LHCGR基因突变致Leydig细胞发育不全患者的临床特点及遗传分析

社会性别为女性,以原发性闭经伴性征异常的46,XY性发育异常(DSD)患者,可涉及多种病因,包括单纯性性腺发育不全、雄激素生物合成途径中不同酶的缺陷或雄激素作用缺陷(雄激素不敏感综合征)等。本文报道了1例“四不像”46,XY DSD病例,结合临床推理和基因检测,最终将其归类为特异诊断——睾丸间质细胞(Leydig细胞)发育不全,是由黄体生成素/绒毛膜促性腺激素受体(LHCGR)基因突变,导致Leydig细胞发育不全而不能分泌足够雄激素的罕见病变。在了解其发病机制的基础上,就不难理解其类女性外观而无子宫,雄激素低而黄体生成素和抗苗勒管激素明显升高的特点。在与常见DSD疾病模板比对并发现“不同点”的基础上,基因检测有助于我们找到特异的病变基因,进而明确诊断,拓展疾病谱和提升鉴别诊断能力。

LHCGR新变异致Leydig细胞发育不全患儿的基因诊断

目的:分析1例Leydig细胞发育不全患儿的临床特征和LHCGR基因变异,明确其遗传学病因,为家系的遗传咨询和产前诊断提供依据。方法:应用全外显子测序技术检测患儿的致病基因,应用PCR结合Sanger测序的方法进行家系验证和产前诊断。结果:测序结果显示患儿的LHCGR基因存在c.265A>T(p.Ile189Leu)和c.422T>C(p.Val141Ala)复合杂合变异,其父亲携带c.265A>T(p.Ile189Leu)杂合变异,母亲携带c.422T>C(p.Val141Ala)杂合变异,患儿的2个变异分别来源于父亲和母亲。产前诊断结果显示胎儿为LHCGR基因c.265A>T(p.Ile189Leu)杂合变异携带者。结论:LHCGR基因c.265A>T(p.Ile189Leu)和c.422T>C(p.Val141Ala)变异可能为患者的致病原因。

新的LH受体突变致Leydig细胞发育不全的家系研究

目的本研究通过对一中国人的Leydig细胞发育不全（LCH）家系的临床诊断及基因检测，探讨其病理生理特点。方法总结分析临床资料，通过激素测定以及青春期前后人绒毛膜促性腺激素（hCG）兴奋试验确认其临床诊断；并用PCR产物直接测序的方法检测患者及其家系成员的LH／hCG受体（LHCGR）基因。结果表现为男性假两性畸形的患者睾酮水平低下，且不能被hCG兴奋，青春期后出现LH水平的显著升高。DNA序列分析发现患者的LHCGR基因有两种新的突变，一等位基因含有第5号外显子T—C的杂合点突变，使受体胞外域的152位的异亮氨酸突变为苏氨酸；另一等位基因存在第6号内含子3’端的剪切位点C突变为A（IVS6—3C→A）。患者无临床表现的同胞妹妹（46，XX）具有和患者相同的基因型。结论患者LCH由LHCGR基因新的复合杂合突变所致。

45,X/46,XY混合性性腺发育不全患者采用卵母细胞捐赠获得活产1例及文献复习

目的:探讨45,X/46,XY混合性性腺发育不全的病因、诊断、治疗、受孕及分娩的临床特点,提高对此类患者的诊治及妊娠管理水平。方法:回顾性分析1例45,X/46,XY混合性性腺发育不全妊娠患者的临床资料并结合相关文献进行讨论。结果:通过患者第二性征发育不全、条索状性腺、染色体核型与社会性别不符等临床特征,结合性腺组织染色体畸变检测结果,确诊患者为45,X/46,XY混合性性腺发育不全,并给予“卵母细胞捐赠ICSI-ET治疗”获得活产。结合文献分析总结此类患者妊娠受孕、妊娠及分娩过程中的临床特点。结论:45,X/46,XY混合性性腺发育不全女性患者无生育能力,可通过卵母细胞捐赠获得妊娠,但此类孕妇的妊娠并发症的发病率以及异常分娩率均高于普通人群。明确诊断,加强妊娠风险评估,以改善围产结局。

睾丸Leydig细胞发育生物学研究进展

Leydig细胞是位于哺乳动物睾丸间质中的一种内分泌细胞,在促进胚胎期生殖器官的分化发育、男性第二性征的发育和维持、精子发生、激发性欲以及维持性功能和促进人体的新陈代谢等方面发挥重要作用。因此,针对Leydig细胞的起源、分化发育机制的研究已经成为当今国际男性生殖健康研究领域的前沿和热点。本文对该领域近年来的研究进展进行综述。

颅骨锁骨发育不全患者牙囊细胞的体外生物学特征

目的:在成功分离培养正常同龄人牙囊细胞(dental follicle cells,DFCs)与颅骨锁骨发育不全(cleidocranial dysplasia,CCD)患者牙囊细胞(DFCs-CCD)的基础上,研究其一般体外生物学特征,包括增殖、克隆、成骨及破骨能力。方法:采用Brd U细胞增殖实验与倍增法研究两种来源DFCs增殖能力;用结晶紫染液染色培养12 d的两种DFCs,分析其克隆形成能力;并用成骨诱导液诱导两种DFCs成骨,用Western blot和茜素红染色法分析成骨能力,用实时定量PCR方法研究其破骨基因表达差异。结果:DFCs-CCD的Brd U阳性率高于DFCs,同时DFCs的群体倍增时间为(1.834±0.093)d,而DFCs-CCD的则为(1.394±0.028)d,差异具有统计学意义(P<0.05);DFCs-CCD的克隆集落多于DFCs,但Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,Runx2)、成骨细胞特异性转录因子Osterix、骨钙素(osteocalcin,Ocn)等成骨相关蛋白表达水平低,而其茜素红染色所示钙化结节同样较少;同时,DFCs-CCD高表达核因子-κB受体活化因子(receptor activator for nuclear factor-κB,RANK)和骨保护素(osteoprotegerin,OPG)等破骨相关基因(P<0.05),而核因子-κB受体活化因子配体(receptor activator for nuclear factor-κB ligand,RANKL)水平无统计学差异(P>0.05)。结论:相比DFCs,DFCs-CCD具有更强的增殖、克隆能力和更弱的成骨能力,而破骨基因表达紊乱。

XY单纯性腺发育不全并发睾丸精原细胞瘤一例

患者３０岁，社会性别女，已婚。因发现盆腔包块３个月于１９９８年３月２０日入院。患者曾于１９９２年７月因原发性闭经在当地医院就诊。外周血检查染色体核形４６，ＸＹ，黄体生成素（ＬＨ）２５．２ＩＵ／Ｌ、卵泡刺激素（ＦＳＨ）４６．０ＩＵ／Ｌ、雌二醇（Ｅ２）０...

男性性腺发育不全患者外周血淋巴细胞永生细胞系的建立

目的 建立男性性腺发育不全患者外周血永生细胞系以保存性腺发育不全患者特有的基因组资源 ,为进一步探讨性腺发育不全的发生机理提供材料。方法 收集 4 0例男性性腺发育不全患者的外周血样品 ,采用EB病毒转化技术 ,把患者外周血B淋巴细胞转化成永生淋巴母细胞系 ;用遗传学方法检测其建系前后的遗传稳定性。结果 建系成功 4 0例 ,所有建成的细胞系冻存后复苏成功率 10 0 % ,核型和DNA分析表明建系前后遗传是稳定的。结论 性腺发育不全患者永生细胞系的建立 ,为进一步研究性腺发育不全导致的不育症分子水平发病机理提供随时可取的实验材料。

60例先天性卵巢发育不全综合征的临床及细胞遗传学研究

６０例先天性卵巢发育不全综合征的临床及细胞遗传学研究马明生，胡泊，范元兰，段玲，曾群英，邱淑芬先天性卵巢发育不全综合征是以索条状性腺、性器官幼稚、原发闭经、女性第二性征缺如、体矮等一系列躯体畸形为特征的综合征。其症状在１９３８年首次由Ｔｕｒｎｅｒ描述...

46xy单纯性腺发育不全并发多成分生殖细胞肿瘤1例

患者社会性别女,13岁,学生。于一月前无意中发现下腹部有一硬性块包,并逐渐增大。B超探及肿物呈实性,内有囊性区,疑为卵巢畸胎瘤。过去史无特殊,家族中无类似疾病患者。查体:女性外貌.营养中等,一般情况良好。双乳房未发育,无腋毛、阴毛。

85例先天智能发育不全的细胞遣传学研究

先天智能发育不全(mental retarda-tion,MR)是一种常见且发病率高,危害性大而又病因复杂的病征。为了人类的优生,深入研究及预防极有必要。对象与方法自1985年4月至1990年4月,我院收治的85例MR病例。男62例,女23例,男女之比为2.69:1,年龄1天到27岁,3岁以下者52例。

46,XY单纯性腺发育不全合并巨大卵巢无性细胞瘤诊治分析

目的:分析46,XY单纯性腺发育不全合并卵巢无性细胞瘤临床诊疗方法。方法:对我院收治的1例22岁因盆腔包块就诊的患者的临床资料及相关文献进行回顾性分析,对其诊断、治疗进行阐述。结果:该患者表现型为女性,染色体核型为46,XY,染色体微阵列检测结果显示4号染色体4p16.3区域有约1.08 Mb的重复,9号染色体9p24.3p3p24.1区域有约4.49 Mb的缺失,该缺失区域包含9p缺失综合征,该综合征患者主要表现为性反转,部分或全部性腺发育不良。患者左侧性腺恶变,病理结果为无性细胞瘤。结论:对于母亲有胎儿畸形史、染色体异常家族史,血清学异常、B超表现异常的胎儿,可选择染色体检查及基因检测。对于无青春期月经来潮患者,可通过妇科B超、性腺激素、染色体检查的手段排除染色体异常甚至性腺肿瘤。这类患者一经确诊,应尽早切除性腺。

天寿芝宝治疗脑发育不全的微循环和红细胞变形性观察

观察天寿芝宝治疗脑发育不全的疗效及甲襞微循环和红细胞变形性的临床意义。方法：观察４８例脑发育不全患者天寿芝宝治疗前后前后ＮＦＭ及ＲＣＤ的改变，与５０名下沉人对照，得出数据用卡方或μ检验处理。结果：总有效率７９．１７％，轻中重三型有效率分别为９６．０％、７３．３３％及３７．５％，临床１１项症状有９项明显改善。

颅骨锁骨发育不全患者骨髓基质细胞的增殖、成骨和衰老

目的:骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)在调节颅骨锁骨发育不全(cleidocranial dysplasia,CCD)患者骨结构中发挥关键作用,本研究通过与正常BMSCs比较分析,探讨CCD患者BMSCs的体外增殖、成骨分化、干性及衰老特征。方法:分离培养CCD患者及正常同龄人BMSCs;甲基噻唑基四唑(MTT)法及流式细胞周期分析其增殖能力;成骨诱导后采用Western blot及茜素红染色分析其成骨能力;检测多潜能转录因子及克隆形成,分析其干性能力;检测衰老调控关键基因p16、p21表达及通过β-gal衰老染色分析其衰老特征。结果:与正常BMSCs相比,BMSCs-CCD增殖活性低,且细胞周期中处于S期、G2的细胞比例较低;两组细胞成骨诱导1、3、7 d后,BMSCs-CCD组中Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor2,Runx2)、成骨细胞特异性转录因子Osterix、骨桥蛋白(Osteopontin,Opn)表达水平较正常组低;成骨诱导14 d后,BMSCs-CCD组形成的钙化结节较正常组少;BMSCs-CCD组中多潜能转录因子Oct4、Nanog、Sox2表达及克隆形成率均较正常组低;相反,BMSCs-CCD组中p16、p21等衰老标记分子表达及衰老细胞阳性染色比例均较正常组高。结论:同正常BMSCs比较,CCD患者BMSCs的增殖能力、成骨能力、干性强度均较差,且更易衰老。这些特征可能是CCD患者易发骨质疏松及骨折的生物学机制之一。

睾丸发育不全23例细胞遗传学研究

目的对睾丸发育不全２３例进行细胞遗传学分析。方法全部病例单侧或双侧睾丸容积≤８ｍｌ。按照血清促性腺激素水平分成两大临床类型，即高促性腺激素型（１７例）和低促性腺激素型（６例）。结果２３例睾九发育不全的染色体核型分布如下：克氏综合征１１例，核型为４７，ＸＸＹ者９例，为４６，ＸＹ／４７，ＸＸＹ嵌合型者２例；唯支持细胞综合征２例，核型为４６，ＸＹ；男性Ｔｕｒｎｅｒ氏综合征１例，核型为４５，ＸＯ／４６，ＸＹ；睾丸女性化综合征２例，核型为４６，ＸＹ；真两性畸形１例，核型为４６，ＸＸ／４６，ＸＹ。以上１７例属于高促性腺激素性性腺功能低下症。余下的６例（垂体性侏儒症３例，肥胖—生殖无能综合征２例；Ｋａｌｍａｎ氏综合征１例）属于低促性腺性性腺功能低下症，其染色体核型为４６，ＸＹ。结论对于睾丸发育不全的患者进行细胞遗传学检查是重要的。

170例小儿严重先天性智能发育不全的细胞遗传学研究

先天性智能发育不全（mentalretardation,MR）发病率高,是目前医学领域中病因复杂、严重危害人口素质的一种先天性智能低下,是人类优生学的重要研究课题,需急待深入探讨。 研究对象与方法 1983年1月至1987年9月,我院遗传室累积筛选170例临床表现明显的MR病例。做了细胞遗传学检查。其中男94例,女76例,男:女=1.24:1,年龄自出生到16岁,3岁以下115例,4～12岁52例,12岁以上8例。临床均作严格体检,询问病史和家族史,对后天性各种因素所致的脑功能障碍,如分娩损伤、外伤。

Y-常染色体易位、性腺发育不全和性母细胞瘤

Y-常染色体易位是一种罕见的染色体病,在1981年以前国内外仅有70余例/谱 系比较肯定的报告。可能由于相互易位时有关染色体断裂后遗传物质的数量丢失多少和质量是否改变的缘故,患者的表型可有各种变异,单就t（Y;15）而言,文献中所记述的20例/谱系即可有“正常”男性表型,具备生殖能力,甚至出现家族性易位,或“女性”表型,模糊为外生殖器、原发性闭经、丧失第二性征和生殖能力或多发性畸形等多种变异。

嗅鞘细胞联合神经干细胞移植治疗小儿脑发育不全

背景:近年来,干细胞替代治疗为神经再生提供了新的方法,但干细胞移植治疗小儿脑发育不全的相关报道甚少。目的:验证嗅鞘细胞联合神经干细胞移植治疗小儿脑发育不全的有效性。方法:2009-10解放军第163医院收治了1例脑发育不全的患者,给予物理降温、神经营养、维持水电解质平衡、高压氧治疗的同时,以L3～4腰椎间隙为穿刺点,将配置好的神经干细胞约8×107个和嗅鞘细胞约4×107个缓慢注入蛛网膜下腔,每2周1次,2次为1个疗程,共治疗1个疗程。从体温恢复程度、双手精细动作、运动协调性、语言等方面来评价移植治疗效果。结果与结论:与移植前比较,嗅鞘细胞联合神经干细胞移植1个月后患儿体温恢复正常,四肢肌力明显下降,2个月后可以独自端坐,3个月后可以扶梯行走,有简单的语言表达。提示嗅鞘细胞联合神经干细胞移植治疗小儿脑发育不全是有效的,能恢复其中枢神经功能。