Isolation of LiLFY1 and Its Expression in Lily (Lilium longiflorum Thunb.)

LFY family genes play a conserved role in regulating flowering. In this study, the cDNA of LiLFY1 was isolated with the strategy of RT-PCR in combination with RACE from lily （Lilium longiflorum Thunb.）. LiLFY1 encodes a LFY transcriptional factor. The alignment analysis of the deduced LiLFY1 protein with other known LFY family proteins indicates that LiLFY1 is highly homologous with rice RFL and maize FLL. The result of Southern hybridization showed that there are two copies of LFY family genes in lily. LiLFY1 is expressed in young flower buds and shoot apical meristem （SAM） but not in roots, shoots, mature leaves, and mature floral organs. The cloned LiLFY1 gene may be applied to genetic engineering aiming for regulating the flowering time in lily.

卷丹百合黄酮提取物抗氧化活性研究

该实验旨在研究卷丹百合黄酮提取物抗氧化活性。以化学法、秀丽隐杆线虫模型为评价方法,用自由基清除率、抗氧化酶活力及线虫寿命等为指标,探究卷丹百合黄酮化合物的抗氧化能力。结果表明,卷丹百合黄酮提取物在料液比为1:10(g:mL)时,抗氧化活性达到最大值,其中DPPH自由基清除率为83.46%,ABTS阳离子自由基清除率为73.26%。卷丹百合黄酮提取物能显著提高线虫体内抗氧化酶活力和谷胱甘肽含量,提高线虫抗氧化能力,起到延长线虫寿命的作用。经过卷丹百合黄酮提取物处理的线虫在氧化应激条件下平均存活时间能达到10 h。卷丹百合黄酮提取物具有良好的抗氧化活性,具备开发食品抗氧化剂或功能食品的潜力。

不同植物生长调节剂对卷丹百合扦插繁殖效果的影响

本试验选取生长健壮、无病虫害的优良卷丹鳞茎为试验材料,比较不同浓度(100、300、500 mg/L)IAA、IBA、KT、6-BA处理对卷丹扦插繁殖的鳞茎发生率、繁殖系数、生根数、根长以及新生小鳞茎直径的影响。结果表明,生长调节剂种类与浓度共同影响卷丹鳞片的扦插繁殖效果,其中不同生长调节剂种类之间的影响差异更为明显。与IAA、6-BA、KT相比,IBA处理卷丹的繁殖效果较好,且以100 mg/L IBA处理效果最佳。与6-BA和KT处理相比,IAA和IBA处理卷丹鳞茎发生率较高,其中300 mg/L IBA处理的鳞茎发生率高达100%。

卷丹与7个百合杂交亲和性的初步研究

【目的】本研究旨在探究卷丹与不同百合种及品种间的杂交亲和性,以期培育出优良性状的卷丹杂交后代。【方法】将卷丹与7个百合种及品种进行远缘杂交,首先采用液体培养基悬滴法测定父本百合的花粉生活力,杂交后统计杂交组合的果实膨大率,并对获得的杂交蒴果进行胚拯救以获得杂种苗。【结果】实验结果表明,7种百合花粉在9号萌发液中(150 g/L蔗糖,200 mg/L硼酸,75 mg/L氯化钙)普遍萌发较好,其中龙牙百合、‘Strawberry Event’的花粉萌发率高于其他父本品种,花粉活力较好。卷丹与亚洲百合杂种系品种远缘杂交的果实膨大率较高,其中与‘Strawberry Event’杂交的果实膨大率最高,为14.7%,并且只有此杂交组合成功获得了2株杂交后代。【结论】本研究表明卷丹与亚洲百合杂种系杂交亲和性更好,为今后卷丹的远缘杂交育种提供了技术支持。

基于抗氧化活性百合提取工艺研究

目的:研究百合抗氧化活性成分及其制备工艺。方法:采用热回流提取法制备百合提取物,以抗氧化活性为筛选指标,正交试验法优选百合提取工艺;DPPH法和羟自由基清除法评价百合提取物的抗氧化能力;比色法检测百合多糖、黄酮、多酚含量;对百合抗氧化活性与多糖、黄酮、多酚成分进行相关性分析。结果:百合抗氧化物质的最佳提取条件为溶剂20%乙醇、固液比1∶12、提取时间100 min,百合对DPPH自由基的清除率为88.2%,百合对DPPH自由基的能力与黄酮呈显著强正相关。结论:百合具有较强的抗氧化活性,主要活性成分是黄酮。

高海拔环境下栽培措施对藏产卷丹百合鳞茎生长特性的影响

本研究旨在建立适合我区的卷丹百合(Lilium lancifolium Thunb.)种植技术体系。选用中等带茎苗和大田种植生长4年的藏产卷丹百合鳞茎为实验材料,探究不同栽培措施对卷丹百合鳞茎生长特性的影响情况。结果说明,我区藏产卷丹百合田间试验适宜的种植密度为株距25 cm,产业推广过程中建议种植密度可以调整为株距15 cm,待出苗齐整后铺设防草布,栽培第4年且选用抹除珠芽并打顶的田间管理方式,可以提高其产量,以期能够为藏产卷丹百合在我区推广应用奠定一定的研究基础。

不同温度处理对卷丹百合珠芽生理生化指标的影响

以卷丹百合珠芽为材料,研究其在5、10、15、20℃4种温度处理下,珠芽内部的生理指标变化以及不同温度处理对出苗情况的影响。结果表明,不同温度处理一段时间后,珠芽的组织含水量均有所下降,且温度越高下降速度越快;珠芽可溶性蛋白含量随处理时间的延长逐渐增加,5℃处理56 d后其含量高于其他处理,但不同温度处理之间无显著差异。温度对可溶性糖含量的影响较大,20℃处理下珠芽可溶性糖在前14 d有所下降,随后逐步回升;而3个低温处理下可溶性糖含量在前14 d没有明显下降,14~28 d显著上升,从28 d开始迅速下降并在42 d时到达最低值。与此同时,珠芽内的淀粉含量从14 d开始迅速上升,28 d时达到峰值,处理温度越低上升幅度越小,处理结束时5℃处理珠芽淀粉含量最低。将不同温度处理的珠芽分别在处理14、28、42和56 d后进行栽植,结果表明,5℃处理56 d的珠芽出苗速度最快,且出苗率最高(56.67%)。综上所述,利用卷丹百合珠芽进行繁殖,5℃冷藏处理56 d是最佳选择。

卷丹种球分级标准研究

为了研究卷丹种球分级标准,以湖南、湖北、贵州、重庆等卷丹主产区的种球资源为材料,测定种球和籽球周径、重量、鳞茎高等指标,并将各项数据进行主成分分析、K-均值聚类分析,以周径和重量为主要分级依据,建立了卷丹种球和籽球Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级分级标准,对不同等级种球和籽球进行田间种植试验。结果表明,Ⅰ级种球长势好,产量较高,Ⅲ级种球长势差,产量较低。为保证高产;卷丹生产用种球应控制在Ⅱ级以上。此方法制定的质量分级标准科学、可行,可作为卷丹种球质量控制标准,为卷丹规范化栽培提供参考。

土壤镉污染对卷丹百合生长和镉分布的影响

为探究卷丹百合对镉污染的响应,开展不同镉浓度梯度(2.5、3、3.5、4 mg·kg^(-1))的盆栽试验,研究了不同浓度镉污染卷丹百合种球萌发、生长速率、生物量积累、生理响应和各器官镉含量的影响,分析了镉分布规律及各器官镉含量与土壤镉浓度的关系。结果表明:(1)C4(4 mg·kg^(-1))镉浓度显著降低卷丹百合发芽率、发芽势、生长速率,C2(3 mg·kg^(-1))、C3(3.5 mg·kg^(-1))镉浓度分别增加了百合鳞茎生物量的13.84%和38.96%。(2)随土壤镉浓度增加,丙二醛(MDA)的含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性呈先升后降再升趋势,过氧化氢酶(CAT)和过氧化物酶(POD)活性随镉浓度的增加呈先增后降趋势,C4浓度对SOD、CAT和POD具有抑制作用,对MDA的含量有促进作用。(3)各器官镉含量随土壤镉浓度的增加而增加,同一镉污染下,镉分布规律为地上茎>叶>花>根>鳞茎;与对照相比,各器官镉富集系数均显著下降,地下部转运系数显著上升,而地上部各器官转运系数呈下降趋势。(4)土壤镉含量与卷丹百合各器官都具有极显著正相关性,且土壤镉与鳞茎镉含量的相关性最高。综上所述,卷丹百合耐镉性能较好;卷丹百合通过调节生理特性、生物量以及镉富集和转运能力等方式来降低土壤镉污染的危害;鉴于土壤与鳞茎镉含量具有最高的正相关性,控制土壤镉浓度是降低鳞茎镉含量,保证安全生产的重要措施。

不同叶面肥对药用百合生长特性、产量及品质的影响

为了筛选促进药用百合生长发育和提高产量与品质的叶面肥,以药用百合品种卷丹为试材,在大田条件下研究了纯品氨基酸、自制剂2、自制剂1、生根壮苗剂和细胞分裂素叶面肥对药用百合农艺性状、产量和品质的影响。结果表明:各叶面肥处理对百合的生长均有一定的促进作用,其中自制剂2处理能显著提高百合旺长期的株高和叶数,自制剂1处理能显著提高百合现蕾期的株高和茎粗,还能显著提高百合旺长期和现蕾期的叶数;各叶面肥处理均能提高百合的叶绿素含量和产量,其中,自制剂2和自制剂1处理百合旺长期和现蕾期的叶绿素含量均显著高于清水处理(CK),自制剂1处理的产量最高,其次是自制剂2,分别为1 282.12和1 115.37 kg/km~2,且均显著高于CK,分别比CK增产47.55%和28.36%;除自制剂1处理的多糖含量外各叶面肥处理的黄酮含量和多糖含量均高于CK,但差异不显著。因此,自制剂1和自制剂2叶面肥促进百合生长和提高产量的效果明显,可以在百合生产中推广应用。

卷丹百合组培技术研究

以卷丹百合鳞片为外植体,通过调节不同激素的质量浓度,确定卷丹百合组织培养快繁体系。结果表明:用卷丹百合的内部鳞片作为外植体感染率最低,诱导培养基配方为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂7 g/L;增殖培养基配方为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂7 g/L;生根培养基配方为:1/2MS+NAA 0.5 mg/L+蔗糖60 g/L+琼脂7 g/L,为日后生理抗性研究及分子研究提供前期基础。

不同基肥对药用百合生长特性及产量的影响

目的:探讨不同肥料做基肥施用对药用百合生长发育和产量的影响。方法:以药用百合品种卷丹为供试材料,在大田条件下设置4种施基肥处理:化肥、普通有机肥、稀土有机肥和多元有机肥,测定各处理条件下药用百合株高、叶长、叶宽、功能叶片数和药用百合产量。统计分析,比较4种施基肥处理的效果。结果:施用化肥做基肥的处理,在苗期和生长旺期,百合株高高于其他各有机肥处理;多元有机肥和稀土有机肥处理的植株在现蕾期后,株高高于化肥处理的;各有机肥处理的叶长、叶宽、功能叶片数、产量均高于化肥处理,其中多元有机肥处理达到了显著水平。结论:以化肥做基肥,在生育前期能促进百合生长发育;合理的施用多元有机肥对促进百合生长发育、提高百合的产量具有明显的效应。

宜兴百合脱毒技术

1997～ 2 0 0 0年以宜兴百合为试材 ,对 3种脱毒方法 (茎尖培养、热处理结合茎尖培养、花药培养 )进行研究。结果表明 ,珠芽经 (5 0± 1)℃热水处理 40min ,培养 30d后 ,切取 0 8～ 1 0mm茎尖培养的脱毒效果最好 ,脱毒率达 10 0 % ;(38± 1)℃热空气处理后切取茎尖培养也能提高脱毒效果。只有通过病毒鉴定的试管苗 ,方能用于生产。

卷丹中新甾体皂苷的分离和鉴定

目的 研究卷丹 (LiliumlancifoliumThunb .)鳞叶的化学成分。方法 用各种色谱技术进行分离和纯化 ,用MALDI TOF MS ,HR SI MS ,IR ,1 HNMR ,1 3CNMR ,DEPT ,1 H 1 HCOSY ,HMQC和HMBC等光谱和波谱技术鉴定其结构。结果 从卷丹鳞叶中分得 2个甾体皂苷 ,鉴定化合物 1为薯蓣皂苷元 3 O {O α L 鼠李糖基 (1→ 2 ) O [β D 木糖基(1→ 3) ] β D 葡萄糖苷 ,化合物 2为薯蓣皂苷元 3 O {O α L 鼠李糖基 (1→ 2 ) O [α L 阿拉伯糖基 (1→ 3) ] β D 葡萄糖苷。结论 化合物 2为新化合物 ,命名为卷丹皂苷A。

超声波提取卷丹鳞茎中总黄酮研究

本文对超声波方法和传统方法提取卷丹鳞茎中总黄酮进行试验比较,同时对影响超声波提取卷丹鳞茎中总黄酮的多个因素进行正交实验分析。结果表明:超声提取总黄酮效果较好;超声波法提取的最佳方法条件为:80%乙醇,料液比1∶30,在80℃下提取40 min,连续提取2次,黄酮的总提取率可达到99.25%。

宜兴百合鳞茎不定芽的诱导及增殖

以宜兴百合（Lilium lancifalium Thunb.）鳞片为外植体诱导小鳞茎的形成,并通过正交设计增殖鳞茎不定芽.结果在MS＋1.0 mg/L 6-BA＋ 0.1 mg/L NAA培养基上,鳞片以直接发生方式形成了鳞茎不定芽,诱导率为100％,平均不定芽数为5.5.6-BA浓度在0.4～1.2 mg/L范围内,鳞茎不定芽的增殖率随6-BA浓度的升高而增大,在MS＋1.2 mg/L 6-BA ＋0.2 mg/L IAA ＋0.1 mg/L NAA培养基上,不定芽的增殖系数为3.83,不定芽在1/2MS＋1.0 mg/L NAA培养基上生根良好.

卷丹百合提取物的体外抑菌作用研究

为探讨百合不同溶剂提取物的抑菌作用,采用琼脂打孔扩散法和稀释法对百合不同溶剂提取物进行抑菌实验研究。结果表明,百合的不同溶剂提取物对细菌和真菌(金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、藤黄微球菌、绿脓杆菌、黄霉菌以及粪肠球菌)均有一定程度的抑制效果,为百合的进一步开发提供依据。

不同播期对药用百合生长特性及产量的影响

为探讨不同播期对药用百合生长发育和产量的影响。以药用百合卷丹为供试材料,研究在大田条件下,不同播种期的药用百合的生长特性和产量的变化。结果显示:播期为9月15日和10月15日的产量较高,随着播期的延后,百合植株的株高、叶片数量、茎粗、叶绿素含量等农艺性状及产量呈下降趋势。所以药用百合卷丹在长沙地区8月至12月份均可播种,以9月和10月份为最佳播种时期。

基于UPLC-Q-TOF-MS法分析百合珠芽化学成分及其薯蓣皂苷元抗肿瘤活性研究

为建立超高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)快速鉴定百合珠芽中10种化学成分的分析方法,并对薯蓣皂苷元进行抗肿瘤研究。实验采用Thermo Hypersil Gold C_(18)柱(100 mm×2.1 mm,1.9μm);乙腈(A)-0.5%乙酸(B)为流动相,梯度洗脱;电喷雾离子源(ESI),正负离子同步监测。采用CCK8法进行薯蓣皂苷元抗肺肿瘤A549细胞、胃肿瘤HGC-27细胞的药效筛选。结果表明,通过二级高分辨质谱分析结合相关文献,共鉴定对香豆酸、薯蓣皂苷、槲皮素等10个化合物。药理研究显示,薯蓣皂苷元对肺癌A549细胞增殖只有微弱的抑制活性,而对胃癌HGC-27细胞增殖表现出较强的抑制作用。本试验证实UPLC-Q-TOF-MS/MS可从保留时间、紫外吸收光谱、精确相对分子质量、分子式和二级结构碎片等方面对百合珠芽的主要成分进行定性分析,为寻找百合珠芽中活性物质提供一种快速准确的分析方法,且揭示百合珠芽中鉴定得到的单体成分可能具有较强的抗肿瘤活性。

加工方法对百合质量的影响研究

目的:研究加工方法对百合质量的影响,为百合加工方法的规范化提供参考依据。方法:新鲜百合样品分别采用煮制和蒸制2种烫片方法、不同干燥方法(包括热风烘干、微波干燥、远红外干燥和冷冻干燥)进行加工,样品中酚性甘油酯类、核苷、氨基酸及多糖等成分分别采用超高效液相-二极管阵列检测器(UPLC-DAD)、超高效液相-三重四级杆质谱联用仪(UPLC-TQ/MS)及紫外-可见分光光度法(UV)测定。结果:烫片过程,煮5～8min和蒸8～10min样品不仅外观色泽较佳,而且各成分含量较高;干燥方法,60～80℃烘干和冷冻干燥法较好。结论:烫片是百合干加工过程中必不可少的环节;确定最佳工艺条件为煮5～8min,60～80℃烘干或冷冻干燥。