lincRNA-p21在酒精性肠道损伤中的作用

目的探讨基因间长链非编码RNA-p21(lincRNA-p21)在酒精性肠道损伤中的作用。方法将15只C57BL/6Cnc小鼠适应性喂养一周,随机取10只,随机分为lincRNA-p21过表达组和对照组各5只,分别于尾静脉注射lincRNAp21-over-AAV8-U6-GFP病毒、control-AAV8-U6-GFP病毒;以5只Trp53cor1基因敲除C57BL/6小鼠(lincRNA-p21-/-)为突变组,以5只C57BL/6Cnc小鼠作为野生组。各组分别予含5%酒精的液体饲料连续喂养4周,最后3天同时予40%酒精5 g/kg灌胃,建立酒精性损伤模型。模型构建成功后,处死小鼠,留取小肠组织,采用RT-qPCR法检测小肠组织lincRNA-p21表达;HE染色,观察小肠组织病理形态变化;免疫组化法检测小肠组织紧密连接蛋白claudin-1、ZO-1表达;取盲肠内容物,提取其微生物DNA,并进行16S扩增子测序,分析菌群多态性和组成等。结果lincRNA-p21过表达组小肠组织lincRNA-p21相对表达量高于对照组(t=5.31,P<0.05);突变组lincRNA-p21相对表达量低于野生组(t=3.95,P<0.01)。HE染色显示,各组均出现肠道损伤,肠黏膜可见粒细胞、单核细胞浸润。与对照组比较,lincRNA-p21过表达组肠道损伤较重,肠绒毛空泡化增多,肠黏膜细胞结构较紊乱,肠壁水肿和肠壁隐窝损伤较重;与野生组比较,突变组肠绒毛空泡化减少,肠黏膜细胞结构较条理,肠壁水肿和肠壁隐窝损伤较轻。lincRNA-p21过表达组claudin-1、ZO-1相对表达量均低于对照组(t分别为20.84、7.57,P均<0.01);突变组claudin-1、ZO-1相对表达量均高于野生组(t分别为5.53、6.69,P均<0.01)。肠道菌群测序结果显示,lincRNA-p21过表达组与对照组、突变组与野生组肠道优势菌群均为厚壁菌门或拟杆菌门。lincRNA-p21过表达组肠道菌群中放线菌门丰度高于对照组(t=4.21,P<0.01);突变组肠道菌群中蓝藻菌门丰度低于野生组(t=2.62,P<0.05)。KEGG分析发现,lincRNA-p21过表达和基因敲减对酒精暴露小鼠肠道菌群功能的影响涉及氨基酸代谢、脂质代谢、营养物质消化吸收以及细胞生长和死亡等方面。结论lincRNA-p21过表达能够加重酒精性肠道损伤,而敲减lincRNA-p21则可减轻酒精性肠道损伤,其机制可能与增加或减轻肠道屏障损伤以及改变肠道菌群结构有关。

LincRNA-p21敲减对胃癌细胞生长和转移的影响及其作用机制

目的:探讨LincRNA-p21敲减对胃癌细胞增殖、迁移与侵袭的影响,并阐明其作用机制。方法:采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测胃癌组织、癌旁组织以及3种胃癌细胞(MGC-803、MKN-45和SGC-790)和正常胃黏膜上皮细胞GES-1中LincRNA-p21 mRNA表达水平。以MGC-803细胞作为研究对象,实验分为sh-NC组、sh-LincRNA-p21组和AG490+sh-LincRNA-p21组。sh-NC组MGC-803细胞采用慢病毒感染sh-NC;sh-LincRNA-p21组MGC-803细胞采用慢病毒感染sh-LincRNA-p21;AG490+sh-LincRNA-p21组MGC-803细胞采用慢病毒感染sh-LincRNA-p21后,再采用10μg·L^-1 AG490处理细胞。采用5-乙炔基-2′-脱氧尿苷(EdU)掺入法检测各组MGC-803细胞EdU掺入百分比,CCK-8法检测各组MGC-803细胞活性,Transwell法检测各组MGC-803细胞迁移数和侵袭数,Western blotting法检测sh-NC组和sh-LincRNA-p21组MGC-803细胞中p-JAK1、p-STAT3和p-STAT5蛋白表达水平。将sh-NC组和sh-LincRNA-p21组MGC-803细胞移植入BALB/c裸鼠颈部皮下成瘤,检测瘤体体积和质量。结果:与癌旁组织比较,胃癌组织中LincRNA-p21 mRNA表达水平明显降低(P<0.01);与GES-1细胞比较,MGC-803、MKN-45和SGC-790细胞中LincRNA-p21表达水平均明显降低(P<0.01)。与sh-NC组比较,sh-LincRNA-p21组MGC-803细胞EdU掺入百分比、细胞活性、细胞迁移数和侵袭数、p-JAK1、p-STAT3和p-STAT5蛋白表达水平均明显升高(P<0.05或P<0.01);与sh-LincRNA-p21组小鼠比较,AG490+sh-LincRNA-p21组MGC-803细胞活性、细胞迁移数和侵袭数均明显降低(P<0.05或P<0.01)。裸鼠成瘤实验,与sh-NC组比较,sh-LincRNA-p21组小鼠瘤体体积和质量均明显增加(P<0.05或P<0.01)。结论:敲减LincRNA-p21可明显促进胃癌细胞的生长与转移,且该促进作用可能与其促进JAK-STAT信号通路活性有关。

LincRNA-p21在癌症机制中的研究进展

长链非编码RNA是一类不编码蛋白质的RNA,通过多种机制参与不同的生物学行为。lincRNA-p21是一种抑癌基因,并与p53密切相关。lincRNA-p21通过MDM2、ING1b和p21等多个靶标调节p53参与细胞周期、增殖、凋亡的调控,并通过HIF-1α协调Warburg效应参与细胞代谢等多种生物学作用。lincRNA-p21与肿瘤的预后和治疗密切相关。因此lincRNA-p21可作为癌症的诊断和预后的生物标志物。本文就lincRNA-p21生物学功能与在疾病中的作用机制作一简要综述。

敲减lincRNA-p21的巨噬细胞对结肠癌细胞CT26生物学功能的影响

目的:探讨巨噬细胞长链基因间非编码RNA-p21(lincRNA-p21)的表达对肿瘤细胞及荷瘤小鼠肿瘤生长的影响,为肿瘤的诊疗寻找新的靶点。方法:用肿瘤细胞系(CT26)培养上清液刺激小鼠巨噬细胞RAW264.7,实时荧光定量PCR法检测IL-4、IL-6、IL-10、lincRNA-p21的表达;si-lincRNA-p21转染的巨噬细胞与CT26共培养,流式细胞术分析CT26的凋亡情况,Transwell小室和划痕实验检测CT26的迁移能力;构建小鼠CT26结肠癌移植瘤模型,观察输注转染si-lincRNA-p21的巨噬细胞对荷瘤小鼠肿瘤生长的影响。结果:CT26培养上清液刺激的RAW264.7较对照组巨噬细胞IL-6的表达下调(P<0.01),而IL-4和IL-10的表达上调(P<0.01),并且其lincRNA-p21的表达增加(P<0.01);转染si-lincRNA-p21的巨噬细胞lincRNA-p21的表达明显下调(P<0.01)。CT26培养上清液刺激转染si-lincRNA-p21的巨噬细胞,与对照组相比IL-6的表达上调(P<0.01),IL-4和IL-10表达下调(P<0.01);CT26与转染si-lincRNA-p21的巨噬细胞共培养后,其凋亡增多(P<0.01)且迁移能力减弱(P<0.05)。此外,体内注射转染si-lincRNA-p21的巨噬细胞能明显影响荷瘤小鼠的肿瘤体积和质量(P<0.05)。结论:敲除巨噬细胞lincRNA-p21可促进CT26的凋亡、抑制其迁移,进而延缓荷瘤小鼠的肿瘤生长。

LincRNA-P21通过靶向miR-17-3p对三阴性乳腺癌细胞迁移和侵袭能力的影响

目的探讨LincRNA-P21通过靶向miR-17-3p对三阴性乳腺癌(TNBC)细胞迁移和侵袭作用的影响。方法qPCR检测30例TNBC患者肿瘤组织、癌旁正常组织以及6种乳腺细胞(乳腺正常细胞MCF-10A,乳腺癌细胞MDA-MB-231、MDA-MB-435、MDA-MB-468、BT549、T47D)LincRNA-P21和miR-17-3p的表达。取MDA-MB-231细胞,单独过表达LincRNA-P21(实验设对照组、pcDNA3.1空白组、pcDNA-LincRNA-P21组),抑制miR-17-3p表达(实验设对照组、miR-17-3p空白组、miR-17-3p抑制剂组),过表达LincRNA-P21+抑制miR-17-3p表达(实验设对照组、miR-17-3p抑制剂组和pcDNA-LincRNA-P21+miR-17-3p inhibitor组)。CCK-8法检测MDA-MB-231细胞增殖,集落形成实验检测细胞的集落数量,细胞划痕实验检测细胞的迁移能力,Transwell实验检测细胞侵袭能力。Western blot检测E-cadherin和Vimentin蛋白表达。结果TNBC患者组织中LincRNA-P21的表达明显低于癌旁组织(0.48±0.03 vs.1.03±0.06,t=11.714,P<0.01),miR-17-3p的表达显著高于癌旁组织(2.93±0.17 vs.1.02±0.04,t=15.593,P<0.01)。乳腺癌细胞系中LincRNA-P21表达量明显低于MCF-10A,miR-17-3p表达量高于MCF-10A(P<0.01)。单独过表达LincRNA-P21或抑制miR-17-3p后,MDA-MB-231细胞增殖能力、集落形成数量、迁移和侵袭能力均明显下降。过表达LincRNA-P21的同时抑制miR-17-3p,MDA-MB-231细胞增殖能力、集落形成数量、迁移和侵袭能力出现进一步下降,且上调E-cadherin的表达,抑制Vimentin的表达(P<0.05)。结论LincRNA-P21通过竞争性结合miR-17-3p来抑制MDA-MB-231细胞增殖、集落形成、迁移和侵袭。

lincRNA-p21与消化系统恶性肿瘤

基因间的长链非编码RNA-p21(long intergenic non-coding RNA,lincRNA-p21)是lncRNAs中的一种,可通过发挥多种生物学功能影响肿瘤的增殖、转移、侵袭,并且对放、化疗的敏感度产生影响。lincRNA-p21在胃癌、肝癌、结直肠癌的进展中充当肿瘤抑制基因;也有研究发现lincRNA-p21在常氧条件下无抑癌作用,而在乏氧条件下能抑制乏氧肿瘤细胞增殖;其能够通过抑制β-连环蛋白信号转导的活性,从而降低肿瘤干细胞的体外活性。因此,lincRNA-p21有望成为一种新型肿瘤生物标志物,在肿瘤的早期诊断、治疗及预后评估等方面具有重要潜在价值。本文对lincRNA-p21在消化系统恶性肿瘤中作用的研究进展作一综述。

lincRNA-p21通过STAT3信号抑制结直肠癌HCT116细胞增殖

目的:研究基因间区长链非编码RNA-p21(lincRNA-p21)通过STAT3信号通路对结直肠癌HCT116细胞生长抑制的影响。方法:通过细胞转染法构建lincRNA-p21过表达的人结直肠癌细胞株HCT116,转染空载体pcDNA3.1作为阴性对照组。转染后采用RT-qPCR法检测细胞中lincRNA-p21的水平,分别采用MTT法和平板集落形成实验检测细胞的活力和增殖情况,采用Western blot法测定细胞中STAT3和磷酸化STAT3(p-STAT3)的蛋白水平。用STAT3信号通路激活剂SD19处理lincRNA-p21过表达的HCT116细胞,Western blot检测STAT3和p-STAT3的蛋白水平,MTT法检测细胞活力的变化,流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果:与control组和pcDNA组相比,pcDNA-lincRNA-p21组细胞中lincRNA-p21的表达明显上调,细胞生长受到抑制,STAT3和p-STAT3的蛋白水平降低(P<0.05)。STAT3激活剂SD19处理过表达lincRNA-p21的HCT116细胞后,与pcDNA-lincRNA-p21组相比,pcDNA-lincRNA-p21+SD19组细胞中STAT3和p-STAT3的蛋白水平升高,细胞活力升高,细胞凋亡率降低(P<0.05)。结论:lincRNA-p21过表达可以抑制结直肠癌HCT116细胞的生长;激活STAT3信号通路可促进HCT116细胞的生长;lincRNA-p21可通过抑制STAT3信号激活而抑制HCT116细胞的增殖。

大鼠蛛网膜下腔出血后血清lincRNA-p21的变化水平研究

目的动态监测血清基因间长链非编码RNA-p21(lincRNA-p21)表达水平与急性蛛网膜下腔出血(SAH)的相关性,从而为临床早期诊断SAH提供可靠的实验依据。方法将105只SD雄性大鼠随机分为SAH手术组(63只)、假手术组(21只)和正常对照组(21只),采用颈内动脉穿刺法制作SAH模型,实时荧光定量聚合酶链式反应法(RT-PCR)检测血清中lincRNA-p21水平,于预定时间进行神经行为学评估和干湿重法测定脑组织含水量。结果相对于正常对照组,急性SAH组在2~18 h lincRNA-p21表达呈下降趋势(P<0.05),18~48 h呈急剧上升趋势后恢复至正常水平(P<0.05),而0~2 h、48~72 h和假手术组相对于正常对照组差异无统计学意义(P>0.05)。对神经行为学评分、脑组织含水量与lincRNA-p21表达相关性分析结果显示神经行为学(P=0.924)和脑组织含水量(P=0.224)均与lincRNA-p21表达无相关性。结论血清lincRNA-p21的表达水平可以作为急性蛛网膜下腔出血潜在的生物学诊断标志和治疗靶点,但不能作为病情严重程度指标。

lincRNA-p21抑制肾癌细胞增殖作用

目的探讨lincRNA-p21对肾癌细胞增殖作用的影响。方法收集17例重庆市第七人民医院内分泌肾病科肾癌患者的组织样本,利用RT-PCR检测肾癌及其癌旁组织中lincRNA-p21的表达水平及人肾癌细胞系786-O、人胚肾细胞系HEK-293细胞中lincRNA-p21的表达水平,用siRNA降低lincRNA-p21的表达后观察其对细胞增殖、凋亡情况的影响以及对Bax、Noxa、Puma等p53信号通路中癌症相关基因表达水平的影响。结果在肾癌患者的癌灶组织中,lincRNA-p21的表达水平明显高于癌旁组织(P<0.05),786-O较HEK-293细胞lincRNA-p21 mRNA表达水平显著升高(P<0.05);用siRNA降低lincRNA-p21的表达后发现786-O细胞增殖增强,凋亡减弱,并且Bax、Noxa、Puma等癌症相关基因表达水平也被抑制(P<0.05)。结论 lincRNA-p21可能通过参与p53信号通路的转导,对肾癌细胞的增殖起到抑制作用,提示lincRNA-p21可作为分子靶点用于肾癌的靶向治疗。

血清lincRNA-p21对慢性乙型肝炎患者肝纤维化的诊断价值

目的研究慢性乙型肝炎(CHB)患者血清长基因非编码RNA-p21(lincRNA-p21)对肝纤维化的诊断价值。方法纳入2015年1月~2018年12月武汉市第三医院首次诊断为CHB患者320例,采用qRT-PCR方法检测320例CHB患者和300例健康对照人群(健康对照组)血清中lincRNA-p21水平;ROC曲线分析血清lincRNA-p21水平对肝纤维化的诊断价值;回归分析血清lincRNA-p21与肝纤维化标志物的相关性。结果 CHB患者血清lincRNA-p21水平相对于健康对照组明显降低(P<0.01);血清lincRNA-p21水平与CHB患者肝纤维化程度呈负相关,ROC曲线分析表明血清lincRNA-p21对CHB患者肝纤维化具有较好的诊断价值,ROC曲线下面积(AUC)为0.825,cut-off值为3.71,灵敏度和特异度分别为100%和69%;回归分析发现血清lincRNA-p21与肝纤维化标志物α-SMA(r=-0.685,P<0.001)和Col1A1(r=-0.725,P<0.001)呈负相关;另外,血清lincRNA-p21与CHB患者病毒载量、肝炎症反应及肝功能无相关性。结论血清lincRNA-p21水平可作为诊断CHB患者肝纤维化的潜在标志物。

LincRNA-p21调控PI3K/AKT信号通路逆转结肠癌细胞伊立替康耐药性

背景伊立替康(camptothecin-11,CPT-11)为晚期结肠癌的一线化疗用药,但CPT-11耐药性限制了CPT-11的化疗效果.研究结肠癌CPT-11耐药的机制,并恢复结肠癌细胞对CPT-11的敏感性,对延长结肠癌患者的生命时间具有十分重要的临床价值.目的探讨长链基因间非编码RNA-p21(long intergenic noncoding RNA-p21,lincRNA-p21)对结肠癌细胞CPT-11耐药的作用和机制.方法采用结肠癌HCT-8细胞和SW480细胞利用CPT-11持续接触浓度递增法分别构建伊立替康耐药HCT-8/CPT-11细胞和SW480/CPT-11细胞,并利用实时定量聚合酶链式反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测细胞内lincRNA-p21表达.HCT-8/CPT-11细胞和SW480/CPT-11细胞分别转染pcDNA-lincRNA-p21或si-lincRNA-p21后,细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)实验检测CPT-11对细胞活性的影响;蛋白质免疫印迹(Western blot)初步分析了lincRNA-p21对磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(phosphoinositide 3-kinase/protein kinase B,PI3K/AKT)通路是否有调节作用.采用PI3K/AKT通路抑制剂LY294002预处理已转染si-lincRNA-p21的HCT-8/CPT-11细胞和SW480/CPT-11细胞或采用PI3K/AKT通路激动剂Recilisib预处理已转染pcDNAlincRNA-p21的HCT-8/CPT-11细胞和SW480/CPT-11细胞,CCK-8实验检测CPT-11对细胞活性的影响.结果与亲本细胞相比,CPT-11耐药细胞中lincRNA-p21表达明显降低.过表达lincRNA-p21抑制HCT-8/CPT-11细胞和SW480/CPT-11细胞对CPT-11耐药性,而敲低lincRNA-p21增强HCT-8/CPT-11细胞和SW480/CPT-11细胞对CPT-11耐药性.Western blot结果显示,lincRNA-p21过表达抑制PI3K/AKT通路活性;而敲低lincRNA-p21增强PI3K/AKT通路活性.LY294002能抑制lincRNA-p21敲低对CPT-11耐药的促进作用;Recilisib能抑制lincRNA-p21过表达对CPT-11耐药的抑制作用.结论上调lincRNA-p21能抑制结肠癌细胞CPT-11耐药性,而下调lincRNA-p21能增强结肠癌细胞CPT-11耐药性,这种调节作用可能与lincRNA-p21调控PI3K/AKT信号通路活性相关.

血清成纤维细胞生长因子21和脂肪酸结合蛋白4检测对急性ST段抬高型心肌梗死患者经皮冠状动脉介入治疗术后心力衰竭的预测价值

目的探究血清成纤维细胞生长因子21(FGF21)和脂肪酸结合蛋白4(FABP4)检测对急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者经皮冠状动脉介入治疗(PCI)术后心力衰竭的预测价值。方法选取2020年9月至2022年9月内蒙古医科大学附属医院接诊的113例STEMI患者为研究对象,依据PCI术后1年是否发生心力衰竭(心衰),将其分为心衰组(n=32)和非心衰组(n=81)。应用ELISA法测定血清FGF21、FABP4表达水平,比较两组血清FGF21、FABP4水平,多因素logistic回归分析影响STEMI患者PCI术后发生心力衰竭的相关因素,ROC曲线评估血清FGF21、FABP4水平对STEMI患者PCI术后心力衰竭发生的预测价值。结果心衰组心率次数、C反应蛋白(CRP)、心肌肌钙蛋白(cTnI)、N末端B型利钠肽原(BNP)、利尿剂使用比例均显著高于非心衰组,左心室射血分数(LVEF)显著低于非心衰组(P<0.05)。心衰组血清FGF21、FABP4表达水平均明显高于非心衰组[(228.37±33.07)ng/L比(185.68±25.52)ng/L、(34.26±5.51)ng/ml比(26.87±4.67)ng/ml,t=7.345、7.195,P<0.05]。血清FGF21(95%CI 1.371~8.191)、FABP4(95%CI 1.176~4.090)及发病到至导丝通过时间(95%CI 1.058~8.157)是影响STEMI患者PCI术后发生心力衰竭的危险因素(OR>1,P<0.05),LVEF(95%CI 0.473~0.913)是保护因素(OR<1,P<0.05)。血清FGF21、FABP4单独及二者联合预测STEMI患者PCI术后发生心力衰竭的曲线下面积(AUC)分别为0.828、0.856、0.934,二者联合优于单一(Z二者联合-FGF21=1.971、Z二者联合-FABP4=2.417,P=0.048、P=0.015)。结论STEMI患者PCI术后发生心力衰竭血清FGF21、FABP4水平均明显升高,二者联合对STEMI患者PCI术后发生心力衰竭的风险具有更高的预测价值。

miR-21调控TLK2表达对急性髓系白血病细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨mi R-21调控TLK2表达对急性髓系白血病(AML)细胞增殖和凋亡的影响。方法:选取2019年1月至2022年7月在新乡市中心医院收治的70例AML患者,同时选取30例缺铁性贫血患者作为对照组,使用Ficoll密度梯度离心法获取两组患者的骨髓单个核细胞。RT-q PCR测定各组骨髓单个核细胞中mi R-21、TLK2 m RNA的表达水平。使用脂质体转染技术将mimics-mi R-21、mimics-NC、inhibitor-mi R-21、inhibitor-NC及NC转染至HL-60细胞。采用CCK-8法测定各组HL-60转染细胞经阿糖胞苷处理后的活性。TUNEL法测定HL-60转染细胞凋亡率。RT-q PCR测定转染inhibitor-mi R-21后HL-60细胞TLK2 m RNA的表达。结果:AML患者骨髓单个核细胞中mi R-21、TLK2 m RNA的相对表达水平均明显高于对照组患者(均P<0.05)。HL-60细胞经阿糖胞苷处理后,inhibitor-mi R-21组和mimics-mi R-21组的细胞活性均随阿糖胞苷浓度升高显著下降(P<0.05),但在每个阿糖胞苷浓度点,inhibitor-mi R-21组的细胞活性均低于对照组(P<0.05),而mimics-mi R-21组的细胞活性均高于对照组(P<0.05)。inhibitor-mi R-21组的细胞凋亡率显著升高(P<0.05),而mimics-mi R-21组的细胞凋亡率显著降低(P<0.05)。HL-60细胞经inhibitor-mi R-21处理后,TLK2 m RNA的相对表达量明显下降(P<0.05)。结论:mi R-21在AML患者中呈高表达,可能通过抑制TLK2的表达来促使AML细胞凋亡。

清肾颗粒对非透析慢性肾脏病湿热证患者血清microRNA-21、Wnt4及β-catenin的影响

目的观察清肾颗粒对非透析慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)湿热证患者血microRNA-21、Wnt4及β-catenin的影响,探讨其保护肾功能、改善临床症状的作用机制。方法选取66例符合纳入标准的CKD湿热证患者,最终完成64例,对照组和观察组各32例。对照组采用CKD常规基础治疗,观察组在对照组治疗基础上加用清肾颗粒口服,疗程均为12周。观察和比较两组患者治疗前后中医症状积分及证候疗效,肾功能指标[血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、肾小球滤过率(estimated glomerular filtration rate,eGFR)、血清肌酐(serum creatinine,SCr)],微炎症、营养指标[超敏C反应蛋白(hypersensitive C-reactive protein,hs-CRP)、白蛋白(albumin,Alb)、前白蛋白(prealbumin,PAB)],血清microRNA-21、Wnt4及β-catenin水平。结果两组患者治疗后中医症状积分较治疗前均显著降低(P<0.05),且观察组降低程度显著大于对照组(P<0.05);两组患者临床疗效比较,差异无统计学意义(P>0.05)。观察组BUN、SCr水平,eGFR较治疗前显著改善(P<0.05),且改善程度显著优于对照组(P<0.05);与治疗前比较,两组患者治疗后血清hs-CRP水平均显著降低(P<0.05),Alb、PAB水平均显著升高(P<0.05),且观察组血清hs-CRP、Alb、PAB水平改善程度优于对照组(P<0.05);治疗前两组患者血清microRNA-21、Wnt4、β-catenin水平均显著高于正常组(P<0.05),观察组患者治疗后血清microRNA-21、Wnt4、β-catenin水平均显著降低(P<0.05),且降低程度显著大于对照组(P<0.05)。结论清肾颗粒能够改善CKD湿热证患者肾功能及微炎症、营养不良状态,减轻临床症状,其机制可能与降低microRNA-21表达水平,靶向抑制Wnt/β-catenin信号通路有关。

孟鲁司特钠片联合糠酸氟替卡松治疗支气管哮喘患儿的疗效及对miRNA-21、miRNA-26a水平的影响

目的探究孟鲁司特钠片联合糠酸氟替卡松治疗对支气管哮喘患儿血清微小RNA(miRNA)-21及miRNA-26a水平的影响。方法选择2020年3月至2022年3月陕西省人民医院儿童病院收治的支气管哮喘患儿120例,按照随机数字表法分为两组,每组60例。在常规方法的基础上,对照组使用布地奈德雾化吸入治疗,观察组使用孟鲁司特钠片联合糠酸氟替卡松治疗。比较两组治疗后临床疗效和不良反应。检测并比较两组患儿肺功能指标、血清炎症因子以及miRNA-21、miRNA-26a表达水平。结果治疗后两组第1秒用力呼气容积(FEV_(1))和最大呼气流量(PEF)均显著升高(P<0.05),且观察组FEV1和PEF均显著高于对照组(P<0.05)。治疗后两组超敏C感应蛋白(hs-CRP)和白细胞介素6(IL-6)水平均显著降低(P<0.05),且观察组hs-CPR和IL-6水平均显著低于对照组(P<0.05)。治疗后两组miRNA-21和miRNA-26a表达水平均显著降低(P<0.05),且观察组均显著低于对照组(P<0.05)。两组不良反应总发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论糠酸氟替卡松联合孟鲁斯特钠片对儿童支气管哮喘具有更好的临床疗效,可提高肺功能,并具有一定的安全性。并且联合治疗可能通过下调miRNA-21和miRNA-26a的表达水平抑制炎症因子。

miR-21-3p靶向STAT3促进银屑病角质形成细胞增殖的研究

目的探讨miR-21-3p及其靶蛋白信号转导子和转录激活子3蛋白(STAT3)在寻常型银屑病发生过程中角质形成细胞的作用意义。方法对皮肤组织中STAT3蛋白表达情况的检测选择免疫组织化学法,对健康人群皮肤组织及银屑病患者皮损组织miR-21-3p表达量的检测选择实时荧光定量PCR法,靶基因STAT3和miR-21-3p关系的检测选择双荧光素酶报告基因。化学合成miR-21-3p模拟物、抑制剂,瞬时转染HaCaT细胞,对不同分组细胞进行CCK8、流式细胞凋亡实验,探究分析miR-21-3p调控细胞表型主要作用。对于转染细胞中STAT3蛋白表达情况,选择Western Blot检测。结果寻常型银屑病患者皮肤组织中miR-21-3p呈高表达(P<0.05)。STAT3免疫组化阳性表达定位于细胞浆,在银屑病组患者皮损组织阳性表达率为82.22%(37/45)高于正常皮肤组织(P<0.01)。双荧光素酶报告基因显示miR-21-3p与STAT3存在结合,呈靶向关系。miR-21-3p mimics促进HaCaT细胞增殖活性,抑制细胞凋亡;miR-21-3p inhibitor抑制HaCaT细胞的增殖能力,促使细胞趋向凋亡。miR-21-3p转染HaCaT过表达可对STAT3蛋白表达量产生促进,相反则降低(F=48.632,P<0.01)。结论miR-21-3p呈现正调控关系,能够靶向调控STAT3;两者共同作用参与并加重银屑病的病程,并抑制患者细胞凋亡,调节角质形成细胞增殖活性。

血清microRNA-155、microRNA-21、趋化素、瘦素与糖尿病肥胖患者胰岛素抵抗的相关性

目的 探讨糖尿病肥胖患者血清microRNA-155(miR-155)、microRNA-21(miR-21)、趋化素、瘦素水平与胰岛素抵抗(IR)的相关性。方法 选取2022年1月—2023年4月山东中医药大学第二附属医院收治的138例2型糖尿病(T2DM)患者为研究对象,其中肥胖患者73例(肥胖组),非肥胖患者65例(非肥胖组)。肥胖组中有IR 45例(IR组),无IR 28例(非IR组)。收集患者一般资料,包括性别、体质量指数(BMI)、年龄、颈围(NC)、腰围(WC)、空腹血糖(FPG)、甘油三酯(TG)、空腹胰岛素(FINS)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、miR-155、miR-21、趋化素、瘦素、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)水平;通过多因素逐步Logistic回归模型分析T2DM肥胖患者发生IR的危险因素;绘制受试者工作特征(ROC)曲线,分析miR-155、miR-21、趋化素、瘦素诊断T2DM肥胖患者IR的效能;Pearson法分析miR-155、miR-21、趋化素、瘦素与HOMA-IR的相关性。结果 肥胖组miR-155相对表达量低于非肥胖组(P <0.05),miR-21、趋化素、瘦素、HOMA-IR高于非肥胖组(P <0.05)。IR组miR-155相对表达量低于非IR组(P <0.05),NC、WC、miR-21、趋化素、瘦素水平高于非IR组(P<0.05)。多因素逐步Logistic回归分析结果显示:NC [O^R=1.416(95%CI:1.038,1.932)]、WC [O^R=1.227(95%CI:1.049,1.435)]、miR-155 [O^R=1.763(95%CI:1.205,2.579)]、miR-21[O^R=1.932(95%CI:1.356,2.753)]、趋化素[O^R=2.074(95%CI:1.492,2.883)]、瘦素[O^R=1.628(95%CI:1.246,2.127)]是T2DM肥胖患者发生IR的危险因素(P <0.05)。ROC曲线分析结果显示,miR-155、miR-21、趋化素、瘦素诊断T2DM肥胖患者IR的曲线下面积分别为0.865、0.909、0.874和0.871;敏感性为77.8%(95%CI:0.614,0.825)、86.7%(95%CI:0.792,0.917)、95.6%(95%CI:0.713,0.965)和80.0%(95%CI:0.692,0.917);特异性为85.7%(95%CI:0.647,0.903)、82.1%(95%CI:0.732,0.914)、75.0%(95%CI:0.675,0.928)和89.3%(95%CI:0.656,0.944)。miR-155与HOMA-IR呈负相关(r=-0.573,P=0.000),miR-21、趋化素、瘦素与HOMA-IR均呈正相关(r=0.531、0.558和0.568,均P=0.000)。结论 T2DM肥胖患者中IR较多,且miR-155、miR-21、趋化素、瘦素是T2DM肥胖患者发生IR的危险因素。

慢性牙周炎患者龈沟液miR-155、miR-21水平及其临床意义

目的检测慢性牙周炎(CP)患者龈沟液中微小RNA-155(miR-155)、微小RNA-21(miR-21)表达水平变化及其临床意义。方法选择2021年10月至2022年10月该院142例CP患者作为CP组,根据牙周炎严重程度分为轻度CP组、中度CP组、重度CP组。随访1个月,根据临床疗效分为疗效良好组、疗效较差组。同期142例健康志愿者作为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测龈沟液miR-155、miR-21表达水平。利用Pearson相关分析CP患者龈沟液miR-155、miR-21表达水平与牙龈指数(GI)、牙槽骨吸收程度(ABL)、探诊深度(PD)、附着丧失(AL)的相关性。采用多因素Logistic回归分析CP患者疗效的影响因素,采用受试者工作特征(ROC)曲线评估miR-155、miR-21对CP患者疗效的预测价值。结果CP组miR-155、miR-21表达水平高于对照组(P<0.05)。CP组PD、AL、ABL、GI明显高于对照组(P<0.05)。轻度CP组、中度CP组、重度CP组miR-155、miR-21表达水平依次升高(P<0.05)。疗效较差组miR-155、miR-21表达水平高于疗效良好组(P<0.05)。龈沟液miR-155、miR-21表达水平均与PD、AL、ABL、GI呈正相关(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,病情严重程度、miR-155、miR-21是CP患者疗效的影响因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,miR-155、miR-21预测CP患者疗效较差的曲线下面积(AUC)分别为0.937(95%CI:0.888~0.986)、0.818(95%CI:0.715~0.921),二者联合预测的AUC为0.960(95%CI:0.920~0.998),优于单一指标预测。结论CP患者龈沟液miR-155、miR-21表达水平升高,与牙周炎严重程度、牙周临床指标及临床疗效有关,2项指标或可作为CP患者疗效的潜在预测标志物。

miR-21、miR-26a及miR-200a在子痫前期患者中的表达水平及与病情的相关性

目的分析miR-21、miR-26a及miR-200a在子痫前期(PE)患者血清中的表达,并探讨其临床意义。方法选取2019年3月至2021年3月在南京市妇幼保健院治疗的PE患者103例,分为轻度PE组(57例)和重度PE组(46例),另选取同期正常孕妇50例作为对照组。检测各组孕妇血清miR-21、miR-26a及miR-200a表达水平,分析其与年龄、孕周、BMI、血压、24h尿蛋白及不良妊娠结局的相关性,并分析血清miR-21、miR-26a及miR-200a对PE的诊断价值。结果重度PE组BMI、舒张压、收缩压以及24h尿蛋白高于轻度PE组及对照组,且差异具有统计学意义(F值分别为4.116、141.063、143.118和342.736,P<0.05)。对照组、轻度PE组及重度PE组孕妇血清中miR-21、miR-26a及miR-200a的表达水平依次升高。Pearson相关性分析结果显示,血清miR-21、miR-26a及miR-200a的表达水平与血压、24h尿蛋白及不良妊娠结局发生率呈正相关(r值介于0.446~0.832之间,P<0.001)。经受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析发现,血清miR-21、miR-26a及miR-200a联合诊断PE的曲线下面积(AUC)为0.967,敏感度为98.10%,特异性为92.30%。结论PE患者血清miR-21、miR-26a及miR-200a的表达高于正常孕妇,且与患者的临床指标及不良妊娠结局相关,检测血清miR-21、miR-26a、miR-200a水平对早期诊断PE及评估患者预后具有十分重要的意义。

血清microRNA-21、microRNA-193a-3p表达与结直肠癌患者手术预后的关系

目的探究血清microRNA-21(miR-21)、microRNA-193a-3p(miR-193a-3p)水平与结直肠癌患者手术预后的关系。方法回顾性分析2020年1月—2022年1月苏州大学附属第一医院收治112例结直肠癌患者的病历资料。患者均接受结直肠癌根治术,术后随访16个月,记录患者的预后生存结局,多因素逐步Logistic回归分析结直肠癌患者手术预后的影响因素,评估血清miR-21、miR-193a-3p对结直肠癌患者预后的预测效能。结果112例结直肠癌患者死亡22例,病死率为19.64%;生存90例,生存率为80.36%。死亡组术前血清miR-21 mRNA相对表达量、临床分期Ⅲ期占比、淋巴结转移率均高于生存组(P<0.05),血清miR-193a-3p m RNA相对表达量低于生存组(P<0.05)。多因素逐步Logistic回归分析结果显示,临床分期Ⅲ期[OR=3.777(95%CI:1.399,10.194)]、淋巴结转移[OR=5.099(95%CI:1.715,15.156)]、miR-21表达升高[OR=4.889(95%CI:1.645,14.533)]、miR-193a-3p表达降低[OR=4.402(95%CI:1.481,13.084)]均是直肠癌患者预后的影响因素(P<0.05)。受试者工作特性曲线分析结果显示,血清miR-21、miR-193a-3p单一及联合预测结直肠癌预后的敏感性分别为69.04%(95%CI:0.487,0.813)、72.73%(95%CI:0.495,0.884)、86.36%(95%CI:0.640,0.964),特异性分别为62.22%(95%CI:0.513,0.720)、68.89%(95%CI:0.581,0.780)、90.00%(95%CI:0.814,0.950),曲线下面积分别为0.782、0.731和0.901。结论结直肠癌患者术前miR-21、miR-193a-3p表达与术后预后密切相关,且在结直肠癌患者的预后结局中表现出良好的预测效能。