醚 ) 。

松针褐斑病菌致病机制的研究

用小麦粒固体培养基和马铃薯液体培养基培养松针褐斑病菌，其培养物粗提液可以使湿地松、马尾松和黑松针叶褪绿，使蕃茄苗、烟草苗萎蔫。说明松针褐斑病菌在生长过程中能产生并分泌出对植物组织有毒害作用的物质。这种有毒物质（毒素）可能是松针褐斑病菌致病的重要因素。研究表明该毒素物质具有非寄主专化特性。应用乙醇脱水沉淀法将其分为非蛋白质部分和蛋白质部分，仅非蛋白质部分能使松针褪绿，使蕃茄苗、烟草苗萎蔫，可见毒素物质是非蛋白质。将非蛋白质部分进一步层析分离，应用３种溶剂系统，每系统下都可分出３～４个组分，且都有一个组分能使湿地松针叶褪绿。在几种松针中对毒素最敏感的是湿地松的针叶，其次是马尾松的针叶，再次为黑松的针叶。

湿地松抗褐斑病无性系种子园营建技术研究

松针褐斑病(Lecanosticta acicola)是湿地松(Pinus elliottii)、火炬松(P.taeda)和黑松(P.tunbergii)的重要病害,防治比较困难。从1982年开始采用对比法在重病林分中选择湿地松抗病优树122株,嫁接繁殖建立抗病湿地松采穗圃2.7ha,并用自然感染法和人工接种法对繁殖成的122个优树无性系进行抗病性测定和筛选,其中约有1/2的无性系表现具极高的抗病性。利用筛选出的抗病无性系建成湿地松无性系抗病种子园4ha。

国外松松针褐斑病流行的区域性分析

通过对福建、广东、广西和江西省(区)14个林场湿地松和火炬松松针褐斑病(Lecanosticta acicola)危害程度及发病特点调查,把松针褐斑病的区域归纳为3种类型:主要流行区、偶然流行区和无害区。根据各林场林分感病程度和所在县近十年气候因子建立直线回归方程,并根据回归方程对中国南方主要地区褐斑病流行程度进行了预测。

松针褐斑病菌毒素对紫茎泽兰抗病相关酶的影响

采用紫茎泽兰Eupatoriumadenophorum叶片为材料,研究了松针褐斑病菌粗毒素处理后植物叶片6种抗病相关酶活性的变化。结果表明:浓度为1mg/mL粗毒素处理紫茎泽兰离体叶片后,紫茎泽兰抗病相关酶活性总体呈下降趋势。处理12h后,紫茎泽兰过氧化氢酶、抗坏血酸过氧化物酶、超氧化物歧化酶、过氧化物酶、苯丙氨酸解氨酶、多酚氧化酶分别比对照降低了80%,100%,53.8%,62%,61%,70%。

松针褐斑病菌毒素LA-Ⅰ和LA-Ⅱ致毒活性研究

研究比较了松针褐斑病菌 (Lecanostictaacicola)两个致病毒素LA Ⅰ和LA Ⅱ的热稳定性、寄主专化性和最低有效浓度以及它们间的相互关系。LA Ⅰ和LA Ⅱ均具热稳定性 ,经沸水水浴加热 15min仍具活性。LA Ⅰ和LA Ⅱ不仅能伤害易感寄主植物湿地松、火炬松 ,对云南松、华山松、紫茎泽兰等也有伤害作用 ,说明LA Ⅰ和LA Ⅱ均为非寄主专化性毒素。LA Ⅰ和LA Ⅱ配成不同浓度溶液生测 ,显示LA Ⅰ对湿地松幼苗的最低有效浓度为 10 0 μg·mL- 1 ,LA Ⅱ的最低有效浓度为 5 0 0 μg·mL- 1 ,LA Ⅰ活性较LA Ⅱ的活性高 4～ 5倍。LA Ⅰ和LA Ⅱ混合液生测表明 。

松针褐斑病菌毒素的层析分离及紫外吸收特性研究

以生测为导向,采用柱层析和薄层层析相结合,从松针褐斑病菌发酵液中分离出3个致毒活性组分m,p和q。经薄层层析检验可知m,q在A,C两个展开系统中Rf值一致,分别为0.57和0.75,且m,q展开后在254nm和365nm紫外光下都呈蓝色荧光,基本认为m和q是同一组分;p在365nm紫外光下为黄白色荧光,在A、C两个展开系统中Rf值分别为0.46和0.66。层析分离的结果表明,松针褐斑病菌可能含两个或两个以上的毒素物质。对m和p两组分进行紫外扫描的结果显示,m,p分别在波长210nm和208nm处有最大吸收峰,在365nm和254nm紫外光下无吸收或吸收很弱。高效液相分析显示:m,p都不是纯物质,在210nm检测波长下,m有3个吸收峰,保留时间分别为2.41,3.80和16.68min,p有4个吸收峰,保留时间分别为2.46,3.75,12.00和17.25min。研究结果表明组分m和p可能含有相同或相似的化学物质,要获得纯物质还需进一步分离。

松针褐斑病菌毒素活性的生物检测

松针褐斑病菌毒素不仅能伤害湿地松、火炬松等寄主植物的幼苗、针叶、根及愈伤组织 ,对非寄主植物水花生、紫茎泽兰的叶片也有伤害作用。在试验的几种生测材料中 ,湿地松愈伤组织对毒素伤害最敏感 ,湿地松幼苗、幼针叶 ,火炬松幼针叶和紫茎泽兰叶片次之 ,湿地松幼根、老针叶 ,火炬松老针叶 ,水花生和小麦叶片最不敏感。根据生测材料的敏感程度及表现症状的特异性分析可知 ,用湿地松、火炬松幼苗和幼针叶作生测材料较好。比较针刺法、浸渍法和涂抹法等几种生测方法表明 ,用针刺法接种毒素效果最好 ,其反应速度快 ,用量少 ,症状明显。因此建议在松针褐斑病菌毒素的生物检测中 ,以湿地松或火炬松幼苗或幼针叶作为材料 。

松针褐斑病菌毒素的专化性研究

用松针褐斑病菌毒素粗提液处理湿地松、火炬松、黑松和马尾松的切根苗，发现湿地松和火炬松对毒素最为敏感，其次为马尾松，黑松最不敏感。毒素生测的结果与松树在田间自然感染的情况有一定的相似性，但不完全一致。不同湿地松抗病无性系对毒素的反应存在着差别，其中３３ 号所受伤害较轻，１０ 号及３６ 号较重。结合毒素薄层层析半定量试验，利用寄主愈伤组织对毒素的反应，发现毒素对寄主愈伤组织的最低作用浓度应在１００ μｇ／ｍ Ｌ 以下。试验了５ 种杂草对毒素的反应，其中空心莲子草和稞草对毒素敏感。进一步研究利用毒素作为除草剂不失为毒素利用的一个新思路。上述研究表明该毒素为非寄主专化性毒素。

江西奉新湿地松幼林松针褐斑病动态

1986～1989年在江西省奉新县湿地松人工幼林中的观察表明,松针褐斑病于每年6月中旬至7月中旬发展较快,9月中旬至10月下旬病情也有一定增长。植苗造林后3～4年内病株率和感病指数逐步上升,第5年后病株逐渐恢复健康。在幼林中病害自发病中心迅速扩散,但不造成明显损失。

湿地松子代组培苗对松针褐斑病的抗性测定

为了将具有抗病基因的优良个体和家系扩大应用于林业生产,用松针褐斑病毒素处理和接种孢子悬浮液的方法对瓶内湿地松子代组培苗和温室2年生组培苗进行了抗病性测定。结果显示:不同家系抗病性差异显著,同一家系不同无性系间抗病性差异也显著。瓶内与温室组培苗的抗病性测定结果相比较,它们的抗病程度基本一致,具有一定的相关性,相关系数为0.789。

我国湿地松抗松针褐斑病研究进展

湿地松松针褐斑病是我国南方松树上的重要病害。本文综合概述了我国自８０年代初开始的湿地松抗松针褐斑病的研究，重点介绍了湿地松松针褐斑病的抗病选择和抗病机制的研究进展，并对这些研究作了分析评述。１２２株抗病单株已被收集，４ｈｍ２抗病湿地松种子园已在福建省建立，松针褐斑病的抗病机制也作了初步分析。

中国不同地区不同寄主的松针褐斑病菌菌株比较

从福建、广东、广西、江西和安徽湿地松上,江西、浙江、安徽和河南黑松上和广西桐棉松上分离了10个菌株。对它们的形态、培养特性、酯酶同工酶电泳和致病性方面进行了比较。发现从广西相棉松上分离的菌株,在各方面均和其余9个菌株存在着明显不同,而其余9个菌株之间在某些性状上虽表现出一定差异,但基本上还是相似的。初步认为,从广西桐棉松上分离的松针褐斑病菌是一个独立的类型;而其余9个菌株同属于另一个类型。

松针褐斑病及病原致病毒素研究

从松针褐斑病病原的生物学特性、侵染和传播机制、病害的流行、治理等方面总结了该病的研究历史和现状 ;从病原菌产生致病毒素的确定及致病毒素的基本性质 。

湿地松褐斑病防治试验

松针褐斑病的病原菌为Lecunosticta acicola,在病叶上或落叶上的病菌子实体和病组织中的菌丝体是初侵染源,病原菌通过雨水的溅散和风力而传播。通过室内药效测定和野外药剂防治湿地松褐斑病的试验,结果药效依次是多菌灵、抗菌素402、退菌特、抗菌素401、波尔多液。

松针褐斑病菌和4个球腔菌属真菌毒素杀草活性比较

以紫茎泽兰和湿地松幼苗为材料，研究球腔菌属4个菌种毒素粗提物活性，并与松针褐斑病菌对比。结果显示：褐孢霉菌和草莓蛇眼小球壳菌对湿地松幼苗和紫茎泽兰均具有伤害作用，且为非寄主专化性毒素。在MS液体培养基中，松针褐斑病菌产毒高峰为10～20d，20d达到最大；褐孢霉菌和草莓蛇眼小球壳菌产毒高峰为5～10d，10d左右达到最大。不同浓度毒素粗提液对紫茎泽兰伤害活性测定结果显示，松针褐斑病菌和褐孢霉菌毒素粗提物活性比草莓蛇眼小球壳菌毒素粗提物活性更强；梨球腔菌和柿子球腔菌在MS液体培养基中不能产生明显伤害生测材料的毒素物质。

湿地松抗褐斑病育种技术研究

１９８２年开始采用对比法２次在湿地松重病林分中选择抗病优树，共８５株，在沙县官在林场建立湿地松抗病采穗圃１．７３ｈｍ￣２，并采用自然感染法对优树无性系进行抗病测定和筛选，选出具有较高抗病性的无性系３９个，建立湿地松抗病种子园４ｈｍ￣２。

松针水抽提物及其酸度与抗褐斑病的关系

本研究表明，松针褐斑病菌（Ｌｅｃａｎｏｓｔｉｃｔａａｃｉｃｏｌａ）在抗性不同的松针水抽提液中的生长情况明显不同。病菌分生孢子在抗病的湿地松（Ｐｉｎｕｓｅｌｌｉｏｔｉｉ）、马尾松（Ｐ．ｍａｓｓｏｎｉａｎａ）以及易感的湿地松和黑松（Ｐ．ｔｈｕｎｂｅｒｇｉｉ）的松针水抽滤液中的萌发率分别为３８．７％、４６．１％、５１．９％和５５．２％。菌丝在抗病的松针抽滤液中生长也远不及在易感松针的抽滤液中好。抗病和易感湿地松针叶的ｐＨ值和缓冲容量几乎完全相同，马尾松和黑松的松针抽滤液的ｐＨ比湿地松略高些，但缓冲容量比抗病和易感湿地松都小，显然，湿地松对松针褐斑病的抗性与松针中的某些水抽提物质存在一定联系，但与其ｐＨ值和缓冲容量无关。