miR-125a对子宫内膜癌细胞生物学行为的影响及机制

目的探讨微小RNA-125a(miR-125a)对子宫内膜癌(EC)细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭等生物学行为的影响及机制。方法常规培养人EC细胞(JEC、HEC-1B、Ishikawa细胞)和子宫内膜上皮细胞(ECS细胞)。用RT-PCR法检测细胞中miR-125a表达,筛选miR-125a表达最低的细胞为实验细胞。取对数生长期miR-125a表达最低的EC细胞,并将其随机分为miR-NC组、miR-125a mimics组,分别转染miRNA阴性对照miR-NC、miR-125a模拟物miR-125a mimics。用RT-PCR法检测miR-125a表达,用CCK-8实验检测细胞增殖活性(OD值),用平板克隆实验检测细胞集落形成能力,用流式细胞术检测细胞凋亡能力(凋亡率),用Transwell实验检测细胞迁移、侵袭能力,Western blotting法检测细胞内LIN28同系物B(LIN28B)蛋白表达。结果与ECS细胞比较,JEC、HEC-1B、Ishikawa细胞中miR-125a相对表达量均低(P均<0.05),且Ishikawa细胞miR-125a的相对表达量最低,将其作为实验细胞。与miR-NC组比较,miR-125a mimics组miR-125a表达高(P<0.05)。与miR-NC组比较,miR-125a mimics组培养24、48、72 h后OD值低,集落形成数少,凋亡率高,迁移细胞数、侵袭细胞数少,LIN28B蛋白相对表达量低,比较差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论上调miR-125a表达可抑制EC细胞增殖、迁移及侵袭,并诱导其凋亡,该作用可能与其靶向调控LIN28B表达有关。

索拉菲尼对骨肉瘤细胞的抑制作用及分子机制研究

目的研究索拉菲尼对骨肉瘤细胞增殖和凋亡的作用及其分子机制。方法将人骨肉瘤细胞(HOS细胞)分为对照组及索拉菲尼组,用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐比色法观察索拉菲尼对HOS细胞活力的影响,用蛋白质印迹法检测凋亡相关蛋白变化,用Real-time PCR检测let-7d变化情况。结果索拉菲尼可抑制HOS细胞活力,并呈剂量和浓度依赖性;同时,索拉菲尼可以抑制Lin28表达,同时促进let-7d表达;过表达Lin28可以逆转索拉菲尼的促凋亡作用。结论索拉菲尼通过调控Lin28/le-7d环路来促进骨肉瘤细胞凋亡。