川芎嗪纳米制剂抗大鼠术后腹腔粘连实验研究

目的探讨川芎嗪纳米制剂抗大鼠术后腹腔粘连的作用。方法将大鼠随机分组,共8组。术后观察大鼠一般情况,各组于术后1周和2周取8只观察粘连情况,采用Phillips评分法对腹腔粘连进行分级。结果各组分级评分与模型组比较,1周组与2周组中的川芎嗪纳米中、高剂量组具有较明显的抗术后粘连作用(P<0.05,P<0.01)。且以川芎嗪纳米组降低粘连发生率的作用尤为显著。结论川芎嗪纳米制剂具有较好的抗术后腹腔粘连的作用。

丹参素对腹膜粘连组织成纤维细胞胶原合成与降解的调控

目的考察在转化生长因子β1(TGF-β1)刺激下丹参素(DSS)对人体腹膜粘连组织成纤维细胞(ATF)胶原合成与降解的调控作用。方法使用组织块培养法获取ATF,通过CCK-8法确定TGF-β1与DSS的实验剂量,ATF经TGF-β1刺激后加入不同剂量DSS共培养,48 h后收集培养上清液并提取总RNA,分别用ELISA法与Real-time PCR法检测各组的Ⅰ型胶原蛋白(COL-Ⅰ)、基质金属蛋白-1(MMP-1)与基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)表达。结果 TGF-β1刺激剂量设为10 ng/m L,DSS剂量设为2.5、10和40μmol/L。与模型组比较,DSS各剂量组的COL-ⅠmRNA水平下调,DSS 10、40μmol/L组的TIMP-1 mRNA水平下调,DSS 10、40μmol/L组COL-Ⅰ蛋白水平下降,DSS各剂量组TIMP-1蛋白水平下降,差异均有统计学意义(P<0.01,P<0.05),DSS各剂量组MMP-1蛋白水平升高,但差异无统计学意义(P>0.05)。DSS10、40μmol/L组的COL-Ⅰ蛋白水平以及DSS各剂量组的TIMP-1蛋白水平与空白组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 DSS通过下调COL-Ⅰ表达抑制ATF胶原合成,下调TIMP-1表达促进ATF胶原降解,并将其COL-I与TIMP-1表达恢复至无TGF-β1刺激的正常水平。

川芎嗪注射液对高糖诱导后人腹膜间皮细胞Ⅰ型胶原、基质金属蛋白酶-1和金属蛋白酶组织抑制剂-1表达的影响

目的:研究川芎嗪注射液对体外培养的人腹膜间皮细胞(human peritoneal mesothelial cells,HPMCs)在高糖刺激下Ⅰ型胶原、基质金属蛋白酶-1(matrix metalloproteinase-1,MMP-1)和金属蛋白酶组织抑制剂-1(tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)表达的影响。方法:胰蛋白酶消化法从人腹膜组织中分离间皮细胞进行原代培养并传代,分为5组(每组设3个样本):正常组(完全培养液)、高糖对照组(2.5%葡萄糖)和高糖(2.5%葡萄糖)加低、中、高剂量川芎嗪(10、20和40mg/L)组。采用半定量逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-poly merase chain reaction,RT-PCR)法检测细胞内Ⅰ型胶原、MMP-1和TIMP-1mRNA表达;酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosor-bent assay,ELISA)法检测细胞上清液中Ⅰ型胶原、MMP-1和TIMP-1的蛋白质水平,用二喹啉甲酸(bicinchoninic acid,BCA)蛋白检测法测定细胞中蛋白质含量,用以校正ELISA结果。结果:川芎嗪能显著降低高糖所致的HPMCsⅠ型胶原和TIMP-1的表达(P<0.05,P<0.01),两者在蛋白质和基因水平均呈量效关系;且中、高剂量川芎嗪能显著增加MMP-1的表达(P<0.05)。结论:川芎嗪能减少HPMCs高糖刺激下Ⅰ型胶原的合成,并且通过调节MMP-1/TIMP-1的平衡,促进Ⅰ型胶原降解。

川芎嗪对大鼠腹膜粘连及TNF-α表达的影响

目的探讨川芎嗪在TNF-α蛋白表达及大鼠腹膜粘连形成中的作用。方法采用盲肠刮擦及切除右侧壁腹膜和腹膜下一层肌肉的方法制作S-D大鼠腹膜粘连模型;关腹前注射川芎嗪注射液(约为50mg/kg)和生理盐水;术后7d行二次开腹手术,取粘连组织,光镜下观察粘连组织病理变化。链霉亲和素免疫组化法(SABC法)检测粘连组织中TNF-α蛋白的表达量。放免法检测血液中TNF-α的浓度。结果川芎嗪组粘连面积明显减少,川芎嗪组粘连评分结果(2.10±0.99)明显低于模型组(3.80±0.42)和生理盐水组(3.60±0.70)(P<0.05),模型组和生理盐水组的TNF-α呈较一致的阳性反应,川芎嗪组的TNF-α呈现较弱阳性的反应或不表达,其染色强度评分(0.08±0.14)明显低于模型组(1.39±0.61)和生理盐水组(1.32±0.55)(P<0.05)。血液中的TNF-α浓度值在模型组(2.24±0.47)、生理盐水组(2.58±0.38)和川芎嗪组(2.51±0.42)三组之间差异无显著性(P>0.05)。结论川芎嗪通过抑制粘连组织中TNF-α的表达来减低大鼠腹膜粘连的程度,但对血液中的TNF-α含量无影响。

川芎嗪对大鼠腹膜粘连中TGF-β_1表达的影响

目的探讨川芎嗪对大鼠腹膜粘连中TGF-β1表达的影响。方法制作S-D大鼠腹膜粘连模型,关腹前注射川芎嗪注射液(约为50mg/kg)和生理盐水;术后7d行二次开腹手术,链霉亲和素免疫组化法(SABC法)检测粘连组织中TGF-β1蛋白的表达,酶联免疫(ELISA法)定量检测血液及腹腔积液中TGF-β1的浓度。结果川芎嗪组腹腔积液中的TGF-β1浓度(206.37±25.56ng/ml)明显低于模型组(293.42±29.61ng/ml)和生理盐水组(287.46±30.55ng/ml)(P<0.05)。粘连组织中染色强度和血液中的TGF-β1浓度值在模型组(244.98±31.47ng/ml)、生理盐水组(258.14±26.38ng/ml)和川芎嗪组(251.79±27.42ng/ml)三组之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论川芎嗪抑制腹腔积液中TGF-β1的表达,但对粘连组织和血液中的TGF-β1含量无影响。