雷州山羊体尺与体重指标的主成分分析

目的:选育工作中以主成分为单位首先进行集团选择,再根据对主成分贡献率较大的单一性状进行筛选,以提高选育效率。根据雷州山羊体重和体尺性状之间的相关性进行主成分分析,可以为雷州山羊的选种提供重要参考依据。方法:该试验选取体重相近且健康状况良好的雷州山羊公羔60只,采用放牧+补饲方式饲养至60日龄断奶,并进行体重、体高、体斜长等11个体尺指的测定及主成分分析。结果:雷州山羊公羔的腰角宽变异系数最大,有较大的选择潜力;体重与管围的相关系数为0.484,达到显著正相关的水平(P<0.05)。体重与体尺性状可区分为相对独立的4个主成分:躯体因子、匀称因子、特征类因子以及宽度因子。第一主成分的贡献率为31.727%,其中胸深、额宽、体斜长以及肢高的特征向量系数较大,分别为0.432、0.413、0.384以及0.361。结论:胸深、额宽、体斜长以及肢高是雷州山羊公羔的主要性状指标。

影响山羊胎儿肌肉发育mRNA和lncRNA的鉴定与分析

旨在分析雷州山羊胎儿70、90及120天背最长肌转录组测序中的差异表达mRNAs和lncRNAs及其靶基因,对差异表达基因进行功能富集分析,挖掘影响雷州山羊胎儿骨骼肌发育的关键候选基因。本研究选用年龄约2.5~3.5岁,饲养状况相同,健康无病,体重接近的雷州母山羊,分为妊娠期70、90和120天3组,每组各3只共9只,提取其胎儿背最长肌的RNA构建文库后使用Illumina HiSeqTM2500进行转录组测序,以Q<0.05为阈值筛选出差异mRNAs和lncRNAs并进行生物学功能富集分析及构建靶向关系网络。最后通过荧光定量PCR鉴定差异基因表达水平,验证测序结果的可靠性。结果发现,在M70 vs.M90组中,总共发现185个差异表达mRNAs,其中170个上调,15个下调,62个差异表达lncRNAs,40个上调,22个下调;在M120 vs.M90组中,共发现1048个差异表达mRNAs,666个上调,382个下调,352个差异表达lncRNAs,175个上调,177个下调。其中TNNT3、TNNI1、TNNT1、TNNI2、ITGA4、ITGA11、ITGB4等基因参与肌肉发育相关的调控通路如肌钙蛋白复合物、肌丝、粘附斑、ECM-受体相互作用、PI3K-Akt信号通路等。根据lncRNA与mRNA的位置关系进行cis靶基因预测,总共筛选到37464个靶基因,有10个差异表达mRNAs被差异表达lncRNA靶向,其中NDUFB2、BRAF、METTL7B和ITGA7参与粘着斑以及肌动蛋白细胞骨架的调控,METTL7B和ITGA7还参与PI3K-Akt信号通路,lncRNA TCONS_00214300靶向METTL7B和ITGA7。同时,8个差异表达mRNAs和lncRNAs的RT-PCR结果显示,8个基因的表达水平与转录组测序的表达趋势相似,说明测序结果可靠。结果显示,发现了影响雷州山羊胎儿肌肉发育的mRNA与lncRNA,发现了一些差异表达lncRNA和mRNA可能存在调控关系,对了解雷州山羊胎儿肌肉发育的分子调控机制提供了新的参考,也为雷州山羊分子选育提供了理论借鉴。

山羊α-干扰素基因克隆、原核表达及其抗病毒活性研究

为研究雷州山羊α-干扰素基因的遗传变异及重组α-干扰素的抗病毒活性,采用RT-PCR扩增雷州山羊α-干扰素基因,分析其核苷酸序列;采用PCR方法扩增山羊α-干扰素基因成熟肽编码序列,构建原核表达载体pET-mIFN-α,并在大肠杆菌BL21(DE3)诱导表达;采用SDS-PAGE和Western-blot检测重组蛋白rG-mIFN-α;通过细胞病变抑制法测定其抗小反刍兽疫病毒(PPRV)和山羊痘病毒(GPV)活性。结果表明,雷州山羊α-干扰素全基因由570个核苷酸组成,编码189个氨基酸;与GenBank上发表的山羊、林麝、弯角大羚羊、黄牛、瘤牛、绵羊、猪、人和鼠的核苷酸序列同源性分别为99.8%、95.6%、96.8%、94.7%、94.7%、96.8%、81.6%、77.8%和70.0%;氨基酸序列同源性分别为100%、92.6%、94.7%、92.1%、93.2%、93.7%、67.9%、61.6%和55.3%,提示反刍动物α-干扰素基因的核苷酸和氨基酸序列高度保守;rG-IFNα主要以包涵体形式存在,分子质量约32 ku;重组山羊α-干扰素能显著抑制PPRV和GPV感染引起的细胞病变,其抗PPRV和GPV效价分别为1.6×10^(4)U/mg和1.35×10^(4)U/mg。

不同精粗比饲粮对雷州山羊生长性能、血液生化指标和瘤胃微生物多样性的影响

【目的】研究不同精粗比对雷州山羊舍饲效果的影响。【方法】选择6月龄公母各半的雷州山羊24只,随机分为4个处理组,每个处理6只(公母各半)。其中D_0组为对照组,饲喂皇竹草,D_(10)、D_(20)、D_(30)分别饲喂混合精料与皇竹草按干物质质量比10∶90、20∶80:和30∶70的混合饲粮,进行分组饲喂,每周测定各组羊只体质量、血液生理指标和瘤胃微生物多样性。【结果】D_(10)、D_(20)、D_(30)的平均日增重分别为33.28、82.58、81.80 g/d,分别较D_0组高出111.97%、425.99%、421.02%(P<0.05)。试验组的白细胞总数(WBC)总数均显著小于对照组(P<0.05);试验组的红细胞总数(RBC)总数、血红蛋白(Hb)、红细胞总数(RBC)压积均高于对照组,且D_(20)组的均与对照组呈显著性差异(P<0.05)。试验所用3种皇竹草和精料比例的混合饲粮对舍饲雷州山羊瘤胃细菌的多样性均无显著影响(P>0.05)。【结论】精粗比20∶80日粮,可降低雷州山羊血液WBC总数,显著提高雷州山羊平均日增重(ADG)、RBC总数、Hb和RBC压积。

不同精粗比日粮对雷州山羊体外瘤胃发酵的影响

本试验通过体外发酵法,探讨皇竹草和精料以不同比例配制成的全混合日粮(TMR)对雷州山羊体外瘤胃发酵的影响。试验采用精料与皇竹草按干物质0∶100(Ⅰ组)、10∶90(Ⅱ组)、20∶80(Ⅲ组)、30∶70(Ⅳ组)和40∶60(V组)比例配制日粮,在体外发酵的第4、8、12、24和48h取样分析其发酵参数的变化,为皇竹草在雷州山羊TMR中的应用提供参考。结果显示,(1)随着精粗比的提高,粗蛋白质含量逐渐增高,纤维物质、粗灰分含量逐渐降低,且4、8、24、48h累积产气量呈现极显著增长(P<0.01)。(2)随着发酵时间和精料添加比例的增加,瘤胃pH呈下降趋势,同一时间点,Ⅳ、Ⅴ组pH均显著低于Ⅰ、Ⅱ组(P<0.05);干物质降解率呈上升趋势,同一时间点,Ⅳ、Ⅴ组的降解率均极显著高于Ⅰ、Ⅱ组(P<0.01);48h的氨态氮浓度均高于4h,4、24h时各组间均无显著差异(P>0.05)。(3)pH与累积产气量和干物质降解率呈显著或极显著的负相关,累积产气量与干物质降解率呈显著或极显著的正相关(P<0.05;P<0.01);各个发酵时间pH与干物质、粗灰分、粗纤维、中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维呈显著或极显著正相关,与粗蛋白质呈显著或极显著负相关(P<0.05;P<0.01);累积产气量和干物质降解率与TMR日粮粗蛋白质含量呈显著或极显著正相关,与干物质、粗灰分、粗纤维、中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维呈显著或极显著负相关(P<0.05;P<0.01)。综上,在本试验条件下,精料和皇竹草的比例为30∶70时,可获得较好的发酵效果,且可节约成本。

雷州山羊体尺性状的主因子分析

应用主因子分析的方法对 96头雷州山羊成年母羊的 8个主要体尺性状进行统计分析。结果表明 ,雷州山羊成年母羊的体尺性状可区分为相对独立的 3个主因子。第一主因子的贡献率为 6 0 .0 0 % ,是雷州山羊成年母羊体尺性状变异的主要来源 ,因此 ,在雷州山羊的选育工作中应以第一主因子为主体进行多个性状的集团选择 ,提高雷州山羊的选育效率。

雷州山羊喜食牧草养分含量及其与相对采食频度相关性分析

为了解南方地区天然草场放牧雷州山羊牧食行为,以及天然牧草养分含量与其相对采食频度的相关性,连续7 d跟踪放牧观察记录雷州山羊牧食行为,并且根据雷州山羊采食情况采集牧草样本。试验结果表明,雷州山羊对于大花牵牛、牛筋草、柳叶箬和白茅的相对采食频度分别为55.51%、28.70%、8.13%和(P<0.05)1.18%;在测定的几种牧草中,白茅的干物质(DM)(P<0.05)、中性洗涤纤维(NDF)(P<0.05)和酸性洗涤纤维(ADF)最高,鬼针草的粗蛋白质(CP)(P<0.05)、钙(Ca)(P<0.05)、磷(P)(P<0.05)、粗灰分(Ash)和粗脂肪(EE)最高,柳叶箬的粗纤维(CF)含量最高;雷州山羊的相对采食频度与牧草CP含量的相关系数为0.793(P<0.05),与CF含量的相关系数为-0.813(P<0.05),与ADF含量的相关系数为-0.328(P>0.05),与NDF含量的相关系数为-0.945(P<0.01),与Ca含量的相关性系数为0.804(P<0.05),与P含量的相关系数为0.735(P<0.05)。综上可得,雷州山羊的相对采食频度与天然草场牧草中的CP、Ca和P含量具有显著的正相关关系;与CF、NDF含量具有显著或极显著的负相关关系。

雷州山羊春季牧食行为的观测

对雷州山羊春季牧食行为进行 2 4 h的连续观测表明 ,雷州山羊昼夜采食时间为 41 5 .37± 2 6.81 min,放牧平均采食速度 35 .34± 3.5 2口 /min,游走时间 1 5 .65± 7.32 min;每日饮水 3次 ,每次饮水量 0 .83± 0 .31 kg;昼夜反刍时间 375 .7± 2 1 .73min,反刍与采食时间之比为 0 .91∶ 1 ,昼夜反刍周期数 9.0 1± 0 .38,反刍周期持续时间 42 .1 9± 6.74min,每个食团咀嚼时间 5 0 .2 9± 8.42 s,反刍咀嚼速度 1 .35± 0 .1 5次 /s,夜间反刍时间占昼夜总反刍时间的 75 .66% ;昼夜排粪排尿次数分别为 8.67± 1 .37和 6.88± 1 .0 4 ,且白昼显著多于夜间 ( P<0 .0 5 )。

砂仁茎叶对雷州黑山羊生长性能及血液生化指标的影响

为分析日粮中添加不同比例新鲜砂仁(Amomum villosum)茎叶对雷州黑山羊生长性能和血液生化指标的影响,本研究选择20只雷州黑山羊,随机分为4组(CK、Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),每组5只;对照组饲喂基础饲粮,试验Ⅰ组、试验Ⅱ组、试验Ⅲ组在基础饲粮中分别用5%、10%和20%的新鲜砂仁茎叶等量替代日粮王草,试验期60d。结果表明:试验Ⅰ和试验Ⅱ组雷州黑山羊的平均日采食量(average daily feed intake,ADFI)、平均日增重(average daily gain,ADG)均显著高于CK组和试验Ⅲ组(P<0.05),CK和试验Ⅲ组差异不显著(P>0.05);试验Ⅱ组的料重比(Feedtogain,F/G)显著低于对照组和其他试验组(P<0.05);除了试验Ⅲ组谷丙转移酶(glutamic-pyruvic transaminase,ALT)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)显著高于CK组(P<0.05),其他血液生化指标在各组间差异均不显著(P>0.05)。以上结果说明,新鲜砂仁茎叶作为一种中草药粗饲料在雷州黑山羊日粮中适宜添加比例为10%,这为砂仁茎叶饲料化开发利用提供理论基础。

雷州山羊成年母羊体重及体尺指标的回归分析

本文采用逐步回归的方法对随机抽测的96只雷州山羊成年母羊的体重和8个主要体尺指标进行回归分析,得到雷州山羊成年母羊体重和主要体尺指标的最优回归方程为Y^=37.400+0.140X1+0.346X4+1.215X6P<0.01。明确了雷州山羊成年母羊体重与体尺指标的关系,为今后雷州山羊的选育工作提供参考。

不同年龄雷州山羊若干生理指标

对 30只初生、1周岁和成年雷州山羊部分生理指标的测定结果显示 ,雷州山羊的体温、呼吸、脉搏、红细胞数(RBC)、血红蛋白等均随着年龄的增长而降低 ,至成年时稳定在一定范围 ,公羊略高于母羊 ,但组间差异不显著 (P >0 .0 5 )。白细胞数在初生至 1周岁时逐渐升高 ,至成年时稳定在初生的水平 ,且母羊略高于公羊 ,但差异不显著 (P >0 .0 5 ) ,成年羊的嗜酸性白细胞、嗜碱性白细胞水平显著高于初生和周岁羊 ,也显著高于其他山羊品种 (P <0 .0 5 )。

雷州山羊部分脏器的组织形态观察

对15只雷州山羊肺、肾、卵巢、肝、脾、胰进行了组织学观察,结果如下:①肺的实质由导气部和呼吸部组成,导气部中主要见到的是细支气管和终末细支气管,偶见小支气管,细支气管黏膜上皮形成许多明显的皱襞,固有膜下有完整的平滑肌。肺泡呈多面形囊泡,壁极薄,由肺泡上皮围成;②肾内皮质肾单位和髓旁肾单位在数量上无明显差别,髓放线发达,有一些髓放线深入皮质浅层,在延伸中逐渐变细;③卵巢被膜下有许多原始卵泡,皮质中生长卵泡也很多,偶见成熟卵泡;④肝间质组织少,肝小叶分界不清,切面呈不规则的多边形,肝细胞以中央静脉为中心呈放射状排列;⑤脾脏表面覆有一层较厚的由平滑肌组成的被膜,染成红色,被膜结缔组织伸入脾内形成许多分支的小梁。白髓中脾小结呈圆形或卵圆形,淋巴细胞密集。脾索含有较多的血细胞而红染,相互连接成网;⑥胰的表面由少量结缔组织组成的被膜,胰岛大小不等,胰岛细胞呈梭形或圆形,核染色较淡。

雷州山羊心脏乳头肌及腱索的形态学观察

为了保护和发展雷州山羊优势品种和丰富家畜解剖学的内容,用大体解剖学方法观察了15头雷州山羊心脏乳头肌和腱索的形态学特点。结果:①右心室内8例有3群乳头肌,分别为隔前乳头肌、隔后乳头肌和壁乳头肌,且仅1例的隔前乳头肌形成了较典型的乳头肌;而另7例心脏隔前乳头肌缺如。隔后乳头肌群中有大小2种乳头肌,且以大乳头肌为主,大乳头肌可分为附着型、游离型和中间型3种类型。其中,5例大乳头肌附近有小乳头肌,3例仅由3～5个小乳头肌组成,另外7例是仅由1～2个大乳头肌组成的。壁乳头肌群是由1个或2个大乳头肌组成的,乳头肌皆为游离型。②左心室内有2个乳头肌,即壁前乳头肌及壁后乳头肌,2个乳头肌均很发达,皆为附着型。同时还就乳头肌的形态、腱索的类型及连接方式等进行了描述。结论:雷州山羊长期生活在热带、亚热带气候条件下,其心脏乳头肌及腱索具有一定的地域形态特征。

添加乳酸菌和纤维素酶对菠萝渣青贮发酵品质和体外发酵的评价

本试验旨在探究添加乳酸菌和纤维素酶对菠萝渣青贮发酵品质及体外发酵效果的影响。试验采用单因素试验设计,设置对照组(不使用任何添加剂)、纤维素酶组(添加0.150 g/kg纤维素酶)、乳酸菌组(添加0.025 g/kg乳酸菌)、复合菌酶组(添加0.150 g/kg纤维素酶和0.025 g/kg乳酸菌),每组3个重复。青贮60 d后收集样品并测定相关指标。收取3只成年雷州山羊的瘤胃液,按照体积比1∶9的比例与人工唾液混合用作发酵液。4个试验组体外发酵48 h,在6、12、24和48 h时记录产气量,并测定发酵液的pH及挥发性脂肪酸、氨态氮(NH_(3)-N)浓度等相关指标。结果表明:1)与对照组相比,乳酸菌组和复合菌酶组的粗蛋白质含量分别提高了26.85%和22.72%(P<0.05);亚硝酸盐含量分别降低了22.88%和17.80%(P<0.05);各添加剂组的氨态氮与总氮的比值(NH_(3)-N/TN)均显著降低(P<0.05)。2)整个体外瘤胃发酵期,各组pH和NH_(3)-N浓度均在瘤胃正常变化范围内;体外瘤胃发酵6 h,各添加剂组的瘤胃体外发酵培养液中丁酸浓度均显著低于对照组(P<0.05);体外瘤胃发酵48 h,各添加剂组的粗蛋白质降解率均显著高于对照组(P<0.05),乳酸菌组pH显著降低(P<0.05)。由此可见,在本试验条件下,添加0.025 g/kg的乳酸菌对改善菠萝渣青贮品质的效果相对较好,维持瘤胃正常发酵,有助于饲料养分的消化吸收。

刍议雷州山羊的开发

从雷州山羊的品种资源，饲料资源及饲养技术等三个方面论述雷州山羊开发的优势，分析了目前雷州山羊开发及产业化进程中存在的问题。

雷州山羊不同母性行为对羔羊体重的影响

试验旨在研究山羊不同母性行为对羔羊体重的影响,选用健康、产期相近的雷州山羊6只,其中3只初产、3只经产,经产母羊此次产羔均为第3胎。羔羊出生后,连续1周采用24 h监控系统全事件记录母羊的母性行为时长。产羔后利用布条对羔羊进行编号和区分,在出生和生产第10天对羔羊进行称重。结果表明:初产母羊对羔羊的舔舐和嗅闻与经产母羊相比显著升高,而寻找羔羊、待在一起和哺乳时长显著降低;经产羔羊平均日增重较初产羔羊显著升高,且单羔的平均日增重是双羔的1.8倍;母羊不同哺乳时长、平均中断或拒绝哺乳次数均与羔羊日增重及10日龄重存在显著相关性。综上,母羊胎次及产仔数通过影响母羊与羔羊亲子联系的建立及母性行为的表达间接影响羔羊日增重。

雷州山羊、努比亚羊及其杂交F1代在热应激环境下生理和血液生化指标的对比研究

本试验旨在研究广东地区夏季热应激对雷州山羊、努比亚羊及其杂交F1代生理和血液生化指标的影响,进而评估3个类群羊之间热适应性的差异。试验以各个类群5月龄的阉羊为研究对象,在广东夏季(2019年7月)全天温湿度指数(THI)均值为84.30的热应激环境下,正试期第1和2天在08:00、14:00、20:003个时间点测定羊群的4项生理指标,第3天采集羊群血液进行29项生化指标的测定分析。结果显示,3个类群羊的表皮温度(ST)、直肠温度(RT)、呼吸频率(RR)和心率(HR)随着08:00至14:00 THI的增高而增高,随着14:00至20:00 THI的下降而下降。在08:00和14:00平均THI高于82的热应激条件下,雷州山羊的RT和RR极显著或显著低于努比亚羊(P<0.01;P<0.05)。白细胞分类指标中,雷州山羊的嗜中性粒细胞比例(NEUTr)在3个类群羊中最高,且显著高于努比亚羊(P<0.05)。与此相反,雷州山羊的淋巴细胞比例(LYMPHr)在三者中最低,且显著低于努比亚羊(P<0.05)。血液电解质指标中,雷州山羊的钾离子(K+)在3个类群中最高,且极显著高于努比亚羊(P<0.01)。血清酶类活性指标中,努比亚羊的乳酸脱氢酶(LDH)活性在3个类群中最高,且显著或极显著高于其他2个类群羊(P<0.05;P<0.01)。相比雷州山羊和杂交F1代,努比亚羊的丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性更高,这与LDH的趋势一致,但其仅显著高于杂交F1代(P<0.05)。对比血清酶类活性指标(ALT和LDH),三碘甲状腺原氨酸(T3)的激素水平在3个类群羊之间呈现相反的趋势,努比亚羊的T3最低,且显著低于雷州山羊(P<0.05)。应用3个类群羊组间差异显著性的血液生化指标进行PCA聚类分析时发现,雷州山羊与努比亚羊之间存在明显的群体分离,而杂交F1代介于2个亲本群之间。综合以上结果,试验羊在试验期间全天长时间处于热应激状态;试验羊的生理和血液生化指标受到热应激的影响,且反映出类群之间存在耐热性差异,雷州山羊的耐热性优于努比亚羊,而杂交F1代的耐热性介于2个亲本之间。

绿原酸和咖啡酸对雷州山羊精液冷冻保存效果的影响

为了提高冻-解后精液品质,探讨绿原酸和咖啡酸对雷州山羊精液冷冻保存效果的影响,笔者在冷冻保存稀释液中分别添加100μmol/L的绿原酸(CGA)和咖啡酸(CA),并以无添加组为对照,实施了冷冻保存实验。通过检测冻-解后精子活率、活力、生存率、质膜完整性、顶体完整性等指标评估精液品质,并检测了活性氧(ROS)水平、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、氧化产物丙二醛(MDA)、线粒体膜电位(MMP)等抗氧化指标。结果显示,在冷冻保存稀释液中添加CGA和CA可显著(P<0.05)提高冻-解雷州山羊精液品质(精子活率、活力、生存率等),有效提高SOD、GSH-PX、CAT等酶活性和MMP(P<0.05),降低了精子ROS水平和MDA的含量(P<0.05),从而提高了雷州山羊精液冷冻保存效果。结果表明,在冷冻保存稀释液中添加CGA和CA能显著提高冻-解后雷州山羊精液品质和抗氧化性能,进而提高雷州山羊精液冷冻保存效果。