淋巴细胞白血病细胞分化与基因重排研究

采用McAbs免疫酶和PCR技术研究35例淋巴细胞白血病细胞分化起源及IgH和TCR_(γ、δ)基因重排。结果表明:20例表达B细胞表面标记的病例中,15例B-ALL分别起源于B祖、前前B、前B和成熟B细胞,5例B-CLL均起源于成熟B细胞;17例检测到IgH基因重排,8例伴TCR_γ基因重排,2例伴TCR_δ基因缺失。8例T-ALL分别起源于幼稚、普通和成熟胸腺细胞,均检测到TCR_γ基因重排和/或TCR_δ基因重排/缺失。3例T、B-双标记ALL同时发生IgH和TCR_γ基因双重重排。4例AUL中3例发生TCR_γ基因重排。并讨论了细胞分化与基因重排间的相关性及临床意义。

实时定量聚合酶链反应检测微小残留白血病的临床研究

目的 探讨并研究实时定量聚合酶链反应(RQ—PCR)技术定量检测小儿急性淋巴细胞白血病(ALL)微小残留病(MRD)的临床适用性和临床价值。方法 以免疫球蛋白重链(IgH)基因重排作为ALL的肿瘤标志,应用RQ—PCR、胚系探针策略,定量检测了34例B细胞ALL(B—ALL)患儿的MRD,并对其中的16例患儿进行了缓解期MRD的定量动态追踪观察。结果在34例B—ALL患儿的初治标本中IgH基因单克隆重排16例,对16例单克隆IgH重排靶基因进行序列分析发现,V片段使用最频繁的是V3家族,J片段使用最频繁的是J4和J6。在16个靶基因中,RQ—PCR的检测敏感度有9例为10-4,6例为10-5,1例为10-3,非特异性扩增见于6例患儿。16例初治患儿的标准曲线相关系数均为0.99以上,斜率均值为-3.34±0.37,截距均值为24.30±2.95。对16例患儿随访期样本的MRD动态追踪研究发现,复发患儿的MRD水平较高且复发前有动态增加。诱导化疗结束时的MRD水平与ALL高危因素无明显相关性(P>0.05)。结论 研究表明,RQ—PCR技术胚系探针策略检测ALL患儿的MRD具有临床适用性,随访期标本MRD的定量检测及动态追踪监测具有临床价值。

小儿急性白血病免疫球蛋白重链基因和T细胞受体δ基因分析

为了进一步探讨小儿急性白血病（ＡＬ）的基因诊断方法，作者应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术，结合ＤＮＡ印迹和ＤＮＡ序列分析对小儿ＡＬ初诊的骨髓标本进行免疫球蛋白重链（ＩｇＨ）基因、Ｔ细胞受体δ（ＴＣＲδ）基因重排和Ｔ细胞ＡＬ－ｌ（Ｔａｌ－ｌ）基因丢失的分析。（１）１０２例ＡＬ患儿ＩｇＨ基因重排的ＰＣＲ结果为３７例出现单一条带，１３例出现双条带，在Ｂ细胞系急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）中的阳性率为７５．５％（３７／４９），有系列特异性。６例ＩｇＨ基因重排ＰＣＲ产物序列分析结果为：同源性小，Ｊ基因参与重排有偏向性。（２）７８例ＡＬＬ的Ｖδ２－Ｄδ３基因重排ＰＣＲ分析结果为：３０例出现单一条带，６例出现双条带，多见于Ｂ细胞系ＡＬＬ及相关ＨＡＬ，１例ＰＣＲ产物序列分析Ｖδ２－Ｄδ２－Ｎ－Ｄδ３基因重排。（３）７０例Ｔａｌ基因丢失分析为：３例阳性，并且均为胸腺Ｉ期Ｔ－ＡＬＬ。（４）对３例患儿ＩｇＨ基因重排ＰＣＲ动态观察，结果２例分别在完全缓解（ＣＲ）１５个月和ＣＲ２０个月时转阴，另１例出现克隆变异。说明对这些基因的ＰＣＲ分析有助于白血病克隆性的诊断和基因分型，ＰＣＲ产物序列分析可为进一步制备克隆特异性探针提供序列信息，Ｉｇ?