百合总RNA提取方法的比较和分析

以卷丹、麝香百合品种富田和离体鲜切花的花蕾为材料,比较Trizol法、异硫氰酸胍法、CTAB改进法和SDS改进法提取总RNA的效果,结果表明,SDS改进法能有效去除多糖,提取的RNA中28SrRNA亮度约为18SrRNA的两倍,OD260/OD280值介于1.7～2.2之间,卷丹RNA得率为132.52μg/g,富田RNA得率为186.88μg/g。进一步用SDS改进法分别提取富田外轮花瓣、内轮花瓣、雄蕊、雌蕊、叶和茎的RNA,同样可以获得完整的纯度高的RNA,其中28SrRNA亮度约为18SrRNA的两倍,OD260/OD280值介于1.7～2.2之间,说明此方法适用于百合各个组织RNA的提取。经RT-PCR获得了花发育基因的特异性条带,说明用SDS改进法从百合中提取的RNA质量好、产率高、完整性强,完全适合于百合进一步的分子生物学研究。

富含多糖葡萄风信子花瓣总RNA提取方法研究

在普通CTAB法与SDS法提取RNA的基础上,从去除多糖和DNA污染两个方面进行优化,筛选出适于富含多糖类葡萄风信子花瓣RNA提取的方法,经检测OD260/280值在1.8～2.0之间,电泳28S条带和18SrRNA条带都很清亮,比值约1.5.对改进的CTAB法提取的总RNA进行RT-PCR能扩增出所需目的条带.有效去除多糖类物质污染对于富含多糖类花瓣组织RNA提取很重要.

川贝母鳞茎总RNA提取方法的研究

以暗紫贝母(Fritillaria unibracteata Kisao et K.C.Hisa)新鲜鳞茎为试材,选取3种有效提取富含油脂、多糖和酚类植物材料总RNA的方法,比较提取总RNA的效果。结果表明,改良SDS酸酚法能有效去除大部分多糖和DNA,RNA条带清晰、亮度好,28S rRNA的亮度约为18S rRNA的2倍,A260nm/A280nm为1.85,A260nm/A230nm为2.06,得率为73μg/g。提取的总RNA经RT-PCR获得了3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(3-hydroxy-3-methylglutaryl-CoA reductase,HMGR)基因的特异性条带,说明改良SDS酸酚法从川贝母中提取的RNA质量好、产率高、完整性强,完全适合于进一步的分子生物学研究。