LAL/GNB法筛选辐照鸡肉的应用研究

[目的]探讨内毒素检测(LAL)与革兰氏阴性菌计数(GNB)相结合的方法应用于辐照鸡肉的筛选的可能性。[方法]市售鸡肉丁以50g每份分装后,以γ射线进行辐照处理,剂量分别为0kGy、2kGy、6kGy,每个剂量各12份,通过革兰氏阴性菌的培养计数估计样品中存在的活的革兰氏阴性菌的量,通过内毒素浓度定量估计活的和死亡的革兰氏阴性菌总量,比较两者差异来判定是否经过辐照处理。[结果]辐照剂量为6kGy时,12个样品被检测出经过辐照处理。辐照剂量为2kGy时,8个样品被检测出经过辐照处理,4个样品检测出未经过辐照处理。辐照剂量为0kGy时,12个样品检测结果均为未经过辐照处理。[结论]LAL/GNB法可以应用于辐照鸡肉的筛选。

鲎试剂的研究及应用进展

鲎试剂已广泛用于细菌内毒素的检验,本文介绍了鲎试剂的生产、分类,用于细菌内毒素检查的反应原理和检测方法、应用领域以及国内外鲎试剂生产和质量的现状和研究进展,并提出了我国鲎试剂应用中急需解决的问题。

注射用阿奇霉素细菌内毒素检查方法的研究

考察了6批注射用阿奇霉素的细菌内毒素检查法的可行性。按《中国药典》2005年版细菌内毒素检查法。结果可见,浓度为0.2 mg.mL-1的样品稀释液对标示灵敏度为0.25 EU.mL-1的鲎试剂无干扰作用。本品稀释为0.2 mg.mL-1的溶液后,可用灵敏度为0.25 EU.mL-1的鲎试剂进行检测。

显色基质法在盐酸左氧氟沙星注射液热原检测中的应用

目的建立快速的盐酸左氧氟沙星注射液细菌内毒素定量检查法,替代凝胶法。方法使用显色基质鲎试剂对不同批号的盐酸左氧氟沙星注射液分别进行干扰试验,考察确立盐酸左氧氟沙星注射液内毒素定量检查法。结果表明标准曲线的线性相关系数r≥0.98,盐酸左氧氟沙星注射液在1∶32稀释级别无干扰作用。结论显色基质法与凝胶法比较,有灵敏、快速、能定量、重复性好的特点,可用于盐酸左氧氟沙星内毒素含量的测定。

鲎法检测奥硝唑注射液内毒素的增强抑制实验

目的:通过对鲎试剂的灵敏度试验,确定鲎法检测奥硝唑注射液细菌内毒素的可行性。方法:用鲎法对其细菌内毒素进行检测。结果:奥硝唑注射液对鲎试剂凝集没有增强抑制作用,可用标示灵敏度为0.25Eu·ml-1的鲎试剂检测样品的细菌内毒素。结论:该方法灵敏、简便,可用于检测奥硝唑注射液的内毒素。

鲎试剂检测减少临床热原反应的试验研究

证实了我国药品标准尚未采用鲎试剂进行细菌内毒素检查的药品葡萄糖氯化钠、硫酸庆大霉素等注射剂容易发生临床输液反应的原因,是各自污染的界于鲎法不合格而兔法合格之间的细菌内毒素,在临床合并用药时加在一达到了兔法不合格的污染量而造成的。

钙离子对细菌内毒素含量测定的影响

目的研究Ca^2+对细菌内毒素含量检测的影响,探讨其影响机制。方法向已知含量的细菌内毒素溶液中加入不同浓度的Ca^2+,用动态浊度法检测各样品中细菌内毒素含量。对检测结果进行离散系数,即CV值分析,确定干扰限值。对加入不同浓度Ca 2+的细菌内毒素进行核磁共振1 H谱研究。结果当Ca^2+浓度高于0.0020 mol/L时,检测结果的CV值较高;Ca^2+浓度越高,CV值越高,离散程度越大;当Ca^2+浓度达到1 mol/L时,检测结果低于检测限,呈现明显的假阴性。1 H谱研究发现,随着Ca^2+浓度的增高,处于低场的氢的化学位移向高场移动,Ca^2+浓度越高,移动越大。结论为获得准确的检测结果,当Ca^2+浓度高于0.0020 mol/L时,应先消除干扰,再测定细菌内毒素含量。Ca^2+可能通过影响细菌内毒素的空间构象来影响其与鲎试剂的反应。

鲎试剂检测自制200批注射剂热原的结果分析

通过使用鲎试剂对青岛医学院附属医院制剂室自制的200批注射剂进行热原检测的结果进行分析,认为鲎试验法操作简便,快速,灵敏度高,结果可靠,故应用鲎试验法检测注射剂热原是非常适宜的。

鲎试剂检测乌司他丁中细菌内毒素探讨

根据中国药典 2 0 0 0版二部内毒素检查法 ,对不同批号的乌司他丁进行了细菌内毒素检测 ,并与家兔法进行了比较。

注射用阿奇霉素磷酸二氢钠细菌内毒素检测方法的研究

目的对注射用阿奇霉素磷酸二氢钠进行凝胶法干扰试验,建立注射用阿奇霉素磷酸二氢钠细菌内毒素检查的试验方法。方法采用中国药典2010年版二部附录收载的细菌内毒素检查方法。结果浓度为0.10mg·m L-1的样品稀释液对标示灵敏度为0.125EU·m L-1的鲎试剂无干扰作用。结论使用细菌内毒素检查法检查注射用阿奇霉素磷酸二氢钠中的细菌内毒素是可行的,可用细菌内毒素检查法代替家兔热原检查法。

肝脏病患者血浆内毒素定量检测分析

本文采用鲎变形细胞溶解物（LAL）改良基质显色法对91例肝脏病患者和20例健康对照血浆内毒素进行定量检测。结果，急性肝炎血浆内毒素水平为65．36±30．41ng／L；重症肝炎为161．88±112．88ng／L；慢性活动性肝炎为92．25±56．18ng／L；肝硬化为76．03±46．09ng／L。与正常对照组（5．25±2．90ng／L）相比均显著增高，P＜0．001。各种肝病内毒素阳性率（≥50mg／L）分别为70％、100％、75％、89％．其中重症肝炎内毒素水平明显高于其他肝病组．P＜0．01。表明肝脏病患者大多伴有明显的内毒素血症，血浆内毒素的检出率及浓度与疾病的严重程度及预后有关。

78例病毒性肝炎血浆内毒素检测的临床分析

本文采用鲎试验对78例病毒性肝炎和20例健康人血浆内毒素定量检测，结果急性肝炎为70．14±30．40ng／L；慢性肝炎为105．03±66．03ng／L；重症肝炎119．07±66.44ng／L；原发性肝癌为139±35．59ng／L；对照组5．25±2．90ng／L．4组肝炎与对照组相比均有显著差异（P＜0．01）。78例肝炎患者ALT和血清脸红素（SB），重症肝炎和肝癌组血浆内毒素水平与ALT、SB增高一致．ALT分别为174．89±99.60u／L和134．30±63.75u／L；SB分别为145．36±51．95mmol／L和102．53±50．54mmol／L，其他两组与内毒素关系不大。表明肝炎患者血浆内毒素水平均有不同程度增高，对判断病情和预后有一定意义。

动态显色法定量检测磺达肝癸钠注射液中的细菌内毒素

目的:建立动态显色法测定磺达肝癸钠注射液中细菌内毒素含量。方法:依据2020年版《中华人民共和国药典》(通则1143细菌内毒素检查法)的要求,应用Pyros Kinetix^(■)Flex(PKF)细菌内毒素定量检测系统,使用动态显色法鲎试剂,建立细菌内毒素标准曲线,通过干扰预试验确定稀释倍数,测定供试品溶液中外加内毒素的回收率进行干扰试验,完成供试品中细菌内毒素含量的定量检测试验。Pyros^(■)EQS软件自动绘制并出具标准曲线,计算溶液中内毒素的绝对含量,生成报告储存在Oracle数据库中。结果:标准曲线的线性范围为0.001~0.125 EU·mL^(-1)(r=-0.9991),回归方程为lgT=-0.2658 lgC+2.818,供试品在稀释5000、10000、15000、16500倍时均对反应无干扰作用,细菌内毒素回收率在50%~200%范围内,4批供试品的内毒素定量检测结果均符合规定。结论:在Pyros Kinetix^(■)Flex(PKF)细菌内毒素定量检测系统平台,本法可用于磺达肝癸钠注射液中细菌内毒素含量的测定,可定量检测供试品中内毒素的含量。

鲎试验和家兔法测定干扰素和白蛋白中内毒素的比较

本文分别用鲎试验和家兔热原法对16批人白细胞干扰素及5批人血浆白蛋白中的内毒素进行了检测。两种方法检测人白细胞干扰素和人血浆白蛋白的符合率分别为81.75%和80%;阴性符合率为100%。

动态浊度法定量检测乳糖一水合物中细菌内毒素的含量

目的:应用美洲鲎试剂(Limulus Amebocyte Lysate,LAL)的动态浊度法,定量检测乳糖一水合物中细菌内毒素。方法:依据2015年版《中华人民共和国药典》<1143细菌内毒素检查法>的要求,应用Pyros Kinetix■Flex(PKF)细菌内毒素定量检测系统,使用葡聚糖抑制缓冲液稀释溶解LAL,建立细菌内毒素的标准曲线并确定稀释倍数,通过测定供试品溶液中外加内毒素的回收率进行干扰试验,并定量测定样品中的细菌内毒素含量。Pyros■EQS软件自动绘制并出具标准曲线,计算溶液中内毒素的绝对含量。结果:内毒素检测标准曲线浓度线性范围为0.001~0.032 EU·mL^-1(r=-0.9854),标准曲线回归方程为logT=-0.200logC+2.943;供试品在稀释100、300、500倍时均对试验无干扰作用,细菌内毒素回收率在50%~200%之间;4批样品的内毒素定量测定结果符合规定。结论:在Pyros Kinetix?Flex(PKF)细菌内毒素定量检测系统平台,使用LAL建立的动态浊度法,可用于乳糖一水合物的细菌内毒素定量检测。LAL有更高的灵敏度,葡聚糖抑制缓冲液可有效阻止由(1→3)-β-D-葡聚糖引起的干扰,提高试验的成功率,符合数据完整性的要求。

奥拉西坦注射液细菌内毒素检测方法的研究

目的对奥拉西坦注射液进行凝胶法干扰试验,建立奥拉西坦注射液细菌内毒素检查的试验方法。方法采用《中国药典》2010年版二部附录收载的细菌内毒素检查方法。结果浓度为12.5mg/mL的样品稀释液对标示灵敏度为0.25EU/mL的鲎试剂无干扰作用。结论使用细菌内毒素检查法检查奥拉西坦注射液中的细菌内毒素是可行的,可用细菌内毒素检查法代替家兔热原检查法。