Analysis of Climatic Conditions for the Growth of Longhui Lilium brownii var.viridulum

Based on temperature,precipitation and sunshine data at Longhui National Station during 1981-2021,temperature at 22 regional stations during 2011-2021,and lily planting information of Longya Lily Base,the feasibility of meteorological conditions for the growth of Lilium brownii var.viridulum was analyzed.The results showed that in general,the climatic conditions in Longhui were suitable for planting L.brownii var.viridulum.Among them,the south hilly area was the most suitable climate area,and the north mountain area was the suitable climate area,and the northwest mountain area was the more suitable climate area.It should sufficiently use the climatic conditions of Longhui,do a good job in meteorological service of L.brownii var.viridulum,and provide favorable meteorological guarantee for farmers,to reduce the impact of adverse meteorological conditions on L.brownii var.viridulum,and improve the economic benefits of lily production.

Molecular cloning,characterization and promoter analysis of LbgCWIN1 and its expression profiles in response to exogenous sucrose during in vitro bulblet initiation in lily

Lily(Lilium spp.) is an important ornamental flower, which is mainly propagated by bulbs. Cell wall invertases(CWINs), which catalyze the irreversibly conversion of sucrose into glucose and fructose in the extracellular space, are key enzymes participating in sucrose allocation in higher plants. Previous studies have shown that CWINs play an essential role in bulblet initiation process in bulbous crops, but the underlying molecular mechanism remains unclear. Here, a CWIN gene of Lilium brownii var. giganteum(Lbg) was identified and amplified from genomic DNA. Quantitative RT-PCR assays revealed that the expression level of LbgCWIN1 was highly upregulated exactly when the endogenous starch degraded in non-sucrose medium during in vitro bulblet initiation in Lbg. Phylogenetic relationship, motif, and domain analysis of LbgCWIN1 protein and CWINs in other plant species showed that all sequences of these CWIN proteins were highly conserved. The promoter sequence of LbgCWIN1 possessed a number of alpha-amylase-, phytohormone-, light-and stress-responsive cis-elements. Meanwhile, β-glucuronidase(GUS) assay showed that the 459 bp upstream fragment from the translational start site displayed maximal promoter activity. These results revealed that LbgCWIN1 might function in the process of in vitro bulblet initiation and be in the response to degradation of endogenous starch.

百合分子生物学研究进展

为深入研究百合的分子调控机制,实现百合性状的定向改良和促进百合产业的发展,以中国知网(CNKI)收录论文为主要对象,采用文献综述法,探索了百合种质资源研究的发展现状、研究热点和发展趋势。结果表明:百合种质资源丰富,研究者采用随机扩增多态DNA技术、RAPD技术、ISSR技术、SRAP标记引物等多种技术对百合品种的遗传多样性及亲缘关系进行分析,并鉴定了百合的新品种;利用基因克隆技术从百合品种中分离出WRKY、MYB、AGL、NAC等家族基因,但大多数研究还停留在基因分离和表达分析上,关于基因功能的研究尚少。百合具有极高的观赏价值和市场经济价值,未来还需挖掘百合功能相关的关键基因,定向培育更多观赏性更高和抗逆性更强的百合新品种。

百合的组织培养

目的 研究百合组培快繁的最佳途径。方法 在 MS培养基上添加不同的激素配比 ;采用鳞叶不同部位作为外植体 ;改变培养方式。结果 确定了外植体产生小鳞茎的最佳培养基为 MS+ NAA 0 .5 mg/ L + GA32 .0mg/ L;鳞叶的下部小块分化率最高 ,为 92 .5 % ;小鳞茎叶脱分化形成愈伤组织后再分化可获得多而健壮的次级小鳞茎 ;次级小鳞茎采用液体振荡培养可快速增重。结论 采用组织培养方式可进行百合的快速繁殖 ,使百合种球的工厂化生产成为可能。

百合病毒的多重RT-PCR检测技术

根据百合(Lilium brownii var.viridulum)常见的黄瓜花叶病毒(CMV)、百合斑驳病毒(LMoV)、无症病毒(LSV)引物序列,设计2组特异引物,以18S rRNA为内参基因,采用多重RT-PCR,2组引物均能扩增得到LMoV和LSV预期大小一致的片段,未检测到CMV,检测结果不受病株取材部位的影响。该方法的建立为百合脱毒苗的规模化生产提供了高效检测技术。

龙牙百合两种病害致病菌的分离、鉴定及抑制效应研究

利用常规组织分离法对广西永福地区种植的龙牙百合两种病害的病原菌进行了分离,并对分离菌株进行培养、纯化、回接和重新分离,最后利用形态学和分子生物学技术对致病菌株进行了鉴定;同时观察了三种植物生长调节物质对两种致病菌的抑制效果。结果表明:两种病害(A和B)症状表明是叶枯病和青霉病,分别从感病叶片中分离得到4株和3株病原菌,病原菌室外回接发现只有菌株A-4和B-2分别致病,致病率均达到100%。形态学鉴定,A-4为葡萄孢属病原菌,菌落白色绒絮状,圆型;菌丝匍匐向外、向上生长、气生,无色,有隔膜,有分枝,具有分生孢子和顶生孢子。B-2为青霉属病原菌,菌落圆形或不规则形,外围形成一圈白色绒毛状,中间蓝绿色;菌丝细,匍匐生长,具横隔,分生孢子梗扫帚状,孢子呈球形。两类菌株分别获得全长522 bp和551 bp的序列,把ITS序列与Genbank中已登陆的序列进行相似性分析,并结合田间致病症状,认为龙牙百合叶枯病致病菌可能是椭圆葡萄孢,而青霉病致病菌是扩展青霉。三种植物生长调节物质对两种致病菌的抑制效果表明,0.1~1.0 mmol·L^(-1)的SA不能完全抑制两种病原菌的生长,而0.5~1.0 mmol·L^(-1)BRs和Me-JA均能完全抑制病原菌A-4和B-2的生长。

龙牙百合鳞球增重及生根培养研究

为获得龙牙百合高品质的鳞球种球,加快组培快繁进程,以龙牙百合小鳞芽为试材,通过组织培养的方法进行了鳞球增重及生根培养研究.结果表明,诱导龙牙百合小鳞芽生长发育成鳞球的最适培养基为MS+IAA1.0mg/L;龙牙百合鳞球增重的最佳培养基为MS+6-BA1.0mg/L+2,4-D0.5mg/L,培养基蔗糖质量分数影响鳞球的增重,适当提高蔗糖质量分数对鳞球的增重有促进作用,以5%效果最好;鳞球生根的最适培养基为1/2MS+IBA0.5mg/L.

巨球百合无菌播种影响因素的研究

以剥皮、不剥皮野生巨球百合种子为材料,采用不同激素配比的10种培养基进行无菌播种,研究不同培养基处理之间的种子萌发率、诱导率、诱导芽数及形成小鳞茎数等的差异。结果表明:巨球百合种子具有较强的生活力,不剥皮处理的种子亦具备较高的萌发率,剥皮处理对提高种子的萌发速度和萌发率有一定的效果;剥皮巨球百合种子萌发的最适培养基为MS+1.0 mg/L 6–BA+1.0 mg/L NAA,萌发率为100.0%,诱导率为65.0%,平均诱导不定芽1.28个,转入MS培养基生长45 d后,平均形成小鳞茎2.35个,平均生成3.6片叶,平均生根达6.7条,且植株生长健壮。

百合总皂苷提取工艺及抗抑郁活性研究

本文研究百合总皂苷最佳提取工艺,继而采用AB-8大孔吸附树脂富集纯化百合总皂苷,并测试其抗抑郁活性。采用正交实验,考察乙醇浓度、提取次数、固液比及提取时间四个因素对该工艺的影响;采用小鼠悬尾实验和小鼠强迫游泳实验评价百合总皂苷的抗抑郁活性。确立了百合总皂苷的最佳提取工艺为:提取时间3h,乙醇浓度80%,固液比1∶10,提取次数为3次。在最佳提取工艺条件下,总皂苷提取率为1.24%。经过AB-8大孔树脂富集纯化总皂苷的含量达到62%以上。药理实验表明,百合总皂苷中剂量、小剂量能明显缩短小鼠悬尾的不动时间和游泳时间(P<0.05或者P<0.01),百合富集纯化的总皂苷部位具有较好的抗抑郁活性。

不同基质对龙牙百合鳞片繁殖的影响

研究了6种基质对龙牙百合鳞片繁殖的影响,结果表明,泥炭∶珍珠岩=1∶1、泥炭∶沙=1∶1是最适合作为扦插繁殖的基质,在沙中加入等量的泥炭是埋片繁殖的最佳基质。

百合皂苷的提取分离与结构初步鉴定

以百合鳞茎为原料 ,采用乙醇抽提 ,一系列液 液萃取、AB 8大孔吸附树脂分离、乙醚丙酮分步沉淀与HPLC等多种分离方法 ,以电喷雾质谱 (ESI MS)为手段筛选出了两种甾体皂苷 ,并通过化学与光谱手段对其结构进行了初步鉴定。

液相色谱-电喷雾电离质谱与电子轰击质谱联用筛选百合中的甾体皂甙

利用高效液相色谱 电喷雾电离质谱联用仪 (HPLC/ESI MS)、电子轰击质谱 (EI MS)和半制备型高效液相色谱 ,从卷丹百合中筛选出了两种甾体皂甙 ,其中一种为含有 3个糖基与提果皂甙元的甾体皂甙 ,另一种为含有 3个糖基和薯蓣皂甙元的甾体皂甙。结果表明 :在线的HPLC/ESI MS能够准确快速地提供糖甙类化合物的分子质量和糖链部分的有益信息 ,但对甙元部分提供的信息极少 ;离线的EI MS只需极少量 (1mg～ 2mg)的纯品就能准确地提供甙元部分的有益信息 ,但很难获得糖甙的分子离子峰与糖链部分的信息 ,两者有机地结合起来能快速地从植物中筛选甾体皂甙。

无银保鲜剂对卷丹百合切花的保鲜效果

为了进一步延长切花卷丹百合(Lilium brownii var.viridulum Baker)的瓶插寿命,提高观赏价值,分析了不同保鲜剂对卷丹百合的保鲜效果,以3%蔗糖+150 mg/L 8-HQ作为基础液,分别添加1.5mmol/L STS与100 mg/L Al2(SO4)3,测量其瓶插寿命、鲜重变化率、水分平衡值以及花瓣中MDA的含量。结果表明,保鲜剂B[3%蔗糖+150 mg/L 8-HQ+100 mg/L Al2(SO4)3]的保鲜效果较好,其瓶插寿命延长了5.2 d,鲜重变化率最高,能够很好地促进鲜切花的吸水量,并且花瓣中MDA的含量较低,能够有效地维持细胞膜结构的稳定性,使切花百合的观赏效果达到最佳。

HPLC法测定百合、卷丹、细叶百合中3种甾体皂苷的含量

目的 HPLC法同时测定百合、卷丹、细叶百合中3种甾体皂苷的含量。方法采用HPLC法,色谱柱为Akzonobel Kromasil C18(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸,检测波长210 nm,流速1.0mL/min。结果 (25R)-26-O-(β-D-吡喃葡萄糖)-呋甾烷-5-烯-3β,22R,26-三羟基-3-O-α-L-鼠李糖-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖苷(简称皂苷1)在2～12μg呈良好线性关系(r=0.9998);(25R)-螺甾烷-5-烯-3β-O-α-L-鼠李糖-(1→2)-O-[β-D-葡萄糖-(1→6)]-β-D-吡喃葡萄糖苷(简称皂苷2)在3.125～18.75μg呈良好线性关系(r=0.9999);(25R)-3β,17α-二羟基-5α-螺甾烷-6-酮-3-O-α-L-鼠李糖-(l→2)-O-[α-L-阿拉伯糖-(l→3)]-β-D-吡喃葡萄糖苷(简称皂苷3)在1.125～9μg呈良好线性关系(r=0.9997)。皂苷1、2、3的平均回收率分别为97.72%、99.27%、98.96%,RSD分别为1.96%、1.78%、1.31%。结论所建立的HPLC法简便快速、准确度高,可用于百合药材的质量控制。

百合花色素性能研究

从百合花中提取出了橙黄色素,试验了该色素的溶解性能和光、热、pH值及盐类物质对色素水溶液稳定性的影响。结果表明:百合花色素着色力强,稳定性好。百合花是一种有待开发、具有较高经济价值的新的天然色素资源。

龙牙百合花氨基酸含量的柱前衍生OPA-HPLC法测定

[目的]测定龙牙百合花中的氨基酸含量。[方法]以邻苯二甲醛(OPA)与9-芴基羰酰氯(FMOC-Cl)作衍生剂,利用VWD检测器可变波长检测程序,采用柱前衍生OPA-HPLC法测定邵阳龙牙百合花中的17种氨基酸含量。[结果]邵阳龙牙百合花中含有苏氨酸、丝氨酸、脯氨酸、蛋氨酸、谷氨酸、甘氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸、天门冬氨酸、丙氨酸、组氨酸、半胱氨酸、异亮氨酸等17种氨基酸。其中必需氨基酸的含量为49.7 mg/g,占氨基酸总量的31.20%;儿童必需氨基酸的含量为30.6 mg/g,占氨基酸总量的19.20%;含量最高的是谷氨酸(28.7 mg/g,占氨基酸总量的18.03%);其次是精氨酸(27.5 mg/g,占氨基酸总量的17.30%)。[结论]该方法操作简便,灵敏度高,结果准确,可靠。龙牙百合花中氨基酸的种类齐全,含量丰富,具有很高的开发利用价值。

卷丹和百合化学成分与提取方法研究进展

介绍了近十年来,卷丹和百合化学成分和提取方法方面的研究进展,主要集中在甾体皂苷、多糖和秋水仙碱;甾体皂苷的提取方法有醇提—大孔树脂吸附法、醇提—正丁醇萃取法;多糖的提取方法有水提醇沉法和复合酶法;秋水仙碱的提取方法有有机溶剂提取法和超临界二氧化碳流体萃取法。

紫外可见分光光度法测定不同产地龙牙百合中皂苷含量

为建立龙牙百合总皂苷的测定方法,并确定不同产地龙牙百合中皂苷的含量,以便控制龙牙百合药材的质量,采用香草醛-高氯酸显色,在535 nm处,利用紫外可见分光光度法测定了10个批次的龙牙百合中总皂苷的含量。结果表明,10个不同产地龙牙百合中皂苷的含量,分别是:8.39%、8.11%、8.24%、7.62%、7.38%、9.02%、8.83%、8.87%、9.21%、9.17%,RSD分别为:1.22%、0.87%、0.93%、1.32%、0.86%、1.37%、0.94%、1.39%、1.55%、1.61%。结果表明,该法准确、可靠、稳定性好,可作为龙牙百合皂苷定量分析的有效方法。

龙牙百合叶总黄酮提取工艺及抗氧化性研究

以龙牙百合叶片为研究对象,采用优化超声波法提取龙牙百合叶片总黄酮,对黄酮进行了抗氧化活性分析,并在单因素试验的基础上采用正交实验法,研究了乙醇浓度、料液比、提取时间、提取温度对总黄酮提取效果的影响,并确定了最佳工艺条件,对其体外抗氧化活性进行了初步研究。结果表明:最佳工艺条件为提取温度50℃,乙醇浓度80%,料液比1∶5g·mL^(-1),提取时间30min。此条件下,百合叶总黄酮含量为12.691mg·g^(-1)。抗氧化试验结果表明,龙牙百合叶总黄酮提取液对DPPH·的清除效果优于相同浓度下维生素C溶液,并呈显著差异。

百合枯萎病病原菌分离鉴定及药剂室内筛选

采用组织分离法对枯死的百合(Lilium brownii var.viridulum Baker)鳞茎进行病原分离,根据分离物的培养性状、颜色、孢子大小,结合显微镜检测和分子生物学ITS序列测定,该菌株被鉴定为尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)。对菌株进行柯赫氏法则验证,证明尖孢镰刀菌是导致百合枯萎病的病原菌。选择15种杀菌剂对该病原菌进行室内毒力测定。结果表明,广清、绿群、洛菌腈、氟硅唑抑菌效果明显强于其他药剂。