蛞蝓粗提物对Hela细胞的抑制作用及其活性成分的研究

目的 :研究蛞蝓粗提物对体外培养的人子宫颈癌细胞Hela的抑制作用 ,并进一步探讨蛞蝓抗癌有效成分。方法 :用盐析法分离蛞蝓粗提物 ,用MTT法、倒置显微镜观察蛞蝓粗提物对体外培养的Hela细胞的抑制作用。结果 :MTT法证实蛞蝓粗提物以及盐析所得各组分对Hela有明显的抑制作用。结论 :初步推测蛞蝓抗癌有效成分不是蛋白 ,可能是多糖类。

蛞蝓糖蛋白提出多糖对肺腺癌作用的实验研究

目的:探讨蛞蝓糖蛋白提出多糖(LE-DZ)在体内外对肺腺癌的抑制作用。方法:细胞计数法检测LE-DZ对人肺腺癌A549细胞生长增殖的抑制作用,并绘制细胞生长曲线;平板克隆实验测定细胞集落形成率;建立小鼠Lewis肺癌模型,测皮下移植瘤体积绘制体积生长曲线,测移植瘤重量,计数小鼠肺表面转移结节数,并计算出抑瘤率和肺转移抑制率;光镜和电镜观察肿瘤组织病理变化。结果:在体外,1、10、100μg/ml浓度LE-DZ均能抑制人肺腺癌A549细胞增殖,并呈浓度和时间依赖性;与对照组比较,细胞集落形成率明显下降(P<0.05)。在体内,LE-DZ能够抑制小鼠Lewis肺癌移植瘤生长和自发性肺转移,25、50、100μg/ml浓度LE-DZ瘤重抑制率分别为19.65%、39.81%、50.96%,肺转移抑制率分别为23.08%、43.27%、68.27%,且呈浓度依赖性。病理学观察结果,LE-DZ可引起肿瘤细胞坏死,诱导肿瘤细胞凋亡。结论:LE-DZ在体外能抑制肺腺癌A549细胞增殖,在体内能抑制小鼠Lewis肺癌皮下移植瘤生长和自发性肺转移,并诱导癌细胞凋亡。

蛞蝓冻干粉对支气管哮喘的治疗作用

目的:研究蛞蝓冻干粉对支气管哮喘的治疗作用。方法:运用氢氧化铝加卵白蛋白建立豚鼠支气管哮喘模型,观察蛞蝓冻干粉对支气管哮喘的治疗作用及对卵蛋白致敏豚鼠肺支气管灌流量、肺泡灌流液和血清中炎症因子的影响。结果:蛞蝓冻干粉能减少诱发豚鼠哮喘的死亡数,延长诱喘潜伏期(P<0.05),其抗哮喘作用与对照药氨茶碱相当;能显著降低哮喘豚鼠的外周血和肺泡灌洗液的白细胞计数以及肺组织嗜酸性粒细胞浸润(P<0.05),且在中剂量63 mg/kg时,药物达到最佳效应;氨茶碱和蛞蝓冻干粉中、高剂量治疗组豚鼠肺支气管灌流量显著增加,血清和肺泡灌洗液(BALF)中IL-2和IL-4显著降低(P<0.05)。结论:蛞蝓冻干粉能显著抑制支气管哮喘的发生。

蛞蝓危害与防治技术研究概况

综述了蛞蝓的种类、主要危害和防治方法。

蛞蝓粗提物对H14细胞抑制作用的药效研究

目的 :研究蛞蝓粗提物对体外培养的人肺癌细胞H14的抑制 ,以及诱导其分化、凋亡的作用。方法 :采用倒置显微镜下观察和台盼蓝染色、DNA琼脂糖凝胶电泳、MTT等方法 ,观察体外培养的H14被蛞蝓粗提物作用后的形态学及生化变化。结果 :MTT法证实蛞蝓粗提物对H14细胞有明显抑制作用 ;倒置显微镜下可观察到细胞形态的改变 ;DNA电泳未显典型凋亡梯状条带。结论 :0 8%蛞蝓粗提物可诱导H14细胞发生凋亡达到抑制作用 ,0 4 %蛞蝓粗提物可促进H14细胞分化达到抑制作用。

植物颗粒剂对蜗牛和蛞蝓诱杀作用初报

利用药用植物的粉碎物配合对蜗牛和蛞蝓有引诱作用的食物引诱素及成型剂等原料制成的植物颗粒剂在室内和菜地进行诱杀实验,结果表明:植物颗粒剂对蜗牛和蛞蝓都有较强的诱杀效果,防效分别达到83.4%和67.8%,显示了一定的实用性.植物颗粒杀虫剂对环境无污染,对人畜及害虫天敌无毒害,是一种新型的低毒植物源农药.

十字花科蔬菜对蛞蝓生长发育的影响

在25℃、开灯1 h,关灯23 h(光照1L:23 D)、湿度20%~30%条件下,采用甘蓝、油菜、花椰菜、大白菜、小白菜饲养蛞蝓,研究蛞蝓的生物活性。结果表明:大白菜上蛞蝓的产卵前期、产卵量与其它4种蔬菜相比差异显著;用甘蓝饲养的蛞蝓平均每天增重量最大,为4.68 g,甘蓝上蛞蝓的种群趋势指数和平均体重增加值与其它4种蔬菜相比差异显著,小白菜和花椰菜上蛞蝓的种群趋势指数与油菜和大白菜相比差异显著。说明不同蔬菜对蛞蝓种群生命力的影响存在差异。

蛞蝓抗肿瘤作用研究概况

蛞蝓具有多种临床应用,对肿瘤的生长具有抑制作用,且毒副作用低,具有广阔的发展前景。

蛞蝓合并加温对荷S_(37)NIH小鼠的治疗作用

蛞蝓是有肺的软体动物,药用其全体,口服外用均可。我们以肿瘤平均直径(MD)为指标,以肿瘤平均直径倍增时间(MDDT)和荷瘤动物存活时间(AET)为终点,进行了加温合并蛞蝓混悬液的实验研究。结果表明:①43℃加温25min,对荷S_(37)肉瘤的NIH小鼠,有明显的治疗作用;②在首次灌喂蛞蝓混悬液1200mg/kg体重后,在不同的时间间隔加温43℃达25min,肿瘤的MDDT明显增加,并不同程度地延长了AET。

蛞蝓提取物联合5-氟尿嘧啶对肝癌细胞HCCLM3的凋亡诱导作用

目的:探讨蛞蝓提取物(Limax Extracts,LE)联合5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-Fu)对人肝癌细胞株HCCLM3的增殖抑制及凋亡诱导作用。方法:以人肝癌细胞株HCCLM3为研究对象,分为正常对照组、LE组、5-Fu组、LE+5-Fu联合组。采用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞活性,倒置显微镜下观察细胞凋亡形态学变化,异硫氰酸荧光素标记的膜联蛋白V/碘化丙啶(Annexin V-FITC/PI)双染流式细胞术定量检测细胞凋亡率,Western blot法检测凋亡蛋白Caspase-3的活化表达。结果:(1)LE和5-Fu单用或联用组对正常人肝细胞L-02未见明显抑制作用,但可抑制肝癌细胞HCCLM3的增殖并明显诱导其凋亡。(2)LE和联用组作用HCCLM3细胞早期凋亡率比5-Fu组高,而中晚期凋亡及坏死率却相反。(3)联用组在低浓度时具有很好的促凋亡作用,其促凋亡活力优于LE或5-Fu单用组,而且联用时可起到显著减毒增效作用。(4)LE和5-Fu单用或联用均可促进Caspase-3蛋白的活化,具有时间正效应,且LE组和联合组cleaved Caspase-3表达量高于5-Fu组。结论:LE和5-Fu联合或单用均能有效抑制HCCLM3细胞增殖,诱导其凋亡,其机制可能与激活Caspase-3表达有关。

蛞蝓多糖提取工艺的优选

目的优选蛞蝓多糖的最佳提取工艺。方法用水提取法从蛞蝓中提取多糖,从醇沉浓度、浸提温度、浸提比和浸提时间4个因素入手,进行正交优化试验。结果醇沉浓度、浸提温度为有极显著意义的因素,浸提比对多糖含量也有一定影响。综合考虑最佳提取工艺为醇沉浓度70%,浸提温度60℃,浸提比1:2,浸提时间4h。结论优选的蛞蝓多糖水提醇沉工艺经济、稳定、可行。

蛞蝓提取物抑制A549细胞及其小鼠移植瘤的生长

目的观察蛞蝓提取物(LE)对体外培养人肺癌(A549)细胞及其小鼠移植瘤生长的影响。方法运用平皿集落形成法,检测LE对A549细胞锚定依赖性生长的影响;通过光镜观察LE对小鼠移植瘤的组织形态改变;小鼠移植瘤模型治疗实验评估LE在体治疗肺癌的有效性。结果LE可抑制体外培养A549细胞锚定依赖性生长,呈剂量依赖性。LE腹腔注射给药能导致小鼠移植瘤组织的局灶性坏死;50 mg/kg,100 mg/kg LE腹腔注射给药具有抑制小鼠移植瘤生长作用。结论蛞蝓提取物对人肺癌A549细胞有生长抑制作用。

蛞蝓提取物对环磷酰胺治疗肝癌的增效减毒作用

目的:探讨蛞蝓提取物(LE)对环磷酰胺(CTX)治疗肝癌的增效减毒作用。方法:将小鼠随机分为正常组,模型组,CTX组(0.02 g/kg),LE低、中、高剂量组(即LEL、LEM、LEH组,0.6、1.2、2.4 g/kg),CTX+LE低、中、高剂量联用组(即CTX+LEL、CTX+LEM、CTX+LEH组,剂量同各单药组),每组10只。除正常组外,其余各组小鼠均于左腋下接种小鼠肝癌细胞H22以复制荷瘤模型。接种24 h后,正常组和模型组小鼠灌胃生理盐水,各给药组小鼠分别灌胃相应药物,每日1次,连续10 d。末次给药后第2天,观察各组小鼠一般情况,测定体质量和胸腺指数(LI)、脾指数(SI),检测抑瘤率,并采用金氏公式评估联合用药的效果(q);检测模型组、CTX组和各联用组小鼠的白细胞(WBC)、红细胞(RBC)、血小板(PLT)计数以及血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(ALT)、血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)含量,并采用比色法和酶联免疫吸附测定(ELISA)法分别检测上述各组小鼠肿瘤组织中丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)、还原型谷胱甘肽(GSH)活性以及血管内皮生长因子(VEGF)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)水平;采用免疫组化法检测模型组、CTX组和CTX+LEM组小鼠肿瘤组织中癌基因蛋白(p53、Bcl-2、Bax)的表达水平。结果:模型组小鼠精神不佳,且出现多饮、多食症状;其体质量、TI、SI虽较正常组无明显异常(P>0.05),但其WBC计数、AST含量均显著升高,ALT、BUN含量均显著降低(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,各给药组小鼠上述症状有所改善;各给药组的瘤体质量,CTX组的TI、SI以及各联用组的TI均显著降低,但LEL组、LEH组的瘤体质量,LE单用组及各联用组的TI、SI均显著高于CTX组,各联用组的瘤体质量均显著低于CTX组(P<0.05或P<0.01);各给药组的抑瘤率为29.58%~72.08%,CTX+LEL组、CTX+LEM组、CTX+LEH组的q值分别为1.03、0.97、0.86。与模型组比较,CTX组小鼠的WBC计数和AST、BUN含量,各联用组的MDA含量,各给药组的VEGF、TNF-α、IL-6水平以及CTX组和CTX+LEM组的Bcl-2表达水平均显著降低,各给药组的SOD、GSH活性以及CTX+LEM组的p53表达水平,CTX组和CTX+LEM组的Bax表达水平均显著升高(P<0.05或P<0.01);但各联用药组的WBC计数和AST含量以及CTX+LEM组的ALT含量,CTX+LEH组的SOD活性和CTX+LEM组的GSH活性均显著高于CTX组,CTX+LEH组的MDA含量,CTX+LEM组、CTX+LEH组的VEGF、TNF-α水平和各联用组的IL-6水平均显著低于CTX组(P<0.05或P<0.01)。结论:LE和CTX联用具有相加的抑瘤作用,且LE可减少CTX致小鼠免疫功能减退、骨髓抑制等毒性反应,具增效减毒的作用。这种作用可能与抗氧化应激、抑制血管生成和炎症因子分泌以及调控凋亡蛋白的表达有关。

蛞蝓有效提取物抑制宫颈癌HeLa细胞裸鼠移植瘤生长

目的观察蛞蝓有效提取物(EL-3)对宫颈癌He La细胞裸鼠移植瘤生长的影响。方法制备宫颈癌He La细胞裸鼠移植瘤模型,检查EL-3对瘤体积、瘤重及VEGF蛋白表达的影响,评估EL-3在体内治疗宫颈癌的有效性。结果 EL-3(10、30和100 mg/kg)实验组的瘤体积显著低于生理盐水组(P<0.05),同时,其移植瘤的瘤重抑制率分别为42.0%、67.0%和83.0%,提示EL-3在体内抗宫颈癌作用较强,且呈剂量依赖性;采用免疫组化检测证实EL-3下调宫颈癌裸鼠移植瘤细胞VEGF蛋白表达。结论 EL-3具有抑制宫颈癌He La细胞裸鼠移植瘤生长的作用,其机理可能与抑制肿瘤血管生成有关。

蛞蝓冻干粉对支气管哮喘大鼠哮喘潜伏期、血清及肺泡灌洗液干扰素γ、白细胞介素4水平的影响

目的观察蛞蝓冻干粉对支气管哮喘大鼠哮喘潜伏期、血清及肺泡灌洗液干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素4(IL-4)水平的影响。方法将40只SD清洁级大鼠随机分为蛞蝓低剂量组、蛞蝓高剂量组、正常组、模型组、地塞米松组,每组8只。除正常组外,其余4组注射氢氧化铝和卵清白蛋白建立支气管哮喘大鼠模型;建模完成后,正常组采用生理盐水雾化激发,其余各组大鼠采用10mL2%卵清白蛋白进行雾化激发哮喘,1次/d,持续3周。每次激发哮喘前1h蛞蝓低剂量组、蛞蝓高剂量组、地塞米松组分别给予23mg/kg蛞蝓冻干粉、92mg/kg蛞蝓冻干粉、1mg/kg地塞米松溶液灌胃,模型组及正常组给予等量生理盐水灌胃。比较各组大鼠哮喘潜伏期;末次给药1h后,采用酶联免疫吸附测定法测定大鼠血清及肺泡灌洗液中IL-4、IFN-γ含量。结果地塞米松组、蛞蝓高剂量组哮喘潜伏期均长于模型组(均P<0.05),而地塞米松组与蛞蝓高剂量组间、模型组与蛞蝓低剂量组间哮喘潜伏期比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。正常组、地塞米松组、蛞蝓高剂量组血清IL-4含量均低于模型组,血清IFN-γ含量均高于模型组(均P<0.05);其余4组肺泡灌洗液IL-4含量均低于模型组,肺泡灌洗液IFN-γ含量均高于模型组(均P<0.05)。结论蛞蝓冻干粉可以延长支气管哮喘大鼠潜伏期,降低其血清及肺泡灌洗液IL-4含量,提高IFN-γ含量。

蛞蝓的化学成分和药理作用研究进展

从化学成分和药理作用两方面综述蛞蝓的研究进展。蛞蝓含有蛋白质、蛞蝓多糖、甾醇、单胺类、挥发油等多种化学成分。药理研究显示,蛞蝓具有抗肿瘤、抗炎、镇咳、祛痰、平喘、抗氧化、抗病毒等作用,临床上多用于防治癌症、支气管哮喘、慢性阻塞性肺疾病等。

实验室中变形虫的培养初探

根据变形虫的结构特点及其生活习性,在室温条件下自制培养液培养大变形虫。野外采集种源,室内恒温培养蛞蝓变形虫。

仙龙抗癌胶囊薄层色谱鉴别

目的 :为控制仙龙抗癌胶囊质量。方法 :采用薄层色谱法对仙龙抗癌胶囊中蛞蝓、红参、三七、延胡索进行定性鉴别 ,其中蛞蝓的薄层色谱鉴别首次在制剂中发表。结果 :方法简单 ,阴性对照无干扰。结论 :可做为该产品质量的控制方法。

蛞蝓冻干粉对慢性支气管炎的改善作用研究

目的:研究蛞蝓冻干粉对慢性支气管炎的改善作用。方法:运用二氧化硫(SO2)刺激法复制小鼠慢性支气管炎模型,观察蛞蝓冻干粉的止咳作用;采用气管段酚红法观察蛞蝓冻干粉的祛痰作用;运用气管内注入脂多糖(PLS)法复制大鼠慢性支气管炎模型,采用喷雾致喘法观察蛞蝓冻干粉的平喘作用;取气管及肺组织,观察大体标本的情况,然后切片并行HE染色,观察蛞蝓冻干粉对慢性支气管炎模型大鼠肺部炎症病理改变的影响。结果:高、中剂量蛞蝓冻干粉能显著延长慢性支气管炎小鼠的咳嗽潜伏期,减少咳嗽次数(P<0.05);使小鼠的气管段酚红排泄量显著增加(P<0.05);能显著延长慢性支气管炎大鼠的引喘潜伏期(P<0.05);使大鼠气道内分泌物减少,气管上皮层基本完整,气管壁和腺体层变薄,黏膜下炎性细胞浸润减轻,支气管外周淋巴滤泡小。结论:蛞蝓冻干粉能显著减轻慢性支气管炎的咳、痰、喘症状,改善炎症病理损害,对慢性支气管炎有较好的治疗作用。

海南省广州管圆线虫中间宿主感染现状调查

目的了解海南省广州管圆线虫中间宿主感染现状,为继续开展防治工作提供科学依据。方法2018—2019年,按海南省的地理方位和水系分布,抽取与2006年一致的5个调查点,采集广州管圆线虫中间宿主螺蛳,以“肺检法”结合“匀浆法”检测中间宿主并查找广州管圆线虫幼虫。结果2018—2019年,在5个调查点共检测野外采集螺蛳1597只,广州管圆线虫幼虫平均感染率为6.39%(102/1597)。其中福寿螺、褐云玛瑙螺、蜗牛和蛞蝓感染率分别为7.95%(43/541)、6.45%(34/527)、15.91%(7/44)和3.71%(18/485)。福寿螺感染率琼中县较高为9.57%(11/115),海口较低为4.90%(5/102),各地感染率差异无统计学意义(χ^(2)=5.63,P>0.05)。褐云玛瑙螺的感染率儋州市较高为16.50%(17/103),三亚市最低为0.95%(1/105)。各地感染率差异有统计学意义(χ^(2)=12.89,P<0.05)。蜗牛感染率儋州市最高为33.33%(5/15),三亚市最低为0,各地感染率差异有统计学意义(χ^(2)=17.06,P<0.01)。蛞蝓感染率琼海市最高为9.43%(10/106),三亚市最低为0。各地感染率差异有统计学意义(χ^(2)=154.54,P<0.01)。农贸市场抽样检查中间宿主福寿螺521只,感染率为5.57%(29/521),其中儋州市感染率最高为8.57%(9/105),琼海市感染率最低为2.68%(3/112),各片区调查点间感染率差异无统计学意义(χ^(2)=3.264,P>0.05)。结论海南省广州管圆线虫主要中间宿主褐云玛瑙螺和福寿螺广州管圆线虫感染率明显下降,但局部地区褐云玛瑙螺感染率仍然偏高,今后宜继续开展健康教育和加强对中间宿主的监测,预防广州管圆线虫病的传播和流行。