几种简便的木质素降解真菌定性筛选方法

简要介绍几种在前人基础上作了较大改进的木质素降解真菌的定性筛选方法,列出了每种方法的具体步骤并作了讨论。

木质素降解真菌的筛选及产酶特性

通过定性、定量系列实验从土壤中筛选到 5株有木质素降解能力的低等真菌 ,经鉴定属于青霉属、镰刀霉属、曲霉属和木霉属 ,其中青霉属和镰刀霉属是土壤中木质素转化的主要作用者 .降解能力最强的简青霉Penicilliumsim plicissimumH5培养 13d可降解Kraft木质素 4 0 .2 6 % ,产酶研究发现 ,该菌分泌胞外木质素过氧化物酶和漆酶 ,其中前者主要在培养前期产生 ,后者在整个培养过程中均有较好的活性 .图 4表 1参

木质素降解菌的筛选及对秸秆的降解研究

为筛选木质素高效降解菌,对筛选的方法体系进行了研究。结果表明,利用三种定性筛选平板结合定量的木质素磺酸钙降解的方法,能明显提高筛选效率,从16个菌株中筛选到3株对木质素有较强降解能力的菌株Tp1、Tf1与Ls21。为进一步验证所筛菌株的降解效果,选取其中综合性能较好的Tf1菌株(凤尾菇,Pleurotus sajor-caju),对小麦秸秆与玉米秸秆进行固态发酵试验,并以黄孢原毛平革菌(Phanerochaete chrysosporium)BKMF-1767作参照,结果表明,Tf1对小麦秸秆与玉米秸秆木质素的降解率分别为38.4%与47.7%,均高于参照菌株(分别为32.2%和34.6%)。

云芝(Coriolus versicolor)高木质素降解活性菌株筛选的研究

从自然界中分离了32个云芝菌株，比较了它们在含愈创木酚的土豆培养基中的变色反应和对杨木粉的降解能力，表明不同的菌株对木材的降解能力和降解方式有很大的差异，但都有一定的选择性，从中筛选出了木质素降解能力较强（30天内，40％左右klason木素），选择性较高的菌株。和Phanerochaetechrysosporium相比，它们的木质素降解率提高近一倍，而综纤维素降解率则有不同程度的减少。

降解造纸废水木质素菌种的筛选鉴定及应用

为了提高造纸废水生化处理效果,进行了降解造纸废水木质素菌种的筛选鉴定和应用实验.对从市政污水处理厂采集的活性污泥样品进行培养、驯化、分离和鉴定等一系列实验,得到了能够降解木质素的生物降解菌.通过研究其生理生化特性,确定该菌为白腐菌,属于短杆状、好氧型产碱菌.经革兰氏染色鉴定为革兰氏阳性菌.进一步驯化从中挑选出有较强降解能力的菌种并进行实际废水环境下的应用实验,结果显示该菌对造纸废水CODCr的去除率可达到80.9%.

竹材木质素选择性降解菌株的分子鉴定

鉴定1株从腐竹中筛选的高效选择性降解竹材木质素的优良菌株ZNLD-18,为生物法提取可纺性竹原纤维奠定基础。利用真菌通用引物ITS 1和ITS 4扩增并测定菌株的rDNA ITS区序列,序列总长541 bp。把所得序列在GenBank中进行Blast搜索得到同源性较高的同属不同种菌株序列。比较这些序列的遗传距离,显示菌株ZNLD-18与Trametes versicolor的ITS区序列同源性为99%以上。利用PAUP软件构建分子系统发育树,通过对该树的分析并综合菌株的形态特征,鉴定菌株ZNLD-18为白腐菌Trametes versicolor。

高活力锰过氧化物酶菌株的选育及其酶学性质初探

【目的】选育锰过氧化物酶(MnP)活力高的诱变菌株,研究其在秸秆木质素降解中的作用。【方法】利用合适的紫外诱变剂量处理哈茨木霉WRF-2的孢子悬液,通过初筛和复筛,选出1株产锰过氧化物酶能力强的突变菌株,并对突变菌株产生的MnP酶学性质及突变菌株粗酶液对玉米秸秆中木质素的降解效果进行分析。【结果】将哈茨木霉WRF-2孢子悬液在紫外光照射90s后稀释10-4倍,经初筛和复筛获得了1株遗传性状稳定的正突变菌株0202。与出发菌株WRF-2相比,0202菌株的MnP活力提高了169.59%,木质素过氧化物酶(LiP)活力提高了17.98%。酶学性质测定结果表明,0202菌株的MnP底物作用的最适温度为40℃,最适pH为3.0,在pH2.5～3.5以及温度50℃以下MnP活力稳定。Cu2+、Mn2+、Mg2+、Ca2+对0202菌株的MnP活力有促进作用,Fe2+、Zn2+则对其有抑制作用。用0202发酵后粗酶液处理玉米秸秆48h后,木质素降解率达到了23.64%。【结论】获得了MnP活力高的突变菌株0202,其木质素降解酶系为LiP-MnP型,其对玉米秸秆中木质素的降解效果明显提高。

木素降解菌——白腐菌的筛选

真菌中的白腐菌(white-rotfungi),是自然界中唯一一类具有独立降解木素能力的微生物。本研究通过Bavendamm反应和选择性培养基从自然环境中筛选白腐菌的纯菌种。15天左右培养得到子实体,对木素的降解能力在12天可达到74%左右。

不同因子对纤维素降解真菌分离效率的影响

研究土样处理方法、土壤基质类型、土样稀释倍数(10^(-1)、10^(-2)、10^(-3)、10^(-4))等因子对纤维素降解真菌分离率的影响,得到提高纤维素降解真菌分离率的最佳方案。以西藏林芝的腐殖质土、沙质土为实验材料,采用稀释分离法分离纤维素降解真菌,统计不同处理下纤维素降解真菌的分离率。研究发现,将土样阴干后并研细可提高纤维素降解真菌的分离率;腐殖质土及100倍土壤稀释液分离效果好;碳源为CMC-Na,氮源为混合氮源的分离培养基分离率最佳;菌株培养温度为25℃时纤维素降解真菌的分离率最高。本试验为高效分离纤维素降解真菌提供了理论依据。

分解纤维素的高温真菌筛选及其对烟杆的降解效果

为研制促进烟杆堆肥的微生物菌剂,进行了分解纤维素的高温真菌筛选.结果表明,从不同原料腐熟堆肥中筛选到4株降解纤维素的高温真菌,它们均能在以羧甲基纤维素钠(CMC-Na)或烟杆粉末为唯一碳源的培养基上生长.菌株在2～5d内可长满CMC-Na-刚果红平板和烟杆粉末培养基.菌株摇瓶培养时2d可达到产酶高峰,酶活(CMCase)超过10U.菌株对烟杆的降解效果较好,7d内的降解率最高可达42.2%,对烟杆中的纤维素、半纤维素和木质素的分解率分别可达52.7%、47.9%和37.6%.