期刊文献+
共找到16篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
Effect of Rare Earth Ions on Kinetic Properties of Escherichia coli Leucyl-tRNA Synthetase
1
作者 涂华民 杨燕生 +1 位作者 李勇 王恩多 《Journal of Rare Earths》 SCIE EI CAS CSCD 2000年第3期224-228,共5页
Escherichia coli leucyl-tRNA synthetase (LeuRS) is one of aminoacyl-tRNA synthetases (aaRSs) and belongs to class 1 aaRSs. The apparent steady-state kinetics of the aminoacylation reaction catalyzed by LeuRS in the pr... Escherichia coli leucyl-tRNA synthetase (LeuRS) is one of aminoacyl-tRNA synthetases (aaRSs) and belongs to class 1 aaRSs. The apparent steady-state kinetics of the aminoacylation reaction catalyzed by LeuRS in the presence of some RE3+ were studied. The results show that Mg2+ can be substituted by RE3+ for the aminoacylation reaction. The apparent K-m values for ATP and leucine are markedly different between native and Mg2+-free tRNA(1)(Leu). At high concentration of ATP there is inhibitory effect on Mg2+-free tRNA but not on native tRNA, which indicates that metal ions are a substrate of the aminoacylation reaction. 展开更多
关键词 rare earths leucyl-trna synthetase AMINOACYLATION
下载PDF
稀土离子对大肠杆菌亮氨酰-tRNA合成酶动力学性质的影响 被引量:3
2
作者 涂华民 杨燕生 +1 位作者 李勇 王恩多 《中国稀土学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第2期160-164,共5页
采用含pTrc 99B/leuS2转化子的高表达菌株 ,简便快速地提取、纯化大肠杆菌亮氨酰 tRNA合成酶。对部分稀土离子参与下的氨酰化反应表观稳态动力学性质进行了研究。氨酰化反应所需的Mg2 + 有可能被稀土离子取代 ,脱镁tRNALeu1 与未脱镁tRN... 采用含pTrc 99B/leuS2转化子的高表达菌株 ,简便快速地提取、纯化大肠杆菌亮氨酰 tRNA合成酶。对部分稀土离子参与下的氨酰化反应表观稳态动力学性质进行了研究。氨酰化反应所需的Mg2 + 有可能被稀土离子取代 ,脱镁tRNALeu1 与未脱镁tRNALeu1 对ATP和亮氨酸的表观Km 值明显不同。高浓度ATP对脱镁tRNA显示抑制作用 ,说明金属离子是氨酰化反应的底物之一。 展开更多
关键词 稀土 亮氨酰-trna 合成酶 氨酰化 大肠杆菌
下载PDF
大肠杆菌亮氨酰-tRNA合成酶与tRNA^(Leu)的相互作用 头孢菌素酰化酶的表达、翻译后加工和亚基重组(英文)
3
作者 李勇 王恩多 《中国科学院研究生院学报》 CAS CSCD 2003年第1期117-122,共6页
第一部分:为得到大量的大肠杆菌tRNALeu1 和tRNALeu2 ,研究tRNA与亮氨酰 tRNA合成酶(LeuRS)的相互作用,用基因克隆的方法高表达并纯化了它们;测定了接受活力和被LeuRS催化的动力学常数;改进了RNA体外转录必需的T7RNA聚合酶的纯化方法,... 第一部分:为得到大量的大肠杆菌tRNALeu1 和tRNALeu2 ,研究tRNA与亮氨酰 tRNA合成酶(LeuRS)的相互作用,用基因克隆的方法高表达并纯化了它们;测定了接受活力和被LeuRS催化的动力学常数;改进了RNA体外转录必需的T7RNA聚合酶的纯化方法,优化了转录条件,转录序列比文献值高 1 0倍.用体外转录方法得到了各种在接受茎突变的tRNALeu变种,研究了一个在CP1结构域插入 40个氨基酸残基的变种LeuRS A对tRNALeu2种等受体的识别,证明了tRNA Leu1 和tRNA Leu2 接受茎上的第一对硷基对是否摆动是LeuRS A识别的关键.  第二部分:在大肠杆菌中高表达头孢菌素酰化酶基因 1 0倍以上.研究了它的α 亚基的N 端变化(LAEP →MGIP )对酶学动力学常数的影响.构建了带有不同抗菌素抗性和启动子的高表达质粒,研究了它们表达的特点,分析了这些质粒的不同用途.用含有编码该酶两个亚基的基因的相容质粒共转化的方法.研究了它们在体内的重组和前体的加工.研究结果表明,该酶可能属于一类新的N 展开更多
关键词 大肠杆菌 trna^Leu 亮氨酰-trna合成酶 相互作用 头孢菌素酰化酶 亚基重组 基因表达 基因克隆
下载PDF
布氏锥虫亮氨酰-tRNA合成酶的克隆表达纯化及活性测定 被引量:3
4
作者 姚璎 杲光伟 李大伟 《中国生化药物杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期14-18,共5页
目的克隆布氏锥虫亮氨酸-tRNA合成酶基因,并进行表达纯化及活性测定。方法通过PCR方法从布氏锥虫细胞基因组中扩增出亮氨酰-tRNA合成酶(LeuRS)基因,依次克隆入pBS-T克隆载体及pET21a(+)表达载体,在大肠杆菌BL21(DE3)RIPL中通过条件优化... 目的克隆布氏锥虫亮氨酸-tRNA合成酶基因,并进行表达纯化及活性测定。方法通过PCR方法从布氏锥虫细胞基因组中扩增出亮氨酰-tRNA合成酶(LeuRS)基因,依次克隆入pBS-T克隆载体及pET21a(+)表达载体,在大肠杆菌BL21(DE3)RIPL中通过条件优化后表达。表达产物用His-Bind亲和色谱纯化,并用免疫印迹进行鉴定。采用放射性同位素方法进行酶活性测定。结果PCR扩增得到3.2 kb的DNA片段,重组质粒pET21a(+)/LeuRS经酶切鉴定和测序分析,表明构建正确。表达的重组蛋白占菌体可溶性蛋白的20%,纯化后蛋白纯度达85%,免疫印迹进行鉴定蛋白正确,酶活性测定计算出提纯物酶活性约为72 U/mL。结论已成功克隆表达纯化出布氏锥虫亮氨酸-tRNA合成酶,并用放射性同位素方法进行了酶活性测定,这为下一步进行布氏锥虫亮氨酰-tRNA合成酶抑制物的设计和体外筛选奠定了良好的基础。 展开更多
关键词 布氏锥虫 亮氨酰-trna合成酶 原核表达 纯化 酶活测定
下载PDF
基于亮氨酰-tRNA合成酶的药物研究进展
5
作者 何锐 刘家族 +3 位作者 洪庆霞 赵一同 吴成军 孙铁民 《中南药学》 CAS 2020年第8期1290-1298,共9页
氨酰-tRNA合成酶,也称氨基酸活化酶或氨酰-tRNA连接酶,是生物有机体中一类重要的酶。在蛋白质生物合成过程中,它们能够催化与其相应的tRNA之间的氨酰化反应,确保从mRNA 到蛋白质翻译过程中的高度专一性和准确性。而亮氨酰-tRNA合成酶作... 氨酰-tRNA合成酶,也称氨基酸活化酶或氨酰-tRNA连接酶,是生物有机体中一类重要的酶。在蛋白质生物合成过程中,它们能够催化与其相应的tRNA之间的氨酰化反应,确保从mRNA 到蛋白质翻译过程中的高度专一性和准确性。而亮氨酰-tRNA合成酶作为其中的一员,由于具有独特的合成和编辑位点,因此以其为潜在靶点的药物研究受到了众多科研人员的青睐,本文主要综述了以亮氨酰-tRNA合成酶为靶点的药物研究进展和治疗前景。 展开更多
关键词 亮氨酰-trna合成酶 抗菌 抗肿瘤
下载PDF
T超嗜热菌Aquifex aeolicus亮氨酰-tRNA合成酶和tRNA^(Leu)的相互作用(英文)
6
作者 赵明炜 王恩多 《中国科学院研究生院学报》 CAS CSCD 2007年第1期131-136,共6页
超嗜热菌Aquifexaeolicus亮氨酰-tRNA合成酶(αβ-LeuRS)是已知的唯一的双肽链LeuRS.通过αβ-LeuRS和大肠杆菌LeuRS相应肽段的重组和重组酶性质的研究发现,αβ-LeuRS的α亚基C末端36个氨基酸对于αβ-LeuRS的氨基酰化活力至关重要.α... 超嗜热菌Aquifexaeolicus亮氨酰-tRNA合成酶(αβ-LeuRS)是已知的唯一的双肽链LeuRS.通过αβ-LeuRS和大肠杆菌LeuRS相应肽段的重组和重组酶性质的研究发现,αβ-LeuRS的α亚基C末端36个氨基酸对于αβ-LeuRS的氨基酰化活力至关重要.αβ-LeuRS的两个亚基人为融合得到的单亚基酶SLeuRS-αβ,具有完全的野生型双亚基酶活力,其热稳定性显著增强.同时,通过亚基重组揭示了LeuRS对于不同种属的tRNALeu的识别元件位于α亚基内,而其中的CP1结构域不仅是LeuRS行使编校功能的结构基础,对于LeuRS识别不同种属来源的tRNALeu也是十分重要的.通过不同来源的LeuRS一级结构比较,克隆了单独的CP1结构域组成的肽(CP1),发现唯有A.aeolicusαβ-LeuRS的CP1对错误的氨基酰化产物具有体外编校功能.它与其他3种来源于细菌LeuRS的CP1都能够编校误氨基酰化的古老形式的亮氨酸小螺旋(minihelixLeu).通过同源序列比较发现,在αβ-LeuRS的CP1内存在一个由20个氨基酸组成的特异的结构模体,它对CP1发挥体外编校功能必不可少,引入原本不具有体外编校功能的E.coli的CP1后则可使其获得编校功能,但是该模体不影响全酶的编校功能.αβ-LeuRS中与tRNA结合有关的亚基——β亚基也可以赋予E.coliCP1编校功能.这些研究结果充分表明,来源于古老的超嗜热菌A.aeolicus的αβ-LeuRS保留了进化的遗迹——具有编校活力的CP1和与其编校功能密切相关的由20个氨基酸组成的特异的结构模体,它们在进化过程中随着其他结构域招募进合成酶中而逐渐失去了对全酶编校功能的作用.这一发现有力地支持了aaRS通过纳入新的结构域以加速进化过程的理论,并且也从不同角度为aaRS/tRNA共进化理论提供了可靠的依据. 展开更多
关键词 亮氨酰-trna合成酶 trna^Leu 氨基酰化反应 编校反应 CP1结构域
下载PDF
大肠杆菌tRNA^(Leu)的提取、纯化及性质研究 被引量:2
7
作者 涂华民 孟建新 +3 位作者 杨燕生 李勇 刘文 王恩多 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1998年第6期697-703,共7页
采用高表达大肠杆菌tRNALeu菌株提取、纯化了亮氨酸等受体转移核糖核酸tRNALeu1和tRNALeu2.利用稳态动力学手段研究了tRNALeu1及脱镁tRNALeu1在不同稀土离子作用下与纯化亮氨酰-tRNA合成... 采用高表达大肠杆菌tRNALeu菌株提取、纯化了亮氨酸等受体转移核糖核酸tRNALeu1和tRNALeu2.利用稳态动力学手段研究了tRNALeu1及脱镁tRNALeu1在不同稀土离子作用下与纯化亮氨酰-tRNA合成酶的氨酰化作用.tRNALeu1与亮氨酰-tRNA合成酶的结合及催化效率均受参与稀土离子的影响,表观Km值有较明显的变化.结果表明,亮氨酰-tRNA合成酶催化的tRNALeu1氨酰化反应所需Mg2+能够被稀土离子取代,但亲合性能不同. 展开更多
关键词 氨酰化反应 稀土离子 trna aaRS 大肠杆菌
下载PDF
人线粒体tRNA^(Leu(UUR))基因A3243G点突变对其亮氨酰化活性的影响 被引量:3
8
作者 汪振诚 王学敏 +3 位作者 金由辛 缪明永 韩伟国 焦炳华 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期383-387,共5页
化学法合成人线粒体野生型与A3243G点突变型tRNA^(Leu(UUR))基因,体外转录生成相应的tRNA^(Leu(UUR)),表达并纯化人线粒体亮氨酰tRNA合成酶(mtLeuRS),用mtLeuRS催化野生型与突变型tRNA^(Leu(UUR))与亮氨酸结合,分别检测两种类型tRNA^(Le... 化学法合成人线粒体野生型与A3243G点突变型tRNA^(Leu(UUR))基因,体外转录生成相应的tRNA^(Leu(UUR)),表达并纯化人线粒体亮氨酰tRNA合成酶(mtLeuRS),用mtLeuRS催化野生型与突变型tRNA^(Leu(UUR))与亮氨酸结合,分别检测两种类型tRNA^(Leu(UUR))的氨酰化动力学常数。结果表明,野生型tRNA^(Leu(UUR))的K_m/K_(cat)仅为突变型tRNA^(Leu(UUR))的63.9%,A3243G点突变使tRNA^(Leu(UUR))接受亮氨酸的能力明显下降,提示此为A3243G点突变致病机制之一。 展开更多
关键词 人线粒体trna^Leu(UUR) 基因 点突变 氨酰化
下载PDF
人线粒体亮氨酰tRNA合成酶的表达、纯化及其动力学研究(英文)
9
作者 汪振诚 王学敏 +2 位作者 金由辛 缪明永 焦炳华 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第10期1081-1085,共5页
目的:构建含人线粒体亮氨酰tRNA合成酶(mtLeuRS)基因的重组表达载体,表达纯化mtLeuRS并检测其酶促动力学参数。方法:克隆mtLeuRS基因,构建入pET-24a(+)表达载体,转化大肠杆菌BL21-codonPlus(DE3)-RIL,经诱导产生带6-His标签的mtLeuRS融... 目的:构建含人线粒体亮氨酰tRNA合成酶(mtLeuRS)基因的重组表达载体,表达纯化mtLeuRS并检测其酶促动力学参数。方法:克隆mtLeuRS基因,构建入pET-24a(+)表达载体,转化大肠杆菌BL21-codonPlus(DE3)-RIL,经诱导产生带6-His标签的mtLeuRS融合蛋白,再经Ni2+亲和层析柱一步法纯化后用酶促反应检测其氨酰化活力。作为mtLeuRS酶促反应底物,人tRNALeu(UUR)由T7 RNA聚合酶体外转录生成。结果:经IPTG诱导,人mtLeuRS蛋白表达量约占细菌总蛋白量的1%~2%,1 L培养液的菌体内可收获约2 mg的纯化酶蛋白。通过体外转录生成的酶底物tRNALeu(UUR)可达转录模板的100倍。经酶促反应,人mtLeuRS可氨酰化人线粒体内tRNALeu(UUR)。反应的亲和常数(Km)为16.67μmol/L,催化常数(Kcat)为0.17s-1。结论:本实验成功克隆并表达了人mtLeuRS,并成功用于催化tRNALeu(UUR)的氨酰化。 展开更多
关键词 线粒体 亮氨酰trna合成酶 基因表达 动力学 纯化 酶促动力学参数
下载PDF
人线粒体tRNA^(Leu(UUR))基因氧化损伤与修复研究
10
作者 汪振诚 王学敏 +1 位作者 缪明永 焦炳华 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第10期887-894,共8页
人mtDNA比核DNA更易受到自由基的氧化损伤 ,这些损伤可以被线粒体内的DNA修复机制所修复 ,损伤与修复是决定突变是否产生的两个重要因素 .为了确定氧化损伤与损伤后修复对mtDNA突变的具体影响 ,采用四氧嘧啶处理LO2 细胞 ,这种试剂进入... 人mtDNA比核DNA更易受到自由基的氧化损伤 ,这些损伤可以被线粒体内的DNA修复机制所修复 ,损伤与修复是决定突变是否产生的两个重要因素 .为了确定氧化损伤与损伤后修复对mtDNA突变的具体影响 ,采用四氧嘧啶处理LO2 细胞 ,这种试剂进入细胞后 ,经氧化还原反应生成的自由基与线粒体自身代谢产生的自由基类似 ,然后观察自由基对细胞mtDNA的氧化损伤与损伤后DNA修复的动力学变化 .由于线粒体的正常功能为修复机制所必需 ,采用MTT细胞活力实验检测不同浓度四氧嘧啶处理下线粒体酶活力 ,发现 9mmol/L四氧嘧啶培养细胞 1h后 ,线粒体琥珀酸脱氢酶功能在撤去药物后 0 ,2 ,8和 2 4h时间点均无明显变化 .提取各组细胞的mtDNA ,用EndoⅢ和Fgp两种酶切除受氧化损伤的核苷酸 ,然后用碱性琼脂糖凝胶电泳分离大小不等的mtDNA ,进行DNA印迹实验 ,地高辛 抗体 碱性磷酸酶系统显色 ,检测完整与断裂的mtDNA量 ,利用Poisson公式 (s=-lnP0 /P ,P0 为未断裂链光密度值 ,P为所有链光密度值总和 )计算一个mtDNA分子的平均损伤频率 ,结果显示 ,9mmol/L四氧嘧啶处理细胞 1h ,链平均损伤频率由对照的 0 11个 /分子增加至 5 6 0个 /分子 ,明显增加了mtDNA上核苷酸的氧化损伤 ,除去药物后 8h ,绝大部分损伤可被修复 ,损伤频率减至 展开更多
关键词 线粒体DNA trna^LEU(UUR) 突变 人线粒体亮氨酰trna合成酶 A3243G 体外转录 基因表达
下载PDF
新型3-芳乙烯基喹喔啉-2-羧酸合成及结核杆菌亮氨酰-tRNA合成酶的抑制活性研究 被引量:2
11
作者 李阳 董时雨 +3 位作者 秦洪伟 唐冰月 高文涛 陈羽 《有机化学》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2020年第9期2817-2826,共10页
使用自制的3-溴甲基喹喔啉-2-甲酸乙酯为反应物,经一锅连续的Arbuzov反应/Horner-Wadsworth-Emmons(HWE)反应/酯基水解反应,简便有效地合成了一系列结构新型的3-芳乙烯基喹喔啉-2-羧酸类化合物,并对其进行了初步的结核杆菌亮氨酰-tRNA... 使用自制的3-溴甲基喹喔啉-2-甲酸乙酯为反应物,经一锅连续的Arbuzov反应/Horner-Wadsworth-Emmons(HWE)反应/酯基水解反应,简便有效地合成了一系列结构新型的3-芳乙烯基喹喔啉-2-羧酸类化合物,并对其进行了初步的结核杆菌亮氨酰-tRNA合成酶(MtbLeu RS)抑制活性实验.结果表明(E)-3-(3-硝基苯乙烯基)喹喔啉-2-羧酸(5j)的抑制活性最好,其IC50值为14.7μmol·L-1,高于参考药物AN2679,具有很好的MtbLeu RS抑制剂开发潜力.利用Discovery Studio分子模拟软件CDOCKER程序进行分子模拟分析,结果表明该化合物能够与Mtb LeuRS的活性点很好的结合.而且,体外抗耻垢分枝杆菌Mycobacterium smegmatis(M.smegmatis)活性实验也发现,化合物5j的抗结核杆菌的活性最佳,其最小抑菌浓度(MIC)为15.6μg/m L与参考药物rifampicin相当. 展开更多
关键词 喹喔啉 溴化反应 三步一锅法 结核杆菌 亮氨酰-trna合成酶
原文传递
亮氨酰-tRNA合成酶在调控衰老骨骼肌蛋白质合成中的作用与机制 被引量:1
12
作者 夏志 尚画雨 +2 位作者 王前进 赵艳 丁孝民 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期523-531,共9页
蛋白质代谢平衡紊乱是诱发骨骼肌萎缩的根本原因,蛋白质合成减少则直接导致衰老性骨骼肌萎缩的发生与发展。亮氨酰-tRNA合成酶(leucyl-tRNA synthetase, LeuRS)的经典功能是催化亮氨酸与其同工tRNA之间连接形成氨基酰,在生物体内遗传解... 蛋白质代谢平衡紊乱是诱发骨骼肌萎缩的根本原因,蛋白质合成减少则直接导致衰老性骨骼肌萎缩的发生与发展。亮氨酰-tRNA合成酶(leucyl-tRNA synthetase, LeuRS)的经典功能是催化亮氨酸与其同工tRNA之间连接形成氨基酰,在生物体内遗传解码过程中具有重要作用。随着近年对LeuRS蛋白研究的深入,人们认为其可能通过行使非经典功能而在衰老骨骼肌蛋白质代谢稳态调节中发挥关键作用。本文综述了氨基酰-tRNA合成酶和LeuRS的结构与生物学特性,并重点对LeuRS作为细胞内亮氨酸传感器调控衰老骨骼肌细胞蛋白质合成的研究进展进行总结,分析了LeuRS响应运动与氨基酸摄入等合成代谢刺激,活化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物1 (mammalian target of rapamycin complex 1, mTORC1)信号转导通路的作用机制,以期为衰老性骨骼肌萎缩的预防和诊治提供新的思路。 展开更多
关键词 亮氨酰-trna合成酶 衰老 骨骼肌蛋白质合成 衰老性骨骼肌萎缩 雷帕霉素靶蛋白复合物1
原文传递
敲低亮氨酰-tRNA合成酶抑制人胶质瘤细胞U251增殖和迁移的体外研究 被引量:1
13
作者 谭富强 张安玲 +6 位作者 南阳 王乐 叶敏华 王广秀 贾志凡 康春生 钟跃 《中华神经外科杂志》 CSCD 北大核心 2014年第4期409-413,共5页
目的探究敲低亮氨酰-tRNA合成酶(LARS)表达对U251细胞增殖和迁移能力的影响。方法采用脂质体转染LARS小干扰RNA(LARSsiRNA)于U251。PCR、Westernblot检测LARS表达;MTr法、平板克隆检测细胞增殖能力、流式细胞术检测细胞周期及Trans... 目的探究敲低亮氨酰-tRNA合成酶(LARS)表达对U251细胞增殖和迁移能力的影响。方法采用脂质体转染LARS小干扰RNA(LARSsiRNA)于U251。PCR、Westernblot检测LARS表达;MTr法、平板克隆检测细胞增殖能力、流式细胞术检测细胞周期及Transwell法检测细胞迁移能力。结果较对照组和无义序列组,转染LARSsiRNA后LARSmRNA和蛋白水平明显降低,自转染48h后细胞增殖率明显下降(P〈0.05),且克隆形成率分别较对照组和无义序列组降低了51.69%和50.45%,G0/G1期比例分别增高了38.34%和31.93%,穿膜细胞数分别减少了81.78%和81.45%,差异均有统计学意义(P〈0.05)。结论敲低LARS表达可明显抑制U251生长增殖和迁移能力。LARS基因有望成为人脑胶质瘤基因治疗的侯选靶点。 展开更多
关键词 亮氨酰-trna合成酶 神经胶质瘤 细胞增殖 细胞迁移 小干扰RNA
原文传递
亮氨酰-tRNA合成酶通过细胞内的亮氨酸调节雷帕霉素受体复合物(TORC1)活性的新功能 被引量:1
14
作者 谭敏 王恩多 《生命科学》 CSCD 2012年第6期511-517,共7页
TORC1(target of rapamycin complex 1)可整合营养、能量、生长因子及氨基酸等多种细胞外信号,调控基因转录、蛋白质翻译、核糖体合成等生物过程,在细胞生长和凋亡中发挥极为重要的作用。亮氨酰-tRNA合成酶(LeuRS)的经典功能是催化合成... TORC1(target of rapamycin complex 1)可整合营养、能量、生长因子及氨基酸等多种细胞外信号,调控基因转录、蛋白质翻译、核糖体合成等生物过程,在细胞生长和凋亡中发挥极为重要的作用。亮氨酰-tRNA合成酶(LeuRS)的经典功能是催化合成亮氨酰-tRNA直接参与遗传信息的解码合成蛋白质。最新研究结果表明人细胞质LeuRS除了经典功能外,还参与调控TORC1途径。综述了LeuRS的非经典功能,它是如何通过感受细胞内的亮氨酸浓度来调节TORC1活性的。这些结果表明了古老的氨基酰-tRNA合成酶家族在进化的过程中被赋予了新的功能。 展开更多
关键词 亮氨酰-trna合成酶 非经典功能 雷帕霉素受体复合物1(TORC1) 亮氨酸
原文传递
草分枝杆菌亮氨酰-tRNA合成酶的克隆与表达
15
作者 仉蕊 陈羽 +1 位作者 刘华松 徐威 《中国医药工业杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期1374-1378,共5页
采用PCR技术从草分枝杆菌(Mycobacterium phlei)基因组中扩增出亮氨酰-t RNA合成酶基因leu RS,依次克隆入p MD19-T Simple克隆载体及p ET28a(+)表达载体,并在大肠埃希菌(Escherichia coli)BL21(DE3)中表达。表达产物用Ni^(2+)螯合的His ... 采用PCR技术从草分枝杆菌(Mycobacterium phlei)基因组中扩增出亮氨酰-t RNA合成酶基因leu RS,依次克隆入p MD19-T Simple克隆载体及p ET28a(+)表达载体,并在大肠埃希菌(Escherichia coli)BL21(DE3)中表达。表达产物用Ni^(2+)螯合的His Trap^(TM) HP亲和色谱纯化,测定纯化所得目的蛋白的酶活力。结果显示,经PCR扩增得到2.8 kb的DNA片段,重组质粒p ET28a(+)-leu RS经酶切鉴定和测序分析,表明构建正确。SDS-PAGE显示,有与目的蛋白大小相当(相对分子质量约1.10×10~5)的蛋白质表达,表达的重组蛋白占菌体可溶性蛋白的32.8%,纯化后的蛋白质纯度达93.8%,酶活力为13.2 u/ml。 展开更多
关键词 亮氨酰-trna合成酶 草分枝杆菌 表达 纯化
原文传递
亮氨酰-tRNA合成酶在人类疾病治疗中的应用
16
作者 龙韬 刘如娟 王恩多 《生命科学》 CSCD 2017年第6期527-533,共7页
氨基酰-tRNA合成酶是蛋白质合成过程中的关键酶,广泛参与细胞信号转导、免疫、发育以及疾病等复杂的生理过程。而亮氨酰-tRNA合成酶作为其中的一员,由于对其经典和非经典功能的研究比较透彻,因而受到了药物研发人员的青睐。现综述了亮氨... 氨基酰-tRNA合成酶是蛋白质合成过程中的关键酶,广泛参与细胞信号转导、免疫、发育以及疾病等复杂的生理过程。而亮氨酰-tRNA合成酶作为其中的一员,由于对其经典和非经典功能的研究比较透彻,因而受到了药物研发人员的青睐。现综述了亮氨酰-tRNA合成酶应用于抗病原菌感染和抗肿瘤等方面的研究进展和治疗前景。 展开更多
关键词 亮氨酰-trna合成酶 抗生素 抗肿瘤
原文传递
上一页 1 下一页 到第
使用帮助 返回顶部