Let-7e-5p对变应性鼻炎小鼠Treg/Th17细胞失衡的影响

目的:探讨let-7e-5p对变应性鼻炎(AR)小鼠调节性T细胞(Treg)/辅助性T细胞17(Th17)失衡的影响。方法:12只BALB/c小鼠,3只为正常组,余9只小鼠采用卵清蛋白(OVA)和氢氧化铝[Al(OH)3]建立AR模型后随机均分为模型组(仅造模)、let-7e-5p激动剂对照组(鼻内滴注let-7e-5p agomir阴性对照)及let-7e-5p激动剂组(鼻内滴注let-7e-5p agomir);采用行为学评分考察各组小鼠的过敏症状,酶联免疫吸附法检测各组小鼠血清免疫球蛋白E(IgE)、白细胞介素17-A(IL-17A)和白细胞介素-10(IL-10)水平,HE染色观察各组小鼠鼻黏膜组织学变化,采用实时荧光定量PCR检测各组小鼠鼻黏膜组织let-7e-5p的表达、蛋白印迹法检测RORγt和Foxp3蛋白的表达,采用流式细胞术检测各组小鼠外周血CD4^+Foxp3^+Treg和CD4^+IL-17A+Th17细胞亚群变化。结果:模型组小鼠较正常组的行为学评分、血清IgE及IL-17A水平明显增高、IL-10水平明显降低(P<0.01),let-7e-5p激动剂组较模型组的行为学评分、IgE及IL-17A水平明显下降、IL-10水平明显升高(P<0.01);同模型组比较,let-7e-5p激动剂组小鼠鼻黏膜基底层结构清晰,炎性细胞浸润明显减少;模型组小鼠鼻黏膜组织let-7e-5p基因的表达较正常组减少,let-7e-5p激动剂组则较模型组升高(P<0.05);模型组小鼠鼻黏膜组织RORγt蛋白表达较正常组增加、Foxp3蛋白表达减少,let-7e-5p激动剂组小鼠鼻黏黏膜组织RORγt蛋白表达较模型组减少、Foxp3蛋白表达增加(P<0.05);模型组小鼠较正常组外周血中CD4^+Foxp3^+Treg细胞亚群比例明显降低,CD4^+IL-17A+Th17细胞亚群比例明显升高(P<0.01);let-7e-5p激动剂组小鼠较模型组的CD4^+Foxp3^+Treg细胞亚群比例显著升高,CD4^+IL-17A+Th17细胞亚群比例明显降低(P<0.01)。结论:Let-7e-5p可能通过调节AR小鼠Foxp3和RORγt蛋白的表达,介导Treg/Th17细胞平衡,减轻炎症反应,从而改善AR小鼠鼻部过敏症状。

Let-7e-5p调控Fas/FasL影响小鼠变应性鼻炎发病的机制研究

目的探讨let-7e-5p对小鼠变应性鼻炎的影响及机制。方法将18只BALB/c小鼠按随机数字表法均分为对照(Control)组、变应性鼻炎(AR)组、let-7e-5p激动剂阴性对照(AR+agomir-NC)组、let-7e-5p激动剂(AR+agomir)组、let-7e-5p抑制剂阴性对照(AR+antagomir-NC)组和let-7e-5p抑制剂(AR+antagomir)组。除Control组外,其余组应用卵白蛋白(OVA)致敏建立AR模型,AR+agomir组和AR+antagomir组同时给予let-7e-5p agomir或let-7e-5p antagomir进行干预,末次激发致敏后对小鼠变应性鼻炎进行评分,HE染色观察鼻黏膜组织,统计嗜酸性粒细胞数量,real-time PCR检测let-7e-5p、Fas、FasL m RNA表达,Western blot检测Fas、FasL蛋白表达,酶联免疫吸附试验检测血清免疫球蛋白E(IgE)、特异性IgE(sIgE)、干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素(IL)-12、IL-4、IL-13水平,双荧光素酶实验分析let-7e-5p和Fas、FasL的靶向关系。结果与Control组比较,AR组小鼠变应性鼻炎评分升高,鼻黏膜增生明显,嗜酸性粒细胞数量增加,let-7e-5p mRNA表达及IFN-γ、IL-12水平下降,Fas、FasL表达及IgE、sIgE、IL-4、IL-13水平升高(均P<0.05)。与AR+agomir-NC组比较,AR+agomir组小鼠变应性鼻炎评分降低,鼻黏膜结构清晰,嗜酸性粒细胞数量减少,let-7e-5p mRNA表达及IFN-γ、IL-12水平升高,Fas、FasL表达及IgE、sIgE、IL-4、IL-13水平下降(均P<0.05)。与AR+antagomir-NC组比较,AR+antagomir组小鼠变应性鼻炎评分升高,鼻黏膜增厚,嗜酸性粒细胞数量增加,let-7e-5p mRNA表达减少,Fas、FasL表达及IgE、sIgE、IL-4、IL-13水平升高(均P<0.05),IL-12、IFN-γ水平差异无统计学意义。与NC+3’UTR-WT组比较,let-7e-5p agomir+3’UTR-WT组荧光素酶活性下降(P<0.05)。结论Let-7e-5p通过靶向调节Fas/FasL影响1型辅助性T细胞(Th1)/2型辅助性T细胞(Th2)平衡,从而参与AR小鼠变应性鼻炎发病的进展。

let-7e对PBMCs和原代单核细胞产生IL-10的影响

目的研究let-7e对PBMCs和原代单核细胞产生IL-10的影响。方法生物信息学分析let-7e的靶基因并通过荧光素酶报告实验进行验证;用1μg/ml或10μg/ml LPS刺激PBMCs和原代单核细胞24、48和72 h后,ELISA法检测细胞培养上清中IL-10的质量浓度,筛选出LPS最佳刺激时间和质量浓度;用let-7e mimic或阴性对照(NC)瞬时转染PBMCs和原代单核细胞24、36和48 h后,q RT-PCR和免疫荧光法检测其转染效率;转染细胞经LPS刺激后,ELISA法检测细胞培养上清中IL-10的质量浓度。结果 let-7e可能直接靶向抑制IL-10;1μg/ml LPS刺激细胞24 h即可产生较高水平的IL-10;瞬转let-7e mimic 24 h即可使细胞高表达let-7e;let-7e mimic组细胞培养上清中IL-10的质量浓度低于let-7e NC组。结论 let-7e可抑制PBMCs和原代单核细胞产生IL-10。

血浆miR-let-7e-5p、LncRNA NEAT1表达水平与2型糖尿病视网膜病变的关系

目的检测2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)患者血浆中微小RNA-let-7e-5p(minute RNA-let-7e-5p,miR-let-7e-5p)和长链非编码核富含丰富的转录本1(lncRNA nuclear-enriched abundant transcript 1,LncRNA NEAT1)的表达水平,并讨论其与糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)的关系。方法从我院选取收治的T2DM患者126例纳入研究,根据有无DR情况分为84例DR组和42例非DR组,根据DR分级标准分为31例非增生型DR(non-proliferative DR,NPDR)和53例增生型DR(proliferative DR,PDR)。采用荧光定量聚分酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)技术检测T2DM患者血浆中miR-let-7e-5p和LncRNA NEAT1的表达水平,比较各组间miR-let-7e-5p和LncRNA NEAT1表达水平的差异;Pearson相关系数分析DR组患者血浆miR-let-7e-5p和LncRNA NEAT1表达水平的相关性;ROC曲线检测miR-let-7e-5p、LncRNA NEAT1对DR的诊断价值。结果非DR患者相比,PDR和NPDR患者的血浆miR-let-7e-5p表达水平降低,LncRNA NEAT1表达水平增加(P<0.05);并且与NPDR组相比,PDR组的血浆miR-let-7e-5p表达水平降低,LncRNA NEAT1表达水平升高(P<0.05);DR患者血浆miR-let-7e-5p与LncRNA NEAT1呈负相关(r=-0.534,P<0.05);miR-let-7e-5p诊断DR的AUC为0.856(95%CI:0.789~0.924),敏感度为77.38%,特异度为80.95%;LncRNA NEAT1诊断DR的AUC为0.844(95%CI:0.778~0.910),敏感度为69.05%,特异度为95.24%;两者联合诊断DR的AUC为0.935(95%CI:0.891~0.978),敏感度为88.10%,特异度为92.86%,两者联合对DR患者具有较高的诊断能力。结论miR-let-7e-5p和LncRNA NEAT1与T2DM患者DR的发生和进展有关,可能作为诊断DR发生的一种潜在生物标志物,且两者联合的诊断能力更佳。

颞叶癫痫大鼠癫痫持续状态后海马组织中let-7e和miR-23的表达变化

目的观察颞叶癫痫大鼠海马组织中let-7e和miR-23在癫痫持续状态（SE）后不同时间点的表达变化。方法 160只大鼠,随机分为生理盐水对照组10只、癫痫模型组150只,癫痫模型组制备氯化锂-匹罗卡品诱导的颞叶癫痫大鼠模型,并将SE后不同时间点（0 h、1 h、6 h、12 h、1天、2天、7天、10天、30天、50天）分为10个组,每组15只。采用荧光实时定量PCR检测各组大鼠海马组织let-7e和miR-23。结果癫痫模型组SE后0 h、1 h、6 h、12 h、1天、2天、7天、10天、30天、50天let-7e相对表达量分别为0.61、0.84、0.85、1.40、10.74、0.71、0.65、1.52、1.69、0.13,miR-23相对表达量分别为0.27、0.31、0.41、0.39、4.49、0.21、0.18、0.12、0.83、2.40,与生理盐水对照组比较,P均〈0.05。结论颞叶癫痫大鼠SE后海马组织中let-7e和miR-23均先出现表达水平上调,24 h达到峰值后表达水平下调,let-7e在10～30天表达水平再次升高,miR-23在30～50天表达水平再次升高。

let-7e嵌合小鼠模型的建立和表型分析

目的:探讨微小RNA let-7e在淋巴细胞分化发育中的作用。方法:构建let-7e过表达嵌合小鼠模型,研究let-7e对淋巴组织中T细胞、B细胞、树突状细胞(DC)、髓系来源的抑制性细胞(MDSC)发育的影响;通过流式细胞仪检测MDSC的细胞增殖和细胞凋亡,初步探讨let-7e促使MDSC增多的机制。结果:嵌合小鼠模型检测结果显示:过表达let-7e后B细胞减少,浆细胞样DC(p DC)、经典DC(c DC)增多,而T细胞及亚群比例没有变化;同时,骨髓和脾脏中的MDSC比例升高,其凋亡水平明显降低,但其增殖没有改变。结论:let-7e参与了淋巴细胞的分化和发育;let-7e可以通过抑制细胞凋亡促进MDSC的增多。

microRNA let-7e逆转人卵巢癌细胞顺铂耐药及其作用机制

目的:研究人类microRNA let-7e(hsa-let-7e)在人卵巢癌顺铂耐药细胞中的表达及其作用机制。方法:采用实时荧光定量PCR法检测let-7e在卵巢癌亲本细胞株A2780及耐顺铂卵巢癌细胞A2780/CP中的表达;采用实时荧光定量PCR法和Western blot法分别检测A2780细胞和A2780/CP细胞中果蝇zeste基因增强子同源物2(EZH2)mRNA和蛋白的表达。将let-7e模拟物(mimics)及阴性对照(negative control,NC)转染A2780/CP细胞,采用实时荧光定量PCR和Western blot法分别检测EZH2 mRNA和蛋白的表达,MTT法检测细胞的半数抑制浓度(IC50),台盼蓝染色实验检测经顺铂作用不同时间后的细胞存活率。结果:与A2780细胞比较A2780/CP细胞中let-7e呈低表达、EZH2mRNA和蛋白相对表达水平显著增高,差异均有统计学意义(P<0.05)。A2780/CP细胞转染let-7e mimics后,EZH2 mRNA和蛋白的相对表达水平较阴性对照组明显下降(P<0.05),细胞对顺铂的敏感性显著增强,其半数抑制浓度(IC50值)与阴性对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。顺铂作用于转染let-7e mimics的A2780/CP细胞后,细胞的存活率较阴性对照组明显降低(P<0.05)。结论:let-7e在卵巢癌耐药细胞A2780/CP中异常低表达,上调其表达可部分逆转细胞耐药性。let-7e可能通过作用于靶蛋白EZH2参与卵巢癌细胞顺铂耐药的发生和发展。

let-7e甲基化沉默在卵巢癌中的作用

目的:研究let-7e甲基化沉默在卵巢肿瘤中的作用。方法:采用q MSP、RTPCR法检测30例卵巢组织、A2780细胞系(A2780、A2780/CP)中let-7e甲基化水平及let-7e表达。采用DNA甲基化酶抑制剂5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)处理A2780/CP细胞,检测let-7e表达。结果:let-7e所在区域富含Cp G岛。高甲基化时,卵巢癌组织和细胞中let-7e表达量降低,let-7e表达与DNA甲基化呈负相关(r=-0.6194,P=0.0003)。5-Aza-CdR处理卵巢癌细胞后,let-7e表达明显升高。结论:卵巢癌组织和细胞中let-7e表达受DNA甲基化负调控。DNA甲基化下调let-7e表达可能参与卵巢癌的发生及进展,也与卵巢癌化疗耐药有关。

甲状腺癌患者血清let-7e、miR-142表达及其与Th17/Treg的相关性分析

目的分析甲状腺癌患者血清中let-7e、miR-142表达水平及其与辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)相关性及甲状腺癌发展的关系。方法选取2016年5月—2019年6月复旦大学附属中山医院青浦分院普外科收治的甲状腺癌患者109例为研究对象,另选取同期在医院健康体检者109例作为健康对照组。qRT-PCR法检测血清中let-7e、miR-142表达水平,流式细胞术检测Th17及Treg水平,ELISA法检测血清相关细胞因子水平,分析let-7e、miR-142表达与甲状腺癌患者临床病理特征及Th17/Treg相关性。结果甲状腺癌患者血清let-7e、miR-142表达水平均显著低于健康对照组(t=9.196,12.847,P均<0.01)。甲状腺癌患者外周血Th17细胞比例、Treg细胞比例及Th17/Treg均显著高于健康对照组(t=21.733,13.921,7.256,P均<0.01)。let-7e、miR-142及Th17/Treg水平与甲状腺癌患者TNM分期和淋巴结转移有关(t=3.803,4.860,5.138,6.416,3.987,6.341,P均<0.01)。甲状腺癌患者血清IL-10、IL-17、IL-23、IL-6及TGF-β水平显著高于健康对照组(t=42.865,22.503,17.622,23.928,24.804,P均<0.01)。甲状腺癌患者血清let-7e、miR-142表达水平与外周血Th17/Treg水平均呈负相关(r=-0.337,-0.402,P均=0.000),甲状腺癌患者血清let-7e、miR-142表达水平与IL-10、IL-17、IL-23及TGF-β水平亦呈负相关(P均<0.01)。结论甲状腺癌患者血清let-7e、miR-142表达水平下调,与Th17/Treg及其相关因子水平呈负相关,三者可能存在调控机制,共同影响甲状腺癌发生发展。

外周血miR-494及Let-7e在诊断急性缺血性脑卒中患者中的临床价值

目的:通过检测急性缺血性脑卒中患者与正常对照组外周血中miR-494及Let-7e的表达水平,探讨其与急性缺血性脑卒中的关系。方法:收集67例急性缺血性脑卒中患者及50例非卒中正常健康人群,采用实时荧光定量PCR法(Quantitative Real-time PCR,QRT-PCR)检测血浆中miR-494及Let-7e表达水平,比较两组外周血中表达水平的差异。并对miR-494及Let-7e行ROC曲线分析,分析其对急性缺血性脑卒中的诊断价值。进一步将急性缺血性脑卒中患者分为预后不佳组(MRS 3-6)和预后良好组(MRS0-2),分析其在两组之间的差异。结果:急性缺血性脑卒中患者外周血中的miR-494(1.71±1.14)及Let-7e(1.43±0.93)的表达水平较正常对照组外周血明显升高(P<0.05)。miR-494及Let-7e ROC曲线下面积分别为0.777、0.756。预后不良组的miR-494(2.04±0.11 vs.1.46±0.05)及Let-7e(1.68±0.61 vs.1.24±0.27)表达水平均较预后良好组显著升高,两组之间有统计学差异(P<0.05)。结论:miR-494及Let-7e可能与急性缺血性脑卒中相关,对急性缺血性脑卒中患者的临床诊断和预后判断具有潜在的应用价值。

甲状腺癌血清let-7e、DKK-1及TSGF的表达及与疾病严重程度的关系

目的探讨甲状腺癌患者血清线性能量传递-7e(let-7e)、Dick-kopfx相关蛋白-1(DKK-1)及肿瘤特异性生长因子(TSGF)的表达及与疾病严重程度的关系。方法选择2019年6月至2022年1月于民航上海医院进行治疗的165例甲状腺癌患者设为病例组,并选择本院同期进行体检的健康人100名作为对照组,分析两组血清let-7e、DKK-1及TSGF水平变化情况、比较病例组不同临床分期、组织学类型、预后血清let-7e、DKK-1及TSGF水平及血清let-7e、DKK-1及TSGF与疾病严重程度的相关性。结果病例组患者血清let-7e显著低于对照组,DKK-1及TSGF表达水平显著高于对照组,差异有统计学意义(t=14.472、35.428、25.537,P<0.05);血清let-7e水平:Ⅰ+Ⅱ期>Ⅲ期>Ⅳ期,差异有统计学意义(F=101.440,P<0.05),DKK-1及TSGF水平:Ⅰ+Ⅱ期<Ⅲ期<Ⅳ期,差异有统计学意义(F=197.821、21.506,P<0.05);不同组织学类型之间血清let-7e、DKK-1及TSGF表达水平比较差异无统计学意义(F=2.127、0.067、0.011,P>0.05);预后良好患者血清let-7e显著高于预后不良,DKK-1及TSGF表达水平显著低于预后不良患者,差异有统计学意义(t=7.347、10.178、3.542,P<0.05);相关性分析结果显示,血清let-7e和病情程度之间呈负相关,血清DKK-1及TSGF和病情程度之间呈正相关(r=-0.413、0.371、0.356,P<0.05)。结论血清let-7e、DKK-1及TSGF在甲状腺癌患者表达异常,与疾病严重程度之间关系密切,对于病情控制具有重要临床意义。

变应性鼻炎患者血清miR-Let-7e、sCD48水平变化及其与病情的关系

目的 观察变应性鼻炎(AR)患者血清微小核糖核酸Let-7e(miR-Let-7e)、可溶性CD48(sCD48)水平变化,并探讨其与患者病情的关系。方法 选取AR患者102例为观察组,同期体检健康志愿者60例为对照组。采用实时荧光定量PCR法检测血清miR-Let-7e水平,ELISA法检测血清sCD48水平,比较不同临床特征的AR患者血清miR-Let-7e、sCD48水平,分析二者与病情严重程度、变应性鼻炎评分(SFAR评分)、免疫球蛋白E(IgE)的关系。多因素Logistic回归分析影响中重度AR发生的相关因素,受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-Let-7e、sCD48单独及联合检测对中重度AR的预测价值。结果 观察组血清miR-Let-7e、sCD48水平分别为2.32±0.57、(4.52±0.68)μg/L,对照组分别为4.69±0.64、(0.42±0.16)μg/L,两组比较P均<0.05。不同性别、年龄、症状发作时间、变应原的AR患者血清miR-Let-7e、sCD48水平比较差异均无统计学意义(P均>0.05);中重度、SFAR评分≥7分、IgE阳性的AR患者血清miR-Let-7e分别低于轻度、SFAR评分<7分、IgE阴性者,血清sCD48分别高于轻度、SFAR评分<7分、IgE阴性者(P均<0.05)。AR患者血清miR-Let-7e与病情严重程度、SFAR评分、IgE阳性均呈负相关关系,血清sCD48与病情严重程度、SFAR评分、IgE阳性均呈正相关关系(P均<0.05)。血清miR-Let-7e升高是影响中重度AR发生的独立保护因素,血清sCD48升高是影响中重度AR发生的独立危险因素[β分别为-0.456、0.581,OR及95%CI分别为0.634(0.469~0.857)、1.788(1.289~2.480),P均<0.05]。血清miR-Let-7e、sCD48单独与联合预测中重度AR发生的曲线下面积及95%CI分别为0.798(0.740~0.869)、0.823(0.753~0.879)、0.884(0.813~0.934),敏感度分别为59.3%、62.8%、90.8%,特异度分别为78.3%、80.2%、75.3%。结论 AR患者血清miR-Let-7e水平降低、sCD48水平升高,二者与病情严重程度有关,联合检测有助于判断病情。

hsa-let-7e-5p对肺腺癌细胞迁移的影响

目的筛选肺腺癌中差异表达的环状非编码RNA(miRNA),并分析其对肺腺癌(LUAD)迁移的影响及潜在机制。方法通过miRNA芯片筛选出LUAD组织和正常肺组织中差异表达的miRNA并预测其潜在的生物学功能和信号通路;通过荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)和癌症基因组图谱(TCGA)分析验证hsa-let-7e-5p在LUAD组织和细胞系中的表达水平;通过划痕试验检测hsa-let-7e-5p对LUAD细胞迁移的影响;通过生物信息学分析和qRT-PCR验证hsa-let-7e-5p与基因DTX2、NME6、C8orf58、GATM和DHX57之间的靶向关系。结果miRNA芯片结果显示肺腺癌组织中347个miRNA下调而229个miRNA上调。hsa-let-7e-5p在LUAD组织和细胞系中下调,过表达hsa-let-7e-5p可以抑制肺腺癌细胞迁移。结论hsa-let-7e-5p在肺腺癌中低表达并抑制肺腺癌细胞的迁移,DTX2、NME6、C8orf58、GATM和DHX57是hsa-let-7e-5p的潜在靶基因。

MicroRNA let-7e与食管鳞癌临床分期研究

目的:检测食管鳞癌患者不同临床分期癌组织及癌旁组织中MicroRNA let-7e表达水平的差异。方法:应用实时荧光定量RT-PCR Taqman MGB探针法,检测60例食管癌癌组织及癌旁组织中MicroRNA let-7e表达水平。以U6 snRNA为内参,进行荧光定量PCR,统计分析表达水平的差异。结果:MicroRNA let-7e的表达水平在癌组织比癌旁组织高,病理分期I期与III期相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:MicroRNA let-7e在食管鳞癌中表达水平明显高于癌旁组织,可能用于食管鳞癌临床分期诊断的重要标记。

煤矿粉尘对大鼠白介素-6和let-7e的影响研究

目的 探讨煤矿粉尘致大鼠白介素-6 (IL-6)和let-7e的水平变化,为煤工尘肺机制研究提供依据。方法 清洁级健康雄性SD大鼠64只,随机纳入对照组、煤尘组、混合尘组和石英组。采用非暴露式气管灌注法,对照组一次性给予生理盐水1 mL灌入气管,各染尘组一次性给予粉尘悬浮液1 m L,于染尘1个月和6个月后麻醉处死,取大鼠肺组织进行苏木精-伊红染色,采用Szapiel评分体系进行肺组织病理学评分;采用酶联免疫吸附法检测肺泡灌洗液IL-6水平,实时荧光定量PCR测定let-7e相对表达量。结果 染尘1个月,煤尘组和混合尘组大鼠肺组织内均可见少量煤斑和炎性渗出;石英组大鼠肺组织结构破坏,肺泡间隔轻度纤维化增厚。染尘6个月,煤尘组大鼠可见较多煤斑,肺泡间隔轻度纤维化增厚;混合尘组大鼠肺泡结构破坏,肺间质纤维增生,可见硅结节;石英组大鼠肺泡结构明显破坏,间质纤维增生显著,可见硅结节。染尘时间和染尘类型交互影响肺组织病理学评分、IL-6水平和let-7e相对表达量(P<0.05)。同一染尘类型内,染尘6个月大鼠肺组织病理学评分和IL-6水平高于染尘1个月,let-7e相对表达量低于染尘1个月(均P<0.05);同一染尘时间内,各染尘组大鼠肺组织病理学评分和IL-6水平高于对照组,let-7e相对表达量低于对照组(均P<0.05)。结论 煤矿粉尘可引起大鼠IL-6水平升高和let-7e表达降低,染尘类型与染尘时间可交互影响IL-6和let-7e水平。

血清TLR4 let-7e及MCP-1在儿童变应性鼻炎中的表达及与疾病活动度的相关性

目的 探讨血清单核细胞球样受体4(TLR4)、let-7e及单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)在儿童变应性鼻炎中的表达及与疾病活动度的相关性。方法 选择2021年1月—2022年10月于浙江中医药大学附属第一医院(浙江省中医院)进行治疗的86例儿童变应性鼻炎患儿设为病例组,并选择该院同期进行体检的70例健康儿童作为对照组,分析血清TLR4、let-7e及MCP-1水平变化情况及与病情程度的相关性。结果 病例组血清let-7e表达水平(0.71±0.12)较对照组(1.36±0.42)更低,TLR4及MCP-1[(56.05±7.15)ng/L、(87.84±20.54)pg/ml]表达水平较对照组[(22.41±4.84)ng/L、(60.31±18.41)pg/ml]更高,差异有统计学意义(P<0.05);轻度患儿血清let-7e(0.86±0.14)较中度、重度(0.58±0.15、0.46±0.11)患儿更高,TLR4及MCP-1[(48.56±6.78)ng/L、(80.58±20.12)pg/ml]表达水平较于中度、重度[(58.38±7.08)ng/L、(78.51±8.56)ng/L、(89.49±22.05)pg/ml、(111.08±25.16)pg/ml]患儿更低,中度患儿血清let-7e(0.58±0.15)较重度(0.46±0.11)患儿更高,TLR4及MCP-1[(58.38±7.08)ng/L、(89.49±22.05)pg/ml]表达水平较重度[(78.51±8.56)ng/L、(111.08±25.16)pg/ml]患儿更低,差异均有统计学意义(均P<0.05);相关性分析结果中显示,血清let-7e和病情程度之间呈负相关,血清TLR4及MCP-1和病情程度之间呈正相关(P<0.05)。结论 血清TLR4、let-7e及MCP-1在儿童变应性鼻炎中表达异常,与病情程度之间关系密切,对于病情控制具有重要临床意义。

外周血let-7e-5p作为缺血性脑卒中生物标志物的研究

目的探讨外周血let-7e-5 p的表达水平与缺血性脑卒中发病风险之间的关联,以及其作为缺血性脑卒中生物标记物的可行性。方法选择302例2013年在深圳市人民医院确诊的缺血性脑卒中初发病例,以及302例与之年龄性别相匹配的在医院做常规健康检查的对照,采用实时定量PCR检测外周全血let-7e-5 p的表达水平,多元logistic回归分析miRNA表达水平与缺血性脑卒中发生的关联,应用受试者工作特征曲线（ROC）和重新分类方法分析miRNA是否可作为判断缺血性脑卒中的依据。结果缺血性脑卒中病例外周血中let-7e-5 p的表达水平高于对照,差异有统计学意义（P〈0.05）。let-7e-5 p表达水平升高与缺血性脑卒中发病风险的增加存在显著关联性[OR=2.13,95%CI,1.75-2.59]。与传统危险因素模型相比,加入let-7e-5 p可以显著增加曲线下面积且差异有统计学意义（P〈0.05）,重分类改善幅度为16.76%（95%CI：11.16%-22.37%）,综合判别指数为0.10（95%CI：0.08-0.13）。另外,病例组中let-7e-5 p表达水平与血小板数量和血小板压积呈显著负相关关系（P〈0.05）。结论外周血let-7e-5 p的表达水平与缺血性脑卒中发生之间存在显著关联性,let-7e-5 p有望作为缺血性脑卒中的生物标记物。

食管癌组织中miRNA let-7e的表达

目的研究食管癌组织中微小RNA(miRNA)let-7e的表达水平。方法以U6小核RNA为内参,应用RQ-PCR法检测40例食管癌组织及癌旁组织中miRNA let-7e的表达水平,分析其表达水平与临床病理参数的关系。结果 miRNA let-7e在食管癌组织的表达水平高于癌旁组织(10.54±5.50)倍(P<0.01);其与患者性别和肿瘤组织学类型、淋巴转移、分化程度及分期无明显相关。结论 miRNA let-7e在食道癌组织中表达升高,可能作为食道癌分子生物学的诊断标记。

血清miRNA let-7e和miRNA-375表达在食管腺癌早期诊断中的临床意义

目的观察食管腺癌患者血清mi RNA let-7e和mi RNA-375表达及其临床意义。方法选取2014年1月—2017年3月来解放军第159医院就诊的食管腺癌患者65例作为食管腺癌组;选择同期行胃镜检查诊断为Barrett食管的患者30例和健康体检者30例分别为Barrett食管组和健康对照组。用实时PCR的方法检测并比较各组血清mi RNA let-7e和mi RNA-375表达,并观察食管癌患者血清mi RNA let-7e和mi RNA-375表达水平与临床病理特征的关系。结果食管腺癌组患者血清mi RNA let-7e表达量明显高于Barrett食管组和健康对照组(P<0.01),Barrett食管组高于健康对照组(P<0.01),手术后15 d血清mi RNA let-7e表达水平明显低于治疗前(P<0.01)。食管腺癌组血清mi RNA-375表达量明显低于Barrett食管组和健康对照组(P<0.01),而Barrett食管组低于健康对照组(P<0.01),治疗后血清mi RNA-375水平较治疗前明显升高(P<0.01)。食管腺癌组血清mi RNA let-7e和mi RNA-375表达与性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤大小和肿瘤浸润深度无明显相关性(P>0.05),而与分化程度、淋巴转移和肿瘤分期具有明显相关性(P<0.01)。血清mi RNA let-7e与mi RNA-375表达呈明显的负相关(r=-0.759,P<0.01)。结论 mi RNA let-7e和mi RNA-375基因参与了食管腺癌的发生发展,mi RNA let-7e促进肿瘤生长,mi RNA-375抑制肿瘤生长,两组存在某种平衡,可能成为早期诊断食管腺癌的生物标记物。

microRNAlet-7e在非小细胞肺癌中表达的研究

目的探讨microRNAlet-7e在非小细胞肺癌（NSCLC）中的功能。方法应用实时荧光定量反转录聚合酶链反应（RT—PCR）TaqmanMGB探针法检测35例NSCLC患者癌组织及癌旁组织中microRNAlet．7e的表达水平，以看家基因U6snRNA为内参，进行荧光定量PCR检测，统计分析表达水平的差异。结果癌组织microRNAlet-7e的表达水平比癌旁组织高（10．111±6．135）倍，差异有统计学意义（P=0．0001），腺癌microRNAlet．7e表达水平（10．301±5．228）比鳞状细胞癌（9．635±8．300）高，差异有统计学意义（P=0．038），不同患者性别、吸娴史、影像学分型、肿瘤大小、淋巴结转移、组织学类型、分化程度、分期间差异无统计学意义（P〉0．05）。结论microRNAlet．7e在NSCLC中表达水平明显高于癌旁组织，可能应用于NSCLC鳞状细胞癌与腺癌的分子生物学鉴别诊断，其可能发挥癌基因样作用。