反相HPLC法测定比格犬血浆中乐福昔布的含量

目的:建立比格犬血浆中创新药物乐福昔布的测定方法。方法:以塞来昔布为内标。采用Agilent 1100 HPLC仪,以Kromasil C_(18)(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱为分析柱,5mmol·L^(-1)醋酸铵缓冲液(用36%醋酸调pH至5)-乙腈(34.8:65.2)为流动相,流速为1.0mL·min^(-1),柱温为25℃,检测器波长为254nm,进样量为50μL。结果:在5～500ng·mL^(-1)浓度范围内,测定方法具有良好的线性关系,线性方程为:Y=0.00729X-0.00141,r=0.9984。准确度、精密度均符合生物样品的测定要求,最低定量浓度为5ng·mL^(-1)。结论:该检测方法简便、准确、专属性强,能够满足乐福昔布在比格犬体内药代动力学研究的需要。

饮食对单次口服乐福昔布后生物利用度的影响

目的研究Beagle犬禁食和非禁食情况下单次口服乐福昔布(25.5mg.kg-1)片剂后药动学参数变化规律以及绝对生物利用度。方法以塞来昔布为内标,经方法学验证后的HPLC-荧光分析方法,测定给药后Beagle犬各时间点血浆中乐福昔布的浓度。结果Beagle犬在禁食和非禁食情况下乐福昔布片剂在Beagle犬体内的绝对生物利用度分别为3.8%和29.7%。结论饮食对乐福昔布在体内的吸收有显著影响。

乐福昔布片、胶囊微生物限度检查研究

目的:研究建立乐福昔布片剂、胶囊剂(一类新药)微生物限度检查的方法,考察其有无抑菌活性及测定方法的可行性。方法:参照中国药典2005年版微生物限度检测方法及其验证方法指导原则的基本原理和检测方法。本品为具有抑菌活性的固体供试品,采用离心沉淀集菌法,计数方法为平皿法。结果:含供试品各容器中的试验菌均生长良好,3次独立的平行试验回收率均大于70%。结论:本方法可用于乐福昔布片剂、胶囊剂的微生物限度检查。

小鼠、大鼠和比格犬乐福昔布的急性毒性研究

目的了解单次给药后动物所产生的毒性反应,计算LD50剂量或最大给药剂量,为安全用药提供参考。方法NIH小鼠空腹灌乐福昔布1次,剂量为5.0g/kg,连续观察1周;大鼠剂量为2g/kg。比格犬单次灌胃乐福昔布近似致死剂量试验。结果NIH小鼠服用受试药后1周内体重变化与对照组比较无统计学差异,最大耐受剂量(MTD)>5.0g/kg。大鼠给药组进食量及体重与对照组比较无明显差异。比格犬食欲、活动、体温正常,心率和心电图与给药前比较无统计学差异,给药后7d处死动物,心、肝、肾、肺、脾及消化道未见淤血、出血及感染灶等病变。结论乐福昔布属低毒药,测不出比格犬近似致死剂量,最高非致死剂量大于5.0g/kg。

液相色谱-串联质谱法快速测定人血浆中乐福昔布的含量

建立测定人血浆中乐福昔布含量的LC-MS/MS方法。取正常人血浆250μL,然后加入200ng/mL内标塞来昔布50μL,加入1mL无水乙醚涡旋震荡提取2min,离心10分钟(12000转/分)后,取上清液,下层再加入乙醚,同法再萃取一次,合并2次萃取液,吹干溶剂后,用30%的乙腈250μL溶解,取10μL进行LC-MS/MS测定。LC条件:采用ASB C18柱(2.1×50mm,5μm),流动相:乙腈-0.1%甲酸梯度洗脱,流速:0.4mL/min。质谱条件:ESI电离源,正离子模式,多反应监测(MRM)方式,用于定量分析的离子对分别为m/z 395.1→m/z 296.1(乐福昔布)和m/z 382.2→m/z 281.0(内标,塞来昔布)。该方法乐福昔布的线性范围为0.4～800 ng/mL,最低检测限为0.2ng/mL。本方法操作简便、快速、结果准确、可用于该药物的含量测定,同时也可为临床药代动力学研究提供参考。