人Leptin基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

目的克隆Leptin基因,构建其重组表达菌株,并对表达产物进行免疫学鉴定。方法利用RT-PCR方法从脂肪细胞RNA中扩增出人瘦素前体(pre-Leptin)的cDNA片段和去信号肽序列的Leptin成熟基因片段,并插入pET32a中,转化大肠杆菌BL21(DE3),获得表达重组人瘦素(rh-Leptin)的菌株。结果DNA序列分析显示获得的pre-Leptin和成熟基因片段的序列与预计序列一致,菌株诱导后经SDS-PAGE检测,rh-Leptin表达量达菌体总蛋白的40%以上。Western blot分析显示重组Lep-tin具有免疫学活性。结论已获得高效表达Leptin的重组菌株。

瘦素mRNA和瘦素受体mRNA在乳腺癌合并肥胖症患者乳腺癌组织中的表达及其与临床病理的关系

目的检测瘦素 mRNA和瘦素受体 mRNA在乳腺癌合并肥胖症患者乳腺癌组织中的表达情况,并探讨二者之间及其与临床病理之间的关系。方法采用逆转录多聚合酶链反应(RT-PCR)法,检测48例乳腺癌合并肥胖症和36例乳腺良性病变合并肥胖症患者乳腺组织中瘦素 mRNA和瘦素受体 mRNA的表达,分析二者之间及其与临床病理之间的关系。结果瘦素 mRNA、瘦素长型受体[Leptin receptor long form,Lep-R(L)] mRNA及瘦素短型受体[Leptin receptor short form,Lep-R(S)] mRNA在乳腺癌合并肥胖症患者乳腺组织中的表达水平分别为:(0.71±0.32)、(0.64±0.29)和(0.57±0.21),明显高于乳腺良性病变合并肥胖症患者[(0.41±0.26)、(0.34±0.19)和(0.30±0.17)],(P<0.05)。乳腺组织中瘦素 mRNA的表达水平与Lep-R(L)及Lep-R(S) mRNA水平呈显著正相关分别为:(r=0.4030,P=0.0002;r=0.3502,P=0.0014)。瘦素 mRNA和瘦素受体 mRNA的表达与腋窝淋巴结转移、绝经、TNM分期及病理类型均无显著相关性。结论瘦素可能以自分泌的方式参与了乳腺癌的发生。

多囊卵巢综合征患者卵泡液瘦素水平变化及对卵细胞受精率、卵裂率的影响

目的:探讨体外受精-胚胎移植(IVF-ET)周期中多囊卵巢综合征(PCOS)患者卵泡液瘦素水平变化及对卵细胞受精率、卵裂率的影响。方法:留取行IVF-ET治疗的PCOS患者(PCOS组,n=32例)和因输卵管因素不孕妇女(对照组,n=32例)的卵泡液,利用ELISA法和RIA法分别测定卵泡液瘦素浓度和内分泌指标,观察并记录两组卵细胞受精率、卵裂率。结果:①两组卵泡液瘦素与睾酮水平呈正相关(r=0.444,P<0.01);②PCOS组卵泡液瘦素水平明显高于对照组(P<0.01);③PCOS组卵细胞受精率、卵裂率明显低于对照组(P<0.01)。结论:PCOS患者卵泡液瘦素水平增高对卵细胞受精率、卵裂率有影响,可能是其IVF-ET妊娠成功率低的原因之一。

大疱性类天疱疮患者血清瘦素及可溶性瘦素受体的研究

目的:探讨瘦素及可溶性瘦素受体在大疱性类天疱疮患者血清中的变化及其在发病中的作用。方法:分别采用放射免疫分析法及夹心ELISA法检测30例患者血清瘦素及可溶性瘦素受体水平,并以30例健康体检和自愿献血者为正常对照。结果:与正常对照组相比,大疱性类天疱疮患者血清瘦素水平显著升高、血清可溶性血清瘦素受体水平明显降低,差异均有显著性(P均<0.05)。与正常对照组相比,重症和中轻症组血清瘦素水平均升高(P<0.001或P<0.05)、可溶性瘦素受体水平均降低(P均<0.005);且重症组与中轻症组相比,血清瘦素水平升高、可溶性瘦素受体水平降低,差异均有显著性(P<0.05)。将患者按性别分组:与各自正常对照组相比,男性和女性病例组血清瘦素均明显升高(P均<0.05)、可溶性瘦素受体均明显降低,差异均有显著性(P<0.005和P<0.05)。相关性分析表明:天疱疮患者瘦素与可溶性瘦素受体呈负相关(r=-0.34,P<0.05)。结论:大疱性类天疱疮患者血清瘦素及可溶性瘦素受体存在异常,这种异常可能在起其发病过程中起一定作用。

脂肪细胞因子与糖尿病运动疗法研究述评

脂肪细胞分泌的多种细胞因子可能在糖尿病发病过程中起着重要作用,特别是与2型糖尿病胰岛素抵抗有关。通过总结国内外的研究成果,综述4种脂肪细胞因子(瘦素、肿瘤坏死因子α、脂联素及抵抗素)与糖尿病的关系,及运动对脂肪细胞因子的影响,分析运动对脂肪细胞因子的影响与糖尿病运动疗法的关系———运动对脂肪细胞因子的影响可能是糖尿病运动疗法的机制之一,并对今后的研究提出了建议。

瘦素与妊娠

瘦素是由白色脂肪细胞分泌的一种内分泌激素,可以调节食欲及机体能量代谢的平衡。瘦素同青春期的开始,发育力及妊娠调节机制有关。一些外周组织,如胎盘的滋养层细胞,也可合成和分泌瘦素。因此,瘦素与妊娠的关系十分密切,该文综述近年来瘦素在妊娠中的作用。如瘦素与妊娠的关系、与胎儿生长的关系、与妊娠病理的关系、与胎源性的成人健康和疾病的关系等。

妊娠期大鼠大量摄入酒精对子代糖代谢的影响及其机制

目的观察妊娠期大鼠大量摄入酒精对子代出生时及成年期糖代谢的影响,并探讨其机制。方法Wistard孕鼠酒精灌胃4g/(kg.d)至分娩前为酒精组,对照组给予等体积蒸馏水。每组子代鼠在出生1d及13周龄时,测定血糖、血浆胰岛素和抵抗素及脂肪组织抵抗素、瘦素mRNA转录水平。子代鼠13周龄时进行腹腔葡萄糖耐量试验。RT-PCR检测脂肪组织瘦素、抵抗素mRNA转录水平。结果与对照组比较,摄入酒精孕鼠的新生鼠出生时体重明显降低,血糖升高,血浆胰岛素含量降低。13周龄时酒精组血糖与对照组相比差异无显著意义,但血浆胰岛素明显高于对照组;葡萄糖耐量减低,葡萄糖及胰岛素曲线下面积明显增加。血浆抵抗素含量增加,酒精组新生鼠及13周龄子代鼠脂肪组织中抵抗素mRNA转录水平均显著增加,而酒精组新生鼠脂肪组织瘦素mRNA转录水平降低,13周龄子代鼠瘦素mRNA转录水平与对照组相比差异无显著意义。结论孕鼠大量摄入酒精引起子代出生后至成年期糖代谢改变可能与抵抗素增加有关。

海带多糖对高脂血症小鼠血清瘦素水平及瘦素受体表达的影响

本实验目的在于探讨海带多糖对实验性高脂血症小鼠瘦素及其受体水平的影响及其可能的机制。将健康雄性昆明小鼠80只,随机分为正常饲料组和高脂饲料组,后组以高脂饲料喂养建立高脂血症动物模型。将建模成功的小鼠随机均衡分为高脂模型组和海带多糖治疗组,后组以海带多糖灌胃干预。自动生化分析仪检测小鼠空腹血脂水平,ELISA测定血清瘦素(Leptin)含量,免疫组织化学法和Western blot检测下丘脑组织中瘦素受体(Lep-R,OBR)蛋白表达,RT-PCR检测OBR mRNA表达。结果示海带多糖治疗组小鼠血脂及血清Leptin水平较模型组显著降低(P<0.05),下丘脑OBR mRNA及其蛋白表达水平较模型组显著升高(P<0.05)。说明海带多糖可以通过提高下丘脑OBR的水平,改善瘦素抵抗,从而发挥降脂作用。

瘦素对LPS诱导的小鼠胸腺细胞凋亡的保护作用

目的:观察瘦素对小鼠胸腺细胞凋亡的保护作用,探讨其作用机制。方法:取出小鼠胸腺细胞,用MTT法检测瘦素对胸腺细胞的毒性作用,采用AnnexinV/PI双染色法流式细胞仪检测细胞凋亡,以RT-PCR检测caspase3 mRNA的表达。结果:瘦素可呈剂量依赖性的减少LPS对胸腺细胞的毒性作用,流式细胞仪检测表明瘦素可抑制LPS诱导的细胞凋亡,其浓度>100ng/ml时有统计学意义。RT-PCR表明加入瘦素后caspase3的表达下降,且呈剂量依赖性。结论:瘦素对LPS诱导的胸腺细胞凋亡有一定的抑制作用。

妊娠期糖尿病瘦素与脂联素水平及干预变化

目的探讨韶关市妊娠期糖尿病（GDM）的发病率、瘦素及脂联素水平及干预变化。方法采取分层整群随机抽样方法对韶关地区2006年1月至2010年12月确诊GDM患者262例及1508例正常孕妇的血清瘦素、脂联素水平进行分析，并比较193例单纯饮食控制及59例应用饮食控制加胰岛素治疗的GDM患者治疗前后瘦素、脂联素及糖化血红蛋白变化情况。结果GDM组患者的血清瘦素水平明显高于正常组（P〈0．05），而脂联素水平却明显低于正常组（P〈0．05）。193例单纯饮食控制的GDM患者治疗后糖化血红蛋白降低，血清瘦素水平降低，血清脂联素水平升高。59例应用饮食控制加胰岛素治疗的GDM患者治疗后糖化血红蛋白明显降低，血清瘦素及血清脂联素水平均升高。结论血清瘦素、脂联素与GDM的发生密切相关，结合两个指标，可以预测GDM的发生，饮食控制加胰岛素治疗可改善GDM患者的预后。

糖尿病高危人群脂肪细胞因子与代谢综合征关系的研究

目的研究脂肪细胞因子与代谢综合征（MS）的关系，探讨其对MS临床诊断的预测价值。方法收集414名2型糖尿病（T2DM）一级亲属，根据2005年国际糖尿病联盟（IDF）共识诊断MS标准，分为MS。组（无MS组分）115例，MS1组（1种MS组分）118例，MS2组（2种MS组分）77例，MS3组（≥3种MS组分）104例，酶联免疫法测定上述人群的瘦素、内脂素、脂联素及抵抗素水平，放射免疫法测定血清视黄醇结合蛋白-4（RBP-4）。结果（1）随MS组分个数的聚集，血清脂联索水平逐渐降低，瘦素及女性RBP-4水平逐渐增加，三者均与MS组分聚集有较强的平行关系；而内脂素水平只在MS，组有明显降低；抵抗素水平则未见随MS组分聚集有变化趋势。（2）高瘦素水平Q4组（以四分位值分组）与低瘦素水平Q1组比较，MS的各组分（高血压、高血糖、血脂异常、胰岛素抵抗和肥胖）的检出率明显增加（Q4／Q1的OR值分别为1．3、1．8、1．6、5．2和3．0）。（3）血清RBP-4水平增加不仅与糖调节异常相关（Q4／Q1，OR=2．6），且与高血压（Q4／Q1，OR=1．6）、血脂异常（Q4／QI，OR=1．9）和肥胖（Q4／Q1，OR=1．5）及聚集即MS更相关（Q4／Q1，OR=2.7）。在RBP-4水平高的Q4组，MS检出率为50％。（4）处于脂联素水平最低的Q1组与最高的Q4组相比，MS及其组分（血脂异常、肥胖、高血糖和胰岛素抵抗）的检出率显著增加（Q4／Q1，OR值为2．1—4．1），但高血压的检出率却呈下降趋势。结论脂肪因子中以脂联素、瘦素和RBP-4与MS的关系最密切。提示三者可能也是参与MS形成的关键因子，可作为MS发病的早期预示标志物和治疗新靶点。

缺血性脑卒中患者血清瘦素水平与颈动脉粥样硬化的研究

目的探讨急性缺血性脑卒中患者血清瘦素水平与颈动脉粥样硬化(CAS)的关系。方法选择急性缺血性脑卒中患者476例,根据颈动脉彩色超声结果分为CAS组322例和非CAS组154例。CAS组根据CAS的严重程度分为:轻度CAS 161例、中度CAS 114例和重度CAS 47例;根据超声检查分为:硬斑块127例、软斑块65例和混合斑块130例。分析组间血清瘦素水平与颈动脉斑块严重程度、斑块性质的相关性。结果 CAS组血清瘦素水平明显高于非CAS组,差异有统计学意义(P<0.05)。Logistic回归分析,血清瘦素水平升高是CAS形成的独立危险因素。中度和重度CAS患者血清瘦素水平明显高于轻度CAS患者(P<0.01)。Spearman等级相关分析,CAS严重程度与血清瘦素水平呈正相关(r=0.366,P<0.01)。结论血清瘦素水平的升高能预测CAS的发生,并能评估CAS的严重程度,但尚不能作为评估CAS斑块稳定性的可靠指标。