东北林蛙瘦素受体叠加转录蛋白基因的克隆及组织表达分析

瘦素受体叠加转录蛋白(leptin receptor overlapping transcript, LepROT)在免疫调节中发挥多种作用。为了获得两栖类LepROT在抗感染中的作用及其机制的信息,首先采用RT-PCR技术克隆东北林蛙的LepROT基因并进行生物信息学分析;再分别构建嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila,Ah)与细菌脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)东北林蛙的感染模型,获得组织病理解剖变化特征,并应用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测LepROT基因的变化规律及其对核转录因子NF-κB信号通路的影响。结果表明,LepROT基因长度为396bp,编码131个氨基酸残基,与两栖类同源性在93.74%以上,与哺乳类同源性在86.39%以上,在各个物种中相对保守;感染Ah、LPS后,基因LepROT、NF-κB、IKKα和IKKβ的相对表达量均显著上调(P<0.01),并且不同组织的表达量上调的时间规律不同,推测东北林蛙可能通过LepROT启动NF-κB信号通路发挥抗感染作用,为进一步扩展两栖类LepROT的生物学功能的研究提供了证据。