川芎对衰老大鼠脑保护作用及对PI3K/AKT/HIF-1α通路的影响

目的:通过构建衰老合并血瘀大鼠模型,探讨川芎小剂量久服对于延缓衰老脑保护的药效及作用机制,为川芎的临床用药提供依据。方法:将66只SD大鼠分为空白组、模型组、维生素E组、川芎2 g组、川芎4 g组、川芎配伍人参2 g组,每组11只。除空白组外各组腹腔注射D-半乳糖(300 mg/kg)连续42 d,同时继续造模并给药14 d,第15天冰水浴20 min,连续14 d,最后1 d注射0.1%肾上腺素0.8 mg/kg。WST-1法检测血清超氧化物歧化酶(SOD)、比色法检测谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、总抗氧化能力(T-AOC),TBA法检测脂质过氧化产物丙二醛(MDA),酶联免疫吸附试验检测蛋白质羰基(PC)含量,酶联免疫吸附试验检测脑组织一氧化氮(NO)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、血栓素B2(TXB2)、内皮素(ET)-1含量。蛋白质印迹法(Western Blotting)测定检测脑组织磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)蛋白、蛋白激酶B(AKT)蛋白、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达量。结果:与空白组比较,模型组体质量下降(P<0.001),血清SOD、GSH-PX、T-AOC含量降低(P<0.001,P<0.01,P<0.01),MDA、PC含量升高(P<0.001),脑组织NO、TXB2、ET-1含量升高(P<0.001,P<0.05,P<0.001),eNOS含量降低(P<0.01),HIF-1α表达量降低(P<0.05);与模型组比较,川芎2 g及4 g能升高血清GSH-Px含量,增加T-AOC,降低脑组织NO、TXB2、ET-1含量,升高eNOS(P<0.01),川芎4 g可以增加HIF-1α蛋白表达量(P<0.01)。川芎1 g与人参1 g配伍后进一步升高血清SOD、GSH-Px含量,降低血清MDA、PC含量,降低脑组织NO、TXB2、ET-1含量(P<0.001,P<0.05,P<0.001),升高eNOS(P<0.001),增加HIF-1α蛋白表达量(P<0.01)。结论:对衰老合并血瘀大鼠模型,川芎小剂量久服即可改善内皮功能,抑制氧化应激,发挥抗氧化作用;川芎剂量减少并与人参配伍后可以起到协同增效作用,可能通过HIF-1α通路对脑起到保护作用。

川芎粗多糖抗氧化和细胞毒活性研究

通过川芎粗多糖(LCP)对DPPH离子、超氧阴离子、.OH、总抗氧化能力、螯合能力、还原性和脂质过氧化能力的抗氧化效果和对肝癌细胞HepG2的抑制作用研究。结果显示:LCP具有较强的还原力,对超氧阴离子自由基、脂质过氧化产物有良好的抑制作用,其对肝癌细胞HepG2也具有一定的抑制作用。LCP有望作为天然抗氧化剂及功能性食品得到开发与应用。

川芎多糖的提取、纯化及抗氧化活性的研究

首次从川芎水提物中分离、纯化得到川芎总多糖LCP,经DEAE-纤维素柱色谱分级得到4个均一多糖组分LCP-1,LCP-2,LCP-3和LCP-4。它们均有.OH和O2-.的抑制生成活性,且LCP-2在低浓度对O2-.具有强的清除作用,而在高浓度时对.OH具有强的清除作用。

硫酸酯化川芎多糖的制备及其抗氧化活性研究

以三种川芎多糖组分和淀粉为原料采用氯磺酸-吡啶法制备硫酸酯化产物,紫外和红外光谱对其进行结构表征,氯化钡-明胶比浊法测定硫酸酯化川芎多糖的取代度,分别考察试样在硫酸酯化前后对邻苯三酚自氧化反应产生的超氧阴离子和1,1-二苯基-2-苦基肼(DPPH)自由基的体外清除率。实验结果表明:川芎粗多糖和硫酸酯化川芎多糖对两种自由基的清除作用远低于阳性对照维生素C,但硫酸酯化修饰有助于提升川芎多糖对DPPH自由基的清除作用,对超氧阴离子自由基无明显影响;硫酸基的引入能够提高淀粉对O2-.的清除作用,但清除作用很弱。

羧甲基化川芎多糖的制备及抗氧化活性

为提高川芎多糖的水溶性,以α-氯乙酸为羧甲基化试剂半合成羧甲基化川芎多糖,其结构由红外光谱进行表征,高效凝胶渗透色谱法测定其相对分子质量,并考察其对1,1-二苯基-2-苦基肼自由基和邻苯三酚自氧化反应产生的超氧阴离子自由基和羟自由基的体外清除率。结果表明:羧甲基化反应的最佳条件为反应温度70℃,川芎多糖与α-氯乙酸质量比为25∶1,反应溶剂为75%乙醇,反应时间3h,在该条件下,羧甲基化川芎多糖取代度为0.68,分子量为175 655Da。川芎多糖(LCXP)对DPPH自由基、超氧阴离子自由基和羟自由基清除率的IC50值分别为25.63mg/mL、4.52mg/mL和5.38mg/mL,羧甲基化川芎多糖(CM-LCXP)对DPPH自由基、超氧阴离子自由基和羟自由基清除率的IC50值分别为9.09 mg/mL、4.16mg/mL和5.01mg/mL。结论:川芎多糖经羧甲基化修饰后明显提高多糖的溶解性,增强其对DPPH自由基的清除活性,对超氧阴离子自由基和羟自由基的清除作用没有明显差异。但与VC相比,川芎多糖和羧甲基化川芎多糖对DPPH自由基、超氧阴离子自由基和羟基自由基的清除作用较弱。

基于对衰老大鼠心脏抗氧化保护作用及Keap1-Nrf2-HO-1通路探讨川芎临床“久服”用药策略

目的通过构建衰老合并血瘀大鼠模型,基于抗氧化通路探讨川芎小剂量下久服对于延缓衰老的药效及作用机制,从而探讨川芎的临床用药策略。方法SD大鼠66只,分为空白组、模型组、维生素E组、川芎2 g组、川芎4 g组、川芎配伍人参2 g组;除空白组外各组腹腔注射D-半乳糖(300 mg/kg)连续42天,同时继续造模并给药14天,第15天冰水浴20分钟,连续14天,最后一天注射0.1%肾上腺素0.8 mg/kg。WST-1法检测血清及心脏组织中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、比色法检测谷胱甘肽过氧化物酶活性(glutathione peroxidase,GSH-PX)、总抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC),TBA法脂质过氧化产物丙二醛(malondialdehyde,MDA),ELISA检测蛋白质羰基化合物(protein carbonyl,PC)含量,检测心脏组织Na^(+)-K^(+)-ATP酶、Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATP酶含量。蛋白免疫印迹法(Western Blot)测定检测心脏组织核因子E2相关因子2(nuclearfactor erythroidderived 2-like 2,Nrf2)蛋白、血红素加氧酶1(heme oxygenase 1,HO-1)蛋白、Kelch样ECH相关蛋白1(recombinant kelch like ECH associated protein 1,Keap1)表达量。结果与空白组相比,模型组体质量下降(P<0.05),血清及心脏组织SOD、GSH-PX、T-AOC含量降低(P<0.01),MDA、PC含量升高(P<0.01),心脏组织中Na^(+)-K^(+)-ATP酶、Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATP酶含量降低(P<0.01),Nrf2、HO-1表达量降低(P<0.05);与模型组相比,维生素E组能升高大鼠体质量、血清及心脏组织SOD、GSH-PX、T-AOC含量,降低MDA、PC含量,升高心脏组织中Na^(+)-K^(+)-ATP酶(P<0.05);川芎2 g、4 g升高血清GSH-PX、T-AOC含量,且川芎4 g提高心脏GSH-PX,降低血清及心脏MDA含量,增加心脏组织中Na^(+)-K^(+)-ATP酶、Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATP酶含量(P<0.05),增加Nrf2、HO-1蛋白表达量(P<0.05)。川芎配伍人参配伍后进一步升高血清及心脏SOD、GSH-PX含量,降低血清MDA、PC含量,增加心脏组织中Na^(+)-K^(+)-ATP酶、Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATP酶含量(P<0.01),增加Nrf2、HO-1蛋白表达量(P<0.05)。结论对衰老合并血瘀大鼠模型,川芎小剂量久服即可发挥抗氧化作用;川芎与人参合用后川芎剂量减少可以起到协同增效作用,可通过Keap1-Nrf2-HO-1抗氧化通路对心脏起到保护作用。

不同产区川芎提取物抗氧化及抑菌活性研究

为研究道地产区敖平镇川芎与非道地产区中江县川芎醇提物、石油醚提取物抗氧化活性、抗菌活性的大小,采用自由基清除能力（DPPH自由基和羟基自由基清除能力）和还原能力测定法评价提取物的抗氧化活性,采用滤纸片扩散法测定抑菌圈直径考察川芎提取物的抑菌活性。研究结果表明：两产区川芎醇提物和醚提物在测定浓度范围内均具有抗氧化活性和抑菌活性。但与中江县川芎提取物相比,道地产区敖平镇川芎提取物具有更强的抑菌活性,而对于中江县是否适合大面积推广种植川芎,还需要结合多种环境因素具体分析。

川芎精油和多糖的同步提取及其抗氧化活性分析

采用响应面优化法对超声波辅助法同步提取川芎精油(LCEO)和多糖(LCP)工艺条件进行优化,以总还原力和DPPH·清除率为指标评价LCEO和LCP的抗氧化活性。结果表明,川芎精油和多糖提取的最佳工艺条件为:液料比16 mL/g,超声时间17 min,提取时间4.3 h,在此条件下,精油提取率为1.35%,多糖提取率为2.72%。抗氧化活性研究表明,川芎精油及多糖与总还原力和清除DPPH·能力间均具有量效关系,清除DPPH·半数抑制浓度(IC50)值分别为3.19 mg/mL和1.16 mg/mL。川芎精油及多糖均具有较强体外抗氧化活性。本研究为川芎的合理开发和工业化生产提供科学依据。