四川汶川的杜氏利什曼原虫人及犬分离株培养观察

本文报道了从四川汶川地区分离的两株杜氏利什曼原虫(人分离株和犬分离株)前鞭毛体在培养中的生物学特征。犬株的生长迟缓期较长,为6～7天,人株仅2天。人株和犬株前鞭毛体达到增殖高峰的时间分别在培养6天和10天。人株梭状前鞭毛体大小(长×宽)为6.68～10.02×1.17～1.84μm(平均8.77×1.59μm),成熟前鞭毛体为11.69～18.37×1.17～1.67μm(平均14.41×1.59μm)。犬株梭状前鞭毛体为8.35～11.69×1.67～2.00μm(平均10.25×1.93μm),成熟前鞭毛体为13.36～21.71×1.50～2.17μm(平均15.97×1.85μm)。两株原虫前鞭毛体的大小差异有显著的统计学意义,两者的生长曲线亦有差别。

不同利什曼原虫分离株在培养基中生长繁殖观察

目的比较我国不同类型内脏利什曼病流行区利什曼原虫前鞭毛体在不同培养基中的生长繁殖情况,为选择合适培养基用于利什曼原虫培养提供实验依据。方法将3×105个KS-2、Cy、JIASHI-5株利什曼原虫前鞭毛体分别接种至1 m L NNN培养基、1 m L M199+20%胎牛血清培养基、1 m L M199+20%马血清培养基及1 m L脑心浸液培养基(含血红素)中,22℃温箱中无菌静置培养,显微镜下连续观察计数8 d,绘制3株利什曼原虫前鞭毛体的生长曲线。结果 KS-2、Cy、JIASHI-5株利什曼原虫前鞭毛体均能在NNN培养基、M199+20%胎牛血清培养基和M199+20%马血清培养基中生长繁殖,在NNN培养基中培养不同时间后的3株利什曼原虫前鞭毛体计数均显著高于M199+20%胎牛血清培养基和M199+20%马血清培养基(P均<0.05),在这3种培养基中培养不同时间后的KS-2株利什曼原虫前鞭毛体计数均显著高于Cy和JIASHI-5株(P均<0.05)。KS-2、Cy、JIASHI-5株利什曼原虫前鞭毛体均不能在脑心浸液培养基中生长繁殖。结论分离自我国不同类型内脏利什曼病流行区的利什曼原虫在同一培养基中生长增殖速度有差异,同一利什曼原虫分离株在不同培养基中的生长繁殖速度亦有差异。NNN培养基是最适合我国内脏利什曼病流行区利什曼原虫分离株的培养基。