钝顶螺旋藻多糖对白血病患者外周血LAK细胞活性的影响

目的：了解钝顶螺旋藻多糖（SPP）对正常人和白血病患者LAK细胞活性作用，探讨螺旋藻作用机理。方法：以Raji细胞（人B细胞白血病细胞株）为靶细胞，用3H－TdR渗入法检测LAK细胞活性。结果：白血病病人LAK细胞活性降低；SPP可增强正常人和病人LAK细胞活性，且对正常人LAK细胞活性增强作用大于病人。结论：SPP可刺激LAK细胞活性，减少rIL-2用量。

急性白血病患者外周血LAK活性的诱导

本文对急性白血病患者外周血LAK活性进行了研究。大多数患者外周血可诱导出LAK活性,但较正常人为低。外周血幼稚细胞比例较高和近期接受化疗的患者LAK活性明显减低。急性淋巴细胞性白血病和急性非淋巴细胞性白血病患者之LAK活性无明显区别。

急性白血病LAK细胞的诱导与长期培养后其杀伤活性的动态观察

将急性白血病(AL)患者外周血单个核细胞(PBMNC)在1000 U/ml IL-2的条件下培养,结果显示:正常人LAK细胞一般在IL-2诱导后3 d即具有显著杀伤活性,并以3～5 d之间LAK细胞活性最强;而AL患者的LAK细胞,第5天表现出LAK细胞活性,第15天达到高峰,其高峰较正常人明显延迟。LAK细胞免疫表型分析显示,经IL-2培养后,CD_8^+,CD_(16)^+亚群细胞以第5天开始升高,第3周达到高峰;而CD_4^+亚群则从第5天开始降低,第3周最低。表明LAK细胞杀伤活性与CD_8^+亚群、CD_(16)^+亚群的比例呈正相关,而与CD_4^+亚群比例呈负相关。

小儿白血病NK、LAK细胞活性的研究

本文对22例正常人及21例白血病患儿NK、LAK细胞活性检测结果表明,缓解期白血病患儿NK、LAK细胞活性正常,活动期白血病患儿NK、LAK细胞活性低下,分别为10.4%±9.7%(正常值28%±13.4%)P<0.01,对K562为34.3%±14.4%(正常值52.8%±15.3%)P<0.001,对Raji为32.6%±14.7%(正常值52.8%±14.3%)P<0.01。NK细胞活性低下的原因与血液中存在的抑制淋巴细胞无关,可能系NK细胞本身缺陷所致,rIL—2能恢复活动期白血病NK细胞活性。

自体LAK细胞治疗血液病肿瘤的临床观察

应用自体 LAK 细胞治疗14例白血病及血液病肿瘤,其中3例 M_3中2例 CR,1例延长了化疗间歇期,3例 MM 中1例 PR、2例无效,1例慢粒急淋变者 CR,2例淋巴瘤,3例慢粒,淋一粒混合型及 ALL 各1例均未奏效。输注安全,无明显严重副作用。

人外周血LAK细胞培养上清对粒单系及红系祖细胞体外增殖的影响

43刨人外周血LAK细胞对急性白血病细咆有较强的杀伤活性。其培养上清分別对11例正常人骨髓粒单系、红系祖细胞无抑制作用,甚至在适宜浓度(20％)下促进其体外增殖。提示LAK细胞输注对白血病病人的正常造血细胞无损伤。本实验结果为LAK细胞疗法治疗急性白血病提供了新的依据。

LAK细胞的抗白血病效应及其影响因素的研究

本实验研究了LAK细胞/IL—2过继输入对L_(615)白血病的治疗作用并用细胞毒试验研究了影响LAK细胞/IL—2临床治疗急性白血病的若干因素。实验结果表明,LAK细胞对急性白血病有治疗作用;急性白血病病人外周血单个核细胞诱生的LAK细胞活性极低,其血清对LAK细胞活性有抑制作用;用同种异体的正常人外周血单个核细胞或胎儿脾脏单个核细胞、胸腺细胞诱生的LAK细胞对急性白血病细胞有较强的杀伤活性,是临床治疗急性白血病的可靠的LAK细胞来源。

615系小鼠脾LAK细胞及LAK一88/DC细胞系抗癌作用的实验研究

本实验研究了转输615系小鼠脾LAK细胞和LAK—88/DC细胞系对615小鼠白血病(L615)的免疫防治效应,以及继承性化学免疫治疗作用。实验结果表明,攻击前二十一天转输LAK细胞或LAK—88/DC细胞系,并每日腹腔注射培养上清液一周,可以诱导正常受鼠产生对L615明显的免疫预防效应,分别使实验组80%的小鼠长期存活;单独注射培养上清液也有效,可使60%的小鼠长期存活。在攻击后五天,用环磷酰胺(CY:180mg/kg)进行化疗并转输LAK细胞或LAK—88/DC细胞系,则能延长晚期L615病鼠的平均存活时间,并可使实验组25%～28.6%的小鼠长期存活。

IL-2和PHA诱导扩增的LAK细胞对骨髓白血病细胞的净化作用

本文研究了白介素2(IL-2)和PHA诱导的LAK细胞对混杂于骨髓细胞中的U937、HL60和K562细胞的作用。将正常骨髓单个核细胞与白血病细胞按10:1比例混合,加入一定比例LAK细胞后孵育4、12小时,然后做白血病集落培养。结果显示,当LAK细胞:骨髓单个核细胞:白血病细胞为20:10:1,预孵育12小时,U937、HL60和K562集落生成分别为对照组之1.21％±2.10％,1.56％±1.65％和0.26％±0.19％。而相同条件下,骨髓CFU—c生长为对照组之87.0％±17.1％。表明在上述条件下,LAK细胞对骨髓中白血病细胞具有选择性杀伤/抑制效应。

粘附性淋巴因子活化的杀伤细胞抗自体白血病细胞作用的研究

建立了一套培养和处理粘附ＬＡＫ细胞（Ａ－ＬＡＫ）的系统，将１２例缓解期急性髓系白血病（ＡＭＬ）患者（ＲＰＳ）的Ａ－ＬＡＫ细胞与常规制备ＬＡＫ细胞（ＲＴ－ＬＡＫ）进行了对照研究，结果显示ＲＰＳ－Ａ－ＬＡＫ细胞于培养第１０天时其扩增指数（２０．１±１３．９）较ＲＴ－ＬＡＫ细胞的扩增指数（７．５±２．１）明显提高（Ｐ＜０．０５）。形态学研究显示Ａ－ＬＡＫ细胞主要由大颗粒淋巴细胞组成，免疫表型分析显示其主要由ＣＤ１６＋的ＮＫ细胞组成，ＲＴ－ＬＡＫ细胞主要由ＣＤ３＋的Ｔ细胞组成。其杀伤活性与ＣＤ１６＋ＮＫ细胞之间有很好的相关性（ｒ＝０．８２，Ｐ＜０．０５）。这提示ＣＤ１６＋ＮＫ细胞是Ａ－ＬＡＫ细胞的主要组成细胞，代表了杀伤功能最强的亚群。

肿瘤继承性细胞免疫治疗及其机制的实验研究

用615系小鼠及其同基因型L615白血病为模型,比较系统地研究了(1)转输不同遗传背景供鼠正常脾细胞的继承性免疫预防(AIP)效应和规律;(2)正常及免疫脾细胞的继承性免疫治疗(AIP)和继承性化学-免疫治疗(ACIT)效应,并分析了体外非特异性激活的、体内L615瘤苗特异性主动免疫和体外再致敏的脾细胞的抗瘤效应与机制,这些研究为临床开展肿瘤的继承性细胞免疫治疗提供了新的实验依据。

自体LAK细胞对白血病细胞清除作用的实验研究

采用￣（５１）Ｃｒ４小时释放试验，细胞培养及组化分析技术，研究了２６例初诊急性髓细胞白血病患者（ＡＰｓ）和其中的１２例缓解期患者（ＲＰｓ）的ＬＡＫ细胞对自体白血病细胞（Ａｕｔｏ－ＬＢ）的清除作用。ＡＰｓ的外周血或骨髓通过双层Ｆｉｃｏｌｌ－Ｈｙｐａｑｕｅ分离所得富含淋巴细胞层中含２０％～５０％的Ａｕｔｏ－ＬＢ，在ｒＩＬ－２１０００Ｕ／ｍｌ的培养基中培养１～２周Ａｕｔｏ－ＬＢ消失。而￣（５１）Ｃｒ４小时释放试验的结果是ＡＰｓ－ＬＡＫ和ＲＰｓ－ＬＡＫ细胞胞对Ａｕｔｏ－ＬＢ的杀伤活性分别为１２．９％±１２．３％和２４．１％±１２．０％，均较其对Ｒａｊｉ细胞的杀伤活性（３６．０％±３２．０％和６６．２％±１８．１％）显著减低（Ｐ＜０．０１），提示：Ａｕｔｏ－ＬＢ细胞表面能被ＬＡＫ细胞识别的决定簇较Ｒａｊｉ细胞系低。但体外培养过程中Ａｕｔｏ－ＬＢ能被清除。提示：清除机制除了有ＬＡＫ细胞的直接杀伤外，尚有其它机制参与，体外培养过程中Ａｕｔｏ－ＬＢ表面决定簇表达增加。

肿瘤坏死因子对急性白血病LAK细胞抗肿瘤活性的增强作用

采用基因重组肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）与白细胞介素２（ＩＬ－２）联合诱导急性白血病患者外周血单个核细胞，结果表明：ＴＮＦ（５００Ｕ／ｍｌ）单独不能诱导出ＬＡＫ细胞活性，也不能进一步提高最适剂量ＩＬ－２（１０００Ｕ／ｍｌ）诱导的ＬＡＫ细胞活性，但能显著增强亚适剂量ＩＬ－２（１０～１００Ｕ／ｍｌ）诱导的ＬＡＫ细胞活性。抗ＴＮＦ单抗和抗ＩＬ－２受体β链（Ｐ＿（７５））单抗能显著抑制ＴＮＦ／ＩＬ－２对ＬＡＫ细胞活性的协同诱导作用。ＴＮＦ与ＬＡＫ细胞联合可显著增强对白血病细胞的杀伤活性。