特异结合唾液酸化LewisX抗原DNA适配子抑制肝癌细胞株HepG2体外侵袭转移

目的观察特异结合唾液酸化LewisX（SLeX）抗原DNA适配子抑制HepG2细胞与E一选择素黏附能力及其体外抑制HepG2细胞浸润转移能力。方法采用黏附实验、Transwell体外侵袭实验，检测该适配子对HepG2细胞与E选择素黏附及对HepG2细胞体外侵袭的影响。结果该DNA适配子可有效抑制HepG2细胞与E-选择素黏附，黏附细胞数随适配子浓度的增加而减少（P〈0．01），20nmol浓度的适配子与单克隆抗体CSLEX-1效果相似；Transwell侵袭实验中，5、10、20nmo]适配子组的侵袭细胞数分别为159．00±3．27、142．00±5．50、115．00±5．07，与对照组（178．00±4．64）比较，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论特异结合唾液酸化LewisX抗原DNA适配子町以抑制HepG2细胞与E-选择素黏附，阻断Lewis-selectin途径，抑制HepG2细胞体外侵袭转移。

乳腺癌Lewis X和唾液酸化Lewis X表达研究

目的:研究Lewis X(LeX)和唾液酸化 Lewis X(sLeX)在乳腺癌组织中表达状况及其与肿瘤发生、分化、转移及预后的关系。方法:应用催化信号放大法(CSA)检测120例乳腺癌、71例转移淋巴结和30例远离癌组织的正常乳腺组织上皮细胞LeX和sLeX的表达状况。结果:LeX和sLeX阳性物质在远离癌组织的正常乳腺组织上皮细胞中阳性率分别为 70 .0%(21 /30)和 20 .0%(6 /30),而在乳腺癌组织中阳性率分别为81. 7%(98 /120)和86. 7%(104 /120),转移淋巴结标本中阳性率分别为66 .2%(47 /71)和88. 7%(63 /71)。结论:癌细胞膜Lewis糖抗原异常糖基的形成及其唾液酸化,可能与肿瘤转移行为有关。sLeX可以作为预测乳腺癌侵袭、转移的肿瘤相关抗原,对评估患者预后较 LeX具有更重要的临床意义。

RNA干扰沉默α1,3岩藻糖转移酶-Ⅶ基因对人肝癌细胞增殖的影响

目的研究RNA干扰沉默α1,3岩藻糖转移酶-Ⅶ(α1,3FucT-Ⅶ)基因对人肝癌细胞增殖的影响。方法设计合成α1,3FucT-Ⅶ特异性RNA干扰质粒,并用脂质体转染导入人肝癌H7721细胞。RT-PCR检测细胞中α1,3FucT-ⅦmRNA的表达。流式细胞术测定细胞表面唾液酸化的LewisX抗原(SLex)的表达及细胞周期。细胞生长曲线通过MTT测定。p27Kip1的表达检测采用Westernblot。结果成功构建了α1,3FucT-Ⅶ特异的shRNA真核表达质粒载体。RNA干扰下调α1,3FucT-Ⅶ表达能抑制H7721细胞生长,表现为细胞生长速度明显较对照组细胞慢,S期细胞百分数明显降低,p27Kip1的表达增加。结论α1,3FucT-Ⅶ可能通过调节p27Kip1的降解影响H7721细胞增殖。

SiRNA沉默FUT6基因对HepG2细胞侵袭和迁移能力的影响

目的:通过siRNA干扰技术研究FUT6基因沉默对Hep G2细胞侵袭和迁移能力的影响。方法:靶向FUT6的siRNA转染肝癌细胞株Hep G2后,通过western blot检测FUT6蛋白的表达,通过流式细胞术检测肝癌细胞表面抗原唾液酸路易斯糖(Sialyl Lewis X,s Le X)表达情况。Transwell小室方法进行细胞迁移和侵袭实验检测肝癌细胞株Hep G2转移和侵袭能力的变化。结果:实验分为3组,分别命名为control(空白对照组),mock(阴性对照scrambled-siRNA)和siRNA-FUT6(实验组)。实验组FUT6蛋白及s Le X抗原较空白对照组明显降低,实验组细胞的迁移能力及侵袭能力下降。结论:siRNA靶向沉默FUT6减少了FUT6蛋白的表达,减少了肿瘤相关抗原s Le X的表达,削弱Hep G2细胞在体外的迁移和侵袭能力,FUT6可能成为肝癌基因治疗的新靶点。