Human responses to flower fragrance of Lilium ‘Siberia’ and Rosa ‘Escimo’

The objective of our study was to lay a foundation for the effect of flower flagrance on human emotions and to provide a theory for the choice of indoor plants and the improvement of the olfactory environment. Specifically, our purpose was to study human physiological responses to flower fragrance of Lilium ＇Siberia＇ and Rosa ＇Escimo＇. The participants were 31 college students. Blood pressure, pulse rate, finger temperature （FT） and galvanic skin response （GSR） were measured. The results show that the fragrance of Rosa ＇Escimo＇ causes the diastolic pressure and pulse rate of the participants to reduce significantly. The average decrease was 0.37 kPa and 2.23 beats per minute, which indicates that sympathetic nervous activity increases, physiological arousal decreases and emotional alleviation occurs. Furthermore, the GSR of participants significantly increased by smelling the fragrance of Lilium ＇Siberia＇, indicating that both sympathetic nervous activity and physiological arousal increased. But the data could not prove that flower fragrance stimulation has an effect on changes in systolic pressure and finger temperature. Some other factors, such as basic emotion and weather, may have an effect.

东方百合Siberia多倍体诱导及其细胞学鉴定

本文以东方百合Siberia的试管苗为试验材料,研究了预培养时间、秋水仙素处理方法及浓度等因素对诱导试管苗多倍体的影响。研究结果表明:秋水仙素溶液直接浸泡较共培养法好,且以0.05%的浓度和浸泡48h为最佳组合,最终获得了18株四倍体试管苗。通过根尖染色体计数确定其为稳定的同源四倍体。显微观测气孔特征后发现:二倍体与四倍体植株的叶下表皮气孔密度及气孔保卫细胞长、宽差异均达到了极显著水平。

西伯利亚百合器官离体培养及结鳞茎的研究

通过对西伯利亚百合不同外植体离体培养、生根培养以及结鳞茎的研究,建立了组织培养快速繁殖技术体系.结果表明:诱导鳞茎不定芽分化的最佳培养基为MS+1.0 BA+0.5 NAA,大于2 cm叶片长的分化率达到135.67%;诱导叶柄不定芽分化的最适培养基为MS+0.5 BA+1.0 NAA,分化率达到28%;诱导叶片不定芽分化的最适培养基为MS+0.5 BA+1.0 NAA+0.1 KT,分化率达到12.50%.最适增殖培养基为MS+0.2 NAA,60 d后增值率达到318%;最佳结鳞茎和生根培养基为MS+9%蔗糖,蔗糖浓度为3%～9%时,对结鳞茎和生根具有促进作用,11%时,对其具有抑制作用.

西伯利亚百合花挥发油化学成分的研究

采用水蒸汽蒸馏法提取,运用毛细管气相色谱-质谱联用法结合计算机检索对西伯利亚百合花挥发性化学成分进行分析和鉴定,经毛细管色谱分离出49个峰,共确认了其中47种化合物,所鉴定化合物的含量占全油的99.89%.用气相色谱面积归一化法测定了各组分的相对百分含量,其化学成分主要为: +/- -1-甲基-4- 1-甲基乙烯 -环己烯 66.00% ;3,7-二甲基-1,6-辛二烯-3-醇 19.37% ;4-甲基-1- 1-甲基乙基 -3-环己烯-1-醇 3.33% ;1-甲基-4- 1-甲基乙基 -1,4-环己二烯 2.72% ;2-氨基苯甲酸-3,7-二甲基-1,6-辛二烯-3-酯 1.76% .以上5种化合物占总挥发油的93.18%.

‘西伯利亚’百合单萜释放与Li-mTPS表达日变化动态分析（英文）

使用动态顶空法采集‘西伯利亚’百合不同时间点(7:30、9:30、11:30、13:30、15:30、17:30、19:30)释放的香气,采用自动热脱附-气相色谱/质谱联用(ATD-GC/MS)技术分析鉴定花香成分及释放量。结果表明:单萜释放量呈现先增后减的规律,11:30、13:30、15:30时的释放量较高。在所有的花香成分中,罗勒烯、芳樟醇和β-月桂烯的释放量最高,它们是‘西伯利亚’百合主要的单萜花香化合物。进一步研究发现,‘西伯利亚’百合花瓣中的Li-mTPS(一种百合单萜合成酶基因)的表达与单萜释放表现相似的规律。可见,Li-mTPS的表达在‘西伯利亚’百合主要的单萜释放中起着关键作用,而调控机制有待于进一步研究。

不同花期‘西伯利亚’百合花瓣单萜合成途径转录组分析（英文）

以‘西伯利亚’百合(Lilium‘Siberia’)花蕾期、半开期、盛开期、衰败期的花瓣为材料,利用RNA-seq技术对其转录组进行高通量测序,分析单萜合成途径中差异表达的基因并阐明其分子机制。结果显示,‘西伯利亚’百合通过转录组测序分析共得到56.28 Gb clean base,223.40 Mb clean reads和124 233个unigene,其中35 749个基因得到注释。萜骨架合成途径中的基因表达水平在不同花期表现出显著差异。其中,甲基赤藓糖醇磷酸(MEP)中的1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸合成酶(DXS)、1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸还原异构酶(DXR)、4-羟基-3-甲丁-2-烯基二磷酸合成酶(HDS)、4-羟基-3-甲丁-2烯基二磷酸还原酶(HDR)、牻牛儿基二磷酸合成酶(GPS)基因的表达水平随花期变化呈先升高后降低的趋势。罗勒烯合成酶(OCS)基因表现出相似变化规律,在盛开期表达量最高。甲羟戊酸(MVA)途径中的3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(HMGR)的基因表达同样出现先升高后降低的趋势。单萜合成下游的分支途径中,茄尼基二磷酸合成酶(SDS)、牻牛儿基牻牛儿基二磷酸合成酶(GGDR)基因的表达则出现相反的趋势,在盛开期的表达量最低。研究结果表明MEP途径中的关键基因可随花期变化规律性的表达,以调控单萜的生物合成,在盛开期有较高释放量,且盛开期MVA途径的活化以及泛醌和萜醌代谢支路基因的低表达也促进了单萜的生物合成。

西伯利亚百合不同部位鳞片的快速繁育

为西伯利亚百合种质保存、工厂化育苗及遗传改良提供依据,以西伯利亚百合的外、中、内3层鳞片为外植体进行组织培养研究,建立了西伯利亚百合鳞片的快速繁殖体系。结果表明:中部鳞片的小磷茎诱导率最高,MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.2mg/L为小鳞茎最佳诱导培养基,诱导率达85.7%;试管苗生根培养基以1/2MS+IAA 0.2mg/L最好,生根率达96.7%。

糖酒液对家庭瓶插“西伯利亚”百合保鲜效果影响

以东方百合"西伯利亚"切花为试材,以啤酒、白酒、红糖、白糖为保鲜剂,研究了不同浓度的保鲜剂对西伯利亚百合瓶插寿命、切花最大花径形成、花枝鲜质量变化率的影响。结果表明:0.1%啤酒溶液能显著延长百合切花的保鲜寿命,促进花径增大,提高切花观赏价值。啤酒溶液对百合切花的保鲜效果优于白酒,其次是红糖溶液,白糖的保鲜效果不明显。

西伯利亚百合花药色素稳定性的研究

本文研究了东方系西伯利亚百合花药色素的稳定性。结果表明:该色素在pH=4时较稳定;对光照、温度也较稳定;Ca2+、苯甲酸钠对其有增色作用;Na+、蔗糖对色素有一定的降解作用;Fe3+、Cu2+对该色素有明显的不良影响;VC、HO则有明显的破坏作用。

西伯利亚百合病毒RNA提取及RT-PCR方法的比较与优化

在对感染西伯利亚百合的CMV、LSV、LmoV 3种病毒的检测上,对4种常见的RNA提取方法及影响RT-PCR体系的因素进行了比较研究。改良优化了的RNA提取方法,不需用DEPC水处理和高温烘器皿,省去液氮研磨过程,采用该法从百合叶片中提取总RNA,整个过程及后继反应均不需使用RNasin,降低了成本,同时提取的RNA质量高,适于后期RT-PCR的检测,更适合于百合幼嫩叶片和试管苗RNA的提取。运用一步法,建立了CMV、LSV、LMoV 3种病毒的RT-PCR优化体系,最优反应体系为:M-MLV 5×Reaction Buffer 1μL1、0×PCR buffer0.5μL2、.5 mM dNTPs(each)0.8μL1、0 pmol/μL下游引物0.2μL1、0 pmol/μL上游引物0.2μL、M-MLVRT 200 U/μL 0.1μL2、.5 U/μL Taq polymerase 0.1μL;0.4μL感病材料RNA提取液,剩余部分用无菌双蒸水补足,使反应体系达到10μL。

两种东方系百合组织培养快繁技术

以东方系百合索邦和西伯利亚的种球鳞片为外植体,以MS为基本培养基,添加NAA、6-BA、TDZ、KT、IBA、2,4-D等不同植物生长调节剂,筛选鳞片愈伤组织诱导、增殖、分化及再生苗生根的最佳培养基,为百合种质保存、组培快繁及脱毒奠定基础.结果表明,索邦百合在MS+IBA 0.1 mg/L+6-BA 1.0 mg/L培养基中愈伤组织诱导效果最好,在MS+NAA 0.1 mg/L+6-BA 1.0 mg/L培养基中愈伤组织增殖最好,在MS+NAA 0.3 mg/L+TDZ 0.1 mg/L+KT 0.2 mg/L培养基中分化最好;西伯利亚百合在MS+NAA 0.1 mg/L+6-BA 1.0 mg/L培养基中愈伤组织的诱导和增殖最好,在MS+IBA 1.0 mg/L+KT 0.5 mg/L培养基中分化效果最好.二者均在1/2 MS+NAA 0.1 mg/L+IBA 0.01 mg/L培养基中生根最好.

GA_3处理及冷藏对百合地上部分生长发育的影响

用不同浓度的GA3溶液分别对东方百合种球进行浸泡后冷藏处理60d,研究外增赤霉素类生长调节剂对百合物候期、生长发育进程和切花品质的影响。结果表明:在适宜的范围内,百合种球茎尖内GA3浓度含量越高,其品质性状越好。其中以200mg/L处理表现最好,在生产实践中可于现蕾期喷施GA3溶液提高品质。

外施赤霉素对休眠百合生理指标的影响

用不同浓度的GA3溶液分别对东方百合种球进行浸泡,并结合冷藏处理,研究外施GA3对种球碳水化合物代谢和内源激素平衡的影响。结果表明:在解除休眠的过程中,GA3始终保持着高浓度,ZR则相反;可溶性总糖、IAA、GA3、ZR均比冷藏初始期浓度增高,淀粉、ABA则下降。经相关分析得到各种处理的GA3与GA3/IAA比值存在极显著相关;与其它激素和激素比值之间无显著相关性。初步判定百合解除休眠与外界条件变化有关,如低温刺激,而与增加GA3浓度无关。

西伯利亚百合遗传转化高频直接分化受体体系的建立

文章运用西伯利亚百合培养无菌苗的鳞片、叶片和愈伤组织作为外植体,进行不定芽的诱导分化实验,以及运用潮霉素为选择抗生素建立西伯利亚百合高频直接分化遗传转化的受体系统。最终确定鳞片为外植体,在添加0.2 mg/L NAA的MS基础培养基上培养,可以通过器官直接发生途径获得再生苗,再生率高达100%,并且确定了潮霉素选择压为80 mg/L。

百合产香内生真菌的分离鉴定及其挥发性成分分析

对新鲜百合的内生真菌进行分离纯化,共获得10株纯系微生物,通过筛选获得1株产香浓郁的菌株,利用GC-MS对其发酵产物进行分析。结果表明,香气成分以酯、醇、醛、烷类化合物为主要的香气成分,例如:4-戊烯-2-醇(67.29%)、嘧啶(3.42%)、1,2-苯二甲酸二(2-甲基丙基)酯(2.04%)、9,12-十八碳二烯酸(Z,Z)(1.72%)、1-丁醇,2-甲基(1.38%)、苯乙醇(1.53%)、邻苯二甲酸二丁酯(1.22%)、三十四烷(1.29%)、4-庚醇(1.05%)。

‘西伯利亚’百合钙依赖型蛋白激酶基因的克隆及表达分析

钙依赖型蛋白激酶(calcium-dependent protein kinase, CDPK)是一类Ser/Thr型蛋白激酶,在植物体内钙信号的传递中起着重要的作用。本研究以东方百合‘西伯利亚’(Oriental Lilium’siberia’)为材料,通过RACE方法克隆了LiCDPK基因,并进行了时空表达分析。结果表明,百合LiCDPK基因全长2 231 bp,开放阅读框长1 551 bp,编码516个氨基酸,其蛋白序列与其他物种的CDPK蛋白相似性在80%以上。LiCDPK基因在不同花期和9个不同组织中的表达存在差异。不同花期的qRT-PCR表明,花蕾期LiCDPK基因的表达量最高;盛花期的不同组织器官中,花药LiCDPK基因的表达量最高。本研究为进一步揭示LiCDPK基因在百合花香释放过程中的信号作用提供了帮助。

‘西伯利亚’百合丙二烯氧化合酶LsAOS基因的克隆及其表达分析

丙二烯氧化合酶(allene oxide synthase,AOS)基因是茉莉酸(JA)合成途径中第一个特异性酶,具有调控植物体内JA合成积累的重要作用。本研究通过RACE技术克隆得到了‘西伯利亚’百合Lilium‘Siberia’中的AOS基因,并将其命名为LsAOS。该基因全长1 542 bp,编码513个氨基酸,其蛋白序列与小果野芭蕉的同源性最高,属于不稳定亲水蛋白。通过对‘西伯利亚’百合4个不同花期,9个不同组织器官进行实时荧光定量PCR(q-PCR)后发现,LsAOS在花蕾期中的表达量最高,随着花朵的逐渐开放表达量逐渐下降;LsAOS在叶片中表达水平最高,其次是内瓣、根、茎等。JA参与植物生长发育的全过程,与植物抗逆性和次生代谢反应有着密不可分的联系。AOS基因是JA途径中的关键基因之一,对JA的合成有着重要的调控作用。

百合LiP5CS、LiGDH和LiOAT基因克隆及表达分析

为探究百合脯氨酸生物合成途径中部分相关基因的功能及其对非生物胁迫的响应,本研究以百合‘西伯利亚’作为试验材料,克隆了3个脯氨酸生物合成相关基因:Δ^(1)-吡咯啉-5-羧酸合成酶基因(LiP5CS)、谷氨酸脱氢酶基因(LiGDH)和鸟氨酸氨基转移酶基因(LiOAT),分析其蛋白特性,并测定3个基因在百合不同组织、花不同发育时期以及失水和低温胁迫下的相对表达量和酶活性。结果表明,LiP5CS长度为1 068 bp,编码355个氨基酸残基;LiGDH长度为429 bp,编码142个氨基酸残基;LiOAT长度为870 bp,编码289个氨基酸残基。LiP5CS、LiGDH和LiOAT都含有特有保守motif,皆为脂溶性、亲水性的稳定蛋白,都具有磷酸化位点,3个蛋白在进化上具有一定保守性。表达分析发现,3个基因在百合鳞茎中的表达量最低,LiP5CS与LiOAT在根中的表达量最高,LiGDH在花中的表达量最高;在花蕾的不同发育时期中LiP5CS基因表达随发育呈下降趋势,而LiGDH与LiOAT表达呈升高趋势。在失水和低温胁迫下,LiP5CS、LiGDH和LiOAT的表达均被诱导升高,其中LiP5CS的表达量峰值出现较早,3个酶活性变化趋势与各自基因表达变化相似。本研究结果暗示百合切花中的谷氨酸途径是响应低温和失水胁迫的主途径,而鸟氨酸途径为辅助途径。