灵芪蠲肝液对大鼠慢性肝损伤氧自由基和一氧化氮的影响

目的通过动物实验研究灵芪蠲肝液对慢性肝损伤的防治机理。方法用40%的四氯化碳溶液复制慢性肝损伤模型,取血测定肝功能,血清NO,MDA和SOD,10%肝匀浆的MDA、SOD,并取肝组织做病理学检查。结果四氯化碳慢性肝损伤时,灵芪蠲肝液可降低ALT,AST,MDA,NO,升高ALB及SOD水平,促进肝细胞再生。结论灵芪蠲肝液能减少慢性肝损伤氧自由基和NO,调节蛋白质代谢。

灵芪蠲肝液抗CCl_4诱导的肝损伤机制研究

目的:研究灵芪蠲肝液对CCl4实验性肝损伤大鼠Toll样受体4(TLR4)表达的影响。方法:84只Wistar大鼠于0周随机取8只作为正常组,于第1周随机取72只大鼠皮下注射40%的CCl4花生油溶液连续10周造模,第4周随机从造模大鼠中取36只作为治疗组,在造模同时予灵芪蠲肝液治疗,另36只为模型组,2组于4、6、8、10周各随机取8只大鼠同正常组观察以下指标:以逆转录PCR法检测Kupffer细胞(KCs)TLR4mRNA表达,以免疫组织化学法检测肝组织TLR4、核转录因子(NF)-κB蛋白表达;以放免法检测血清肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β水平,以基质显色终点法检测内毒素水平。结果:与模型组相比,治疗组能明显降低血清TNF-α、IL-1β和内毒素水平,且KCsTLR4mRNA、肝组织TLR4、NF-κB蛋白表达和KnodellHAI炎症积分也明显降低(P<0.05或P<0.01)。血清内毒素水平与KCsTLR4mRNA表达呈正相关(r=0.845,P<0.01)。结论:灵芪蠲肝液可通过降低血清内毒素、KCsTLR4mRNA表达及信号转导,减少炎症因子生成起抗大鼠实验性肝损伤的作用。

灵芪蠲肝液对肝纤维化细胞外基质的作用研究

目的通过动物实验研究灵芪蠲肝液对细胞外基质的影响。方法四氯化碳溶液复制肝纤维化模型,取血测定纤维化指标透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(p—CⅢ)、Ⅳ型胶原(CⅣ);测定10%肝匀浆中羟脯氨酸(Hyp)含量;并取肝组织做病理检查。结果四氯化碳慢性肝损伤时,灵芪蠲肝液可降低HA,LN,PSⅢ,CⅣ,Hyp,与模型组比较差异有显著性(P<0.05);病理发现能减轻肝脂肪变性、减少纤维组织增生、促进肝细胞再生。结论灵芪蠲肝液能调节肝纤维化细胞外基质代谢,减少细胞外基质沉积,从而减轻肝纤维化。

灵芪蠲肝液毒理学实验研究

目的观察灵芪蠲肝液对小鼠的急性毒理作用和对大鼠的长期毒性作用。方法急性毒理学采用最大耐受量给药法;长期毒性实验采用长期(12周)给药法,分别于12周末、停药2周末每组各取一半动物先称重后取血5ml,用于测血像和血液生化,同时取心、肝、脾、肺、肾称重,并制做病理切片,在光镜下观察组织形态。结果小鼠灌胃灵芪蠲肝液1020g·kg-1后,在观察的7天内无一动物死亡和异常表现;大鼠灌胃灵芪蠲肝液51g·kg-1、25.5g·kg-1、12.25g·kg-1共12周、停药2周,动物无活动异常,体重增加量、外周血像、血液生化、肝肾功能、主要脏器重量及重量指数均未见有异常,与对照组无显著性差异(P>0.05)病理组织检查显示各脏器均无出血、栓塞、坏死、增生、萎缩、水肿、炎细胞浸润等异常改变,与生理盐水组比较无明显差异。结论小鼠灌服灵芪蠲肝液1200倍临床剂量;大鼠连续灌服灵芪蠲肝液12周,相当于临床剂量的60、30、15倍,并停药观察2周,均未出现异常毒性反应,其临床使用剂量是安全的。

灵芪蠲肝液对大鼠急慢性肝损伤影响

目的:研究灵芪蠲肝液对大鼠实验性急慢性肝损伤的保护作用及可能作用机制。方法:硫代乙酰胺复制急性肝损伤模型,40%的四氯化碳溶液复制慢性肝损伤模型,硝酸还原酶比色法检测一氧化氮(NO)含量以及取肝组织做病理组织学检查。结果:硫代乙酰胺急性肝损伤及四氯化碳慢性肝损伤时,灵芪蠲肝液能使血清NO水平明显降低,与模型组比较,具有统计学意义(P<0.05);病理组织学检查发现该药物能减轻肝细胞变性、坏死,减少炎细胞浸润及减轻肝脂肪变性、减少纤维组织增生、促进肝细胞再生。结论:灵芪蠲肝液具有减轻急慢性肝损伤的作用,可能与减少NO的产生有关。

灵芪蠲肝液对血清肝纤维化指标和NO的影响

目的研究灵芪蠲肝液对血清肝纤维化指标和NO的影响。方法四氯化碳皮下注射复制肝纤维化模型,测血清NO及纤维化指标HA、LN、PCⅢ、CⅣ;并取肝组织做病理检查。结果四氯化碳慢性肝损伤时,灵芪蠲肝液可降低NO、HA、LN、PCⅢ、CⅣ;减轻肝脂肪变性,减少纤维组织增生,促进肝细胞再生。结论灵芪蠲肝液能减少肝纤维化指标的含量,减少NO的产生。

灵芪蠲肝液对大鼠TLR4信号途径的影响

目的:探讨四氯化碳(CCl4)诱导大鼠肝损伤的作用机制,并观察灵芪蠲肝液对Toll样受体4(TLR4)信号传导途径的影响。方法:雄性健康Wistar大鼠,设置模型组、灵芪蠲肝组(治疗组)和空白组。用40%CCl4花生油溶液皮下注射建立慢性肝损伤模型,以灵芪蠲肝液灌胃作治疗性研究,于第8周收集血液和肝脏组织。检测肝功能ALT、AST、白蛋白(ALB)水平;检测血清内毒素、白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;分离枯否细胞(KCs),采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测KCs TLR4 mRNA表达;肝组织HE染色,按Knodell HAI评分标准对肝脏炎症评分,免疫组化SP法检测肝组织TLR4和核因子κB(NF-κB)蛋白表达。结果:空白组除ALB高于模型组和治疗组外,其余指标均最低。模型组血清ALT、AST、内毒素、IL-1β、TNF-α水平明显高于治疗组(P<0.001),ALB水平明显低于治疗组(P<0.05),KCs TLR4 mRNA表达明显高于治疗组(P<0.001),肝组织炎症Knodell HAI评分、TLR4和NF-κB蛋白均高于治疗组(P<0.001)。结论:①通过TLR4信号传导途径释放炎症介质致肝组织损伤可能为CCl4诱导慢性肝损伤的机制之一。②灵芪蠲肝液治疗慢性肝损伤的机制可能与抑制TLR4信号途径有关。