酸枣仁提取物调控miR-7b-3p/5-羟色胺1A受体表达促进骨生长

背景:前期研究发现,酸枣仁提取物通过提高脑组织5-羟色胺1A受体(serotonin 1A receptor,5-HT1AR)表达,使之与5-羟色胺结合,延长小鼠慢波睡眠,促进生长激素的分泌,从而使骨生长。5-HT1AR作为一种蛋白质,其表达丰度受到miRNA的调控。作者推测酸枣仁提取物可能通过miRNA调控5-HT1AR的表达从而发挥药物作用。目的:观察酸枣仁提取物通过干预小鼠脑组织中miR-7b-3p/5-HT1AR通路对骨骼生长的影响。方法:①将昆明种小鼠分为正常对照组、用药组(灌胃酸枣仁提取物0.320 mg/g),阳性对照组(灌胃酸枣仁皂甙0.013 mg/g)和酸枣仁提取物+5-HT1AR抑制剂组(灌胃酸枣仁提取物最后3 d同时每天侧脑室注射5-HT1AR选择性抑制剂P-MPPF 8μg),25 d后观察酸枣仁提取物对小鼠骨生长、血清生长激素水平及脑组织5-HT1AR表达的影响;②基因芯片法筛选由酸枣仁提取物引起的骨生长小鼠与普通小鼠脑组织差异表达的miRNAs,并通过PCR验证和双荧光素酶报告基因实验证实筛选的miR-7b-3p与5-HT1AR的调控关系;③体外培养小鼠脑皮质细胞并鉴定,利用Western blot法观察酸枣仁提取物对脑皮质细胞中5-HT1AR表达的影响;④将昆明种小鼠分为正常对照组、用药组、miR-7b-3p inhibitor组、用药+miR-7b-3p mimics组、阳性对照组,观察各组小鼠脑组织5-HT1AR表达及5-羟色胺与5-HT1AR结合活性;⑤将SD大鼠分为正常对照组、用药组、miR-7b-3p inhibitor组、用药+miR-7b-3p mimics组、阳性对照组,观察各组大鼠慢波睡眠的变化。结果与结论:①酸枣仁提取物可以促进小鼠体长、胫骨增长,促进生长激素分泌,提高脑组织5-HT1AR含量;②基因芯片筛选出差异表达的miRNAs个数为16个,其中上调有13个,下调有3个;生物信息学预测下调miR-7b-3p可以调控5-HT1AR表达,且双荧光素酶报告基因实验证实二者有直接调控关系;③酸枣仁提取物和沉默脑皮质细胞中miR-7b-3p表达可以引起5-HT1AR高表达;沉默miR-7b-3p后小鼠脑组织5-HT1AR表达、5-羟色胺与5-HT1AR结合活性及生长激素分泌均升高;过表达miR-7b-3p后小鼠脑组织5-HT1AR表达、5-羟色胺与5-HT1AR结合活性及生长激素分泌均降低;大鼠慢波睡眠期也相应延长或缩短。结果表明,酸枣仁提取物能够降低脑组织的miR-7b-3p水平,同时增加5-HT1AR的表达量。这种机制有助于延长慢波睡眠周期,并且促进生长激素的生成,对骨骼生长有积极影响,为使用酸枣仁提取物作为促进骨骼生长的潜在手段提供了科学依据。

贻贝(Mytilus edulis Linnaeus)唇瓣的扫描电镜观察

本文运用扫描电子显微镜技术研究了贻贝唇瓣的形态结。结果表明,贻贝唇瓣外部形态呈羽毛状,分为光滑面和皱褶面;褶皱面表面被覆浓密纤毛,分有沟嵴和无沟嵴两部分,界限明显。光滑面纤毛较少,呈簇状,分布不均。在褶皱面中央分界处和光滑面的一侧,有大量球状突起,为杯状细胞所在。纤毛和粘液在食物分拣和运输中起重要作用。

“红肉病”文蛤(Meretrix meretrix Linnaeus)中发现的3种病毒样颗粒

本文报道了在患“红肉病”文蛤组织中发现的 3种病毒样颗粒。 1种主要存在于鳃上皮下的结缔组织中 ,呈球形或椭球形 ,大小 (5 0～ 6 0 ) nm× (5 0～ 110 ) nm,无囊膜包裹。另 1种为球形 ,直径 16 0～ 180 nm,有囊膜 ,存在于外套膜上皮细胞及结缔组织细胞质中。第 3种存在于消化盲囊上皮细胞质内 ,为无囊膜包裹的球形病毒样颗粒 ,直径为 5 0～ 80 nm。

泥蚶(Tegillarca granosa Linnaeus)凝集素的细胞凝集和糖抑制作用的研究

泥蚶(TegillarcagranosaLinnaeus)凝集素能凝集所测试的14种人或动物的红细胞,其中对兔的红细跑的凝集活性最高.泥蚶凝集素也能凝集大鼠和小鼠的肺、脾脏、肝脏、骨髓细胞以及小鼠精子细胞.该凝集素对兔的红细胞的凝集活性不被测试的10种浓度为200mmol·L-1的糖所抑制.

乐清湾泥蚶Tegillarca granosa (Linnaeus)核型的初步研究

利用胚胎细胞做成的染色体制片,对乐清湾泥蚶染色体进行了分析。结果表明乐清湾泥蚶核型为2N=38,32m+6sm,NF=76。

巴黎翠凤蝶PAPILIO PARIS LINNAEUS生物学与养殖

巴黎翠凤蝶是1种限于东洋区分布的蝴蝶,以后翅中室的大色斑非常艳丽,在阳光的照射下,闪闪发亮,而成为1种观赏性很强的昆虫,却几乎没有其生物学和养殖技术方面的报道.1998至2004年三峡库区和重庆市的调查[1]表明,巴黎翠凤蝶主要分布在石柱、城口、巫溪、武隆等地海拔500～1 000 m的范围内;在此区域,它是1个常见种;其主要栖息环境是山坡灌丛和阔叶林,主要寄主植物是飞龙掌血Toddalia asiatica Lam..从4月到9月三峡库区都有巴黎翠凤蝶出现,在5月形成1个小高峰,在7月和8月形成2个较大高峰,据此估计,三峡库区巴黎翠凤蝶1 a 3代的可能性最大.巴黎翠凤蝶的卵单独产于寄主植物的老熟叶片上,卵期约4～5 d;幼虫龄期25～30 d,分为5龄,独栖性,均栖于叶表;缢蛹,一般附着于寄主枝、叶下侧,蛹期12～15 d.

新疆乌伦古湖河鲈(Perca fluviatilis Linnaeus)种群的生长模型及生态参数的研究

本文对新疆乌伦古湖河鲈(Perca fluviatilis Linnaeus)种群的数量生长模型和生态学参数作了计算和分析,研究结果如下: (1) 河鲈的生长模型为: L_t=53.65(1-e^(-0.15(t+0.41))…体长模型 W_t=4052.74(1-e^(-0.15(t+0.41))~3.1986…体重模型 (2) 体重增长率函数在t=2^+龄时有一拐点,此时体重增长加速度达最大值。表明2^+的河鲈体重的增长节律比之以往生命时期有了一个飞跃式上升,这时期的种群全部进入性成熟期,能量资源主要用于营养积累和性腺发育。 (3) 体重增长率函数在t=13^+时也有另外一个拐点,此时体重增长加速达最小值,说明这时的河鲈新陈代谢已达到最低点,接近衰老死亡状态,我们把这一点视为河鲈在自然界中的实际最高年龄。经推算河鲈的理论极限年龄为19.6年。 (4) 体重增长率在t=7^+龄处有极大值,此时的体重速度为零,表明河鲈的生长已达顶盛期,7^+龄以后走向衰老,增长率为一减函数,且加速度为负值。 (5) 种群最大生物量的临界年龄t_a=5.3,死亡率A=0.53,残存率S=0.47,自然死亡系数为0.43,资源利用率为0.

文蛤MERETRIX MERETRIX LINNAEUS工厂化人工育苗试验

文蛤的人工催产、浮游幼虫培育和稚贝水泥池培养试验结果表明：（1）用阴干与流水结合的方法刺激亲贝能获得理想俏产效果。（2）在水温28．0～29．1℃，比重1．0160—1．0187，pH值8．2－8．4条件下，用亚心形扁藻作文蛤D幼的开口饵料和壳顶幼虫饵料，生长快（日增长高达24．5μm）、成活率高（72．3％）、浮游期短（仅5－6天）。（3）文蛤眼点功出水泥池无砂底附苗试验获得成功，且单位面积附苗量高达433．3万颗／m2。（4）室内水泥池铺砂培养文蛤稚贝，前期生长快，但当壳长达300μm后，稚贝分泌一种粘液，生长和成活受到影响。建议定期翻池洗苗，当壳长达500μm后尽早将苗移至池塘内砂滩培养。

中蜂(Apis cerana Smith)和意蜂(Apismellifera Linnaeus)乙酰胆碱酯酶(AChE)性质比较研究

试验结果表明,中蜂(Apis cerana Smith)和意蜂(Apis mellifera Linnaeus)的乙酰胆碱酯酶(AchE)对底物乙酰硫代胆碱的反应性质具有明显的不同。中蜂的AchE的反应初速度和反应进程曲线的线性相关时间范围分别是0.027(OD_(412)值/min,0.8头)和0—10分钟,而意蜂则分别为0.012和0—15分钟。米氏常数值和最大反应速度值,中蜂分别为6.25mmol/L和0.105(OD_(412)值/min,0.4头),意蜂分别为0.862和0.015(仅为中蜂的13.8％和14.3％)。中蜂和意蜂AchE对残杀威的双分子速率常数值(K_i),氨基甲酰化常数(K_2)、解离常数(K_d)以及I_(50)值没有明显的差异。但是,对敌百虫的反应确明显不同,K_i、K_2、K_d和I_(50)值分别相差2.70、1.39、1.94和5.64倍。说明中蜂和意蜂AchE对氨基甲酸酯类化合物和有机磷类化合物的反应是不同的。

养殖欧洲鳗鲡Anguilla anguilla(Linnaeus)“狂游病”的病原观察

在欧洲鳗鲡养殖过程中,常发生“狂游病”的大量死亡。本病特点突发性强,传染速度快,引起死亡率高(70—100％)。本文报道对典型病鳗的超微结构的病原观察结果。

基于湿热证的三仁汤研究进展

湿热证是中医临床常见证型,而湿热也是许多难治性疾病的重要病机,且其患病占比率逐年增加。三仁汤是开上、畅中、渗下的经典方剂,具有宣畅气机、清热利湿的功效,主要症状包括头痛恶寒,身重疼痛,面色淡黄,胸闷不饥等。现代临床将其广泛应用于呼吸、心血管、消化、泌尿等系统疾病,并取得了显著的效果。三仁汤能够明显改善湿热证患者的临床症状,提高生活质量,尤其对一些难治性疾病,可以延缓病情发展,延长生存期。目前基于湿热证的三仁汤作用机制主要包括抗炎、调节免疫功能,调节水通道蛋白表达,调节神经内分泌功能,调节胃肠激素水平和胃黏膜蛋白差异表达,改善糖脂代谢及能量代谢紊乱等。笔者对近年来基于湿热证的三仁汤在临床疗效和实验研究进行整合与梳理,阐述了三仁汤的理论基础、临床与机制研究,为扩展三仁汤的现代临床应用提供理论依据和参考。

橄榄仁抗氧化肽的分离鉴定及分子对接

该研究利用酶解法结合凝胶色谱柱从橄榄仁中分离纯化得到6个抗氧化肽,采用分子对接模拟6种抗氧化肽与超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)的结合机制。采用酶解法从橄榄仁中提取抗氧化活性肽,以水解度、DPPH自由基清除率为指标,从6种商用酶中筛选出最适蛋白酶为木瓜蛋白酶,以底物浓度、酶底比、酶解时间、温度进行单因素试验,选取影响酶解反应的3个因素(酶底比>温度>时间)进行响应面法优化得出最佳工艺条件为底物质量浓度50 g/L、酶底比为3.3%(质量分数)、温度20℃、时间88 min。对最优条件下的粗肽液进行SephadexG-25和SephadexG-15分离纯化得到6个具有良好活性的抗氧化肽,分别为WLSF、TSVLR、LVYLVR、AGGKPFQ、YYPFKGFA、AFNVDERLAR。TSVLR显示出最高的DPPH自由基清除活性81.07%和羟自由基清除能力42.48%。分子对接研究表明,纯化的肽通过疏水效应和氢键与抗氧化相关的关键蛋白SOD有效结合。结果表明,橄榄仁可作为天然食物来源制取功能性食品的一个新的探究方向。

薏苡仁油联合5-FU对结肠癌HCT-116细胞株增殖、凋亡的影响

目的:分析薏苡仁油联合5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)对结肠癌HCT-116细胞株增殖、凋亡的影响及其作用机制。方法:采用四甲基偶氮唑盐(methyl thiazolyl tetrazdium,MTT)法测定不同浓度薏苡仁油、5-FU以及薏苡仁油+5-FU对人结肠癌HCT-116细胞株的生长抑制效应;采用流式细胞术检测细胞凋亡情况;采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测生存蛋白(Survivin)mRNA表达水平。结果:薏苡仁油、5-FU、5-FU+薏苡仁油均对人结肠癌HCT-116细胞增殖产生一定抑制作用,且薏苡仁油浓度越高,作用时间越长,细胞增殖抑制率越高,3组比较差异有统计学意义(P<0.05);与薏苡仁油组及5-FU组相比,5-FU+薏苡仁油组细胞增殖抑制率更高,差异有统计学意义(P<0.05)。薏苡仁油组、5-FU组、5-FU+薏苡仁油组的细胞凋亡率均高于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05);薏苡仁油浓度越高,细胞凋亡率也越高,差异有统计学意义(P<0.05);5-FU+薏苡仁油组细胞凋亡率高于5-FU组及薏苡仁油组,差异有统计学意义(P<0.05)。与空白对照组相比,不同浓度薏苡仁油组Survivin mRNA表达降低,差异有统计学意义(P<0.05);5-FU组Survivin mRNA表达升高,差异有统计学意义(P<0.05);5-FU+薏苡仁油组Survivin mRNA表达较5-FU组降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:薏苡仁油能抑制结肠癌HCT-116细胞增殖,诱导细胞凋亡,与5-FU联合应用能发挥药物协同作用,其作用机制可能与调控Survivin mRNA表达有关。

“孝”为“仁”“礼”之本论

孝、仁、礼虽都是儒学最为重要的核心范畴和德目,但孝为仁、礼之本。孝为仁之本:孝是仁的情感发生根源;仁之博爱是孝之亲爱的有序推扩;孝是行仁的实践起点。孝为礼之本:孝是礼的人性内在根源与心性基础;礼之敬意源于孝之敬亲敬祖意识;孝之祭礼是培育强化人们敬意的根源和途径。重视孝本论有利于厘清儒学重要范畴的内在联系与逻辑,有利于呈现曾子学派的重要性,也有利于推动弘扬中华传统孝道的实践。

红拟石首鱼Sciaenops ocellata（Linnaeus）池塘养殖群体可量性状的研究

用传统法和框架法(Truss)测定了红鱼形态的可数可量性状，分析了红鱼形态有关参数的相互关系，拟合了红鱼的框架结构图。总结回归了不同养殖环境中红鱼的体长、体重之间的关系。

栽培花生籽仁面积和周长性状的QTL定位分析

籽仁面积和周长是影响花生籽仁大小和外观的重要性状。本研究以‘鲁花11号’ב06B16’构建的重组自交系(recombinant inbred line,RIL)群体为试验材料,对花生籽仁面积和籽仁周长在4个环境进行性状考察及QTL定位分析。基于表型数据和高密度遗传图谱信息,在A04和B06染色体上定位到15个与籽仁面积和籽仁周长性状相关的QTL,其中8个与籽仁面积相关,7个与籽仁周长相关。控制籽仁面积和周长的主效位点qSAB06.1d和qSPB06a在多个不同环境均能检测到,表型贡献率为9.52%~33.78%,其增效等位基因均来自鲁花11号,共定位在B06染色体138.53~140.76 Mb区域内。对主效位点qSAB06.1d/qSPB06a进行功能注释,鉴定到3个编码转运蛋白、1个编码ABA受体PYL和1个编码钙调磷酸酶的基因,它们可能是调控花生籽仁面积和周长的候选基因。本研究将为花生产量和外观性状的精细定位和遗传改良奠定理论基础。

大孔树脂吸附法纯化酸枣仁总黄酮的工艺研究

利用7种大孔树脂对酸枣仁的总黄酮进行纯化,依据其吸附能力及解吸能力,选出最佳的大孔树脂型号,研究了上样液浓度、上样速度、上样液体积对大孔树脂吸附率的影响以及洗脱剂类型、洗脱剂浓度、洗脱速度、洗脱剂体积对大孔树脂解吸率的影响,采用正交试验对酸枣仁总黄酮的纯化工艺进行了优化。试验结果表明,DM301大孔树脂纯化酸枣仁总黄酮效果最佳,在上样液浓度为0.1 mg/mL、上样速度为1 BV/h、上样液体积为30 mL、洗脱剂为丙酮、洗脱剂浓度为100%、洗脱速度为2 BV/h、洗脱剂体积为55 mL的条件下,获得的酸枣仁总黄酮纯度最高,相较于纯化前提高了约1.1倍。

酸枣仁中掺理枣仁的高效液相色谱法鉴别方法研究

目的 建立测定酸枣仁和理枣仁中6’’’-芥子酰斯皮诺素含量的高效液相色谱法(HPLC),以鉴别酸枣仁中掺伪理枣仁。方法 2020年12月至2022年12月,采用HPLC法,选用Agela Venusil ASB C18柱(4.6 mm×200 mm,5μm);以乙腈-0.2%冰醋酸水溶液为流动相梯度洗脱,对酸枣仁及理枣仁中6’’’-芥子酰斯皮诺素的含量进行分析测定;检测波长:335 nm;体积流量:1.0 mL/min,柱温为30℃。结果 6’’’-芥子酰斯皮诺素在2.32~138.96μg/L(r=1)内呈良好的线性关系。理枣仁平均加样回收率为97.5%,相对标准偏差(RSD)为1.5%。酸枣仁平均加样回收率为97.8%,RSD为1.7%。6’’’-芥子酰斯皮诺素在酸枣仁中含量范围为0.003 3%~0.005 1%,在理枣仁中含量范围为0.050 6%~0.066 0%。结论 建立的6’’’-芥子酰斯皮诺素HPLC含量测定分析方法灵敏度高、专属性强、重现性好,可用于酸枣仁中掺伪理枣仁的鉴别研究。

八珍汤联合酸枣仁汤治疗老年股骨粗隆间骨折患者术后失眠临床研究

目的观察八珍汤联合酸枣仁汤改善老年股骨粗隆间骨折患者术后失眠的疗效。方法纳入本院老年股骨粗隆间骨折术后失眠患者60例,根据入院时间的先后次序,按随机数字表法分为治疗组30例、对照组30例。两组患者骨科治疗相同,对照组患者口服地西泮片,每次5 mg,睡前30 min口服。治疗组患者服用八珍汤联合酸枣仁汤方药,每日1剂。治疗观察两组患者2 w。观察临床疗效、比较治疗前后匹兹堡睡眠质量评分(PSQI评分)、睡眠量表评分(SPIEGEL评分)及治疗过程中不良反应率。结果两组患者治疗前PSQI、SPIEGEL评分无统计学差异(P>0.05),但治疗2 w后,两组患者观察指标均得到明显改善,且中医药治疗组改善较为显著(P<0.05),且临床疗效满意。结论应用八珍汤联合酸枣仁汤治疗老年股骨粗隆间骨折患者术后失眠疗效确切、安全可靠。

基于“瘀热”理论探讨桃仁承气汤治疗脓毒症急性呼吸窘迫综合征有效性的临床研究

目的探讨桃仁承气汤治疗脓毒症急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS)的临床疗效。方法纳入脓毒症ARDS(毒瘀营血证)患者46例,随机分为对照组(23例)和中药治疗组(23例)。对照组给予常规西医治疗,中药组在常规西医治疗的基础上加用桃仁承气汤,观察7 d。观察治疗有效率、中医证候评分、急性生理和慢性健康评分(acute physiology and chronic health evaluation II,APACHE II)、脓毒症相关器官功能衰竭评分(sepsis-related organ failure assessment,SOFA)、氧合指数、C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、降钙素原(procalcitonin,PCT)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、凝血常规、组织因子(tissue factor,TF)、纤溶酶原激活物抑制剂-1(plasminogen activator inhibitor-1,PAI-1)、血液流变学。结果中药治疗组患者治疗有效率明显高于对照组(P<0.05),中药治疗组患者中医证候评分、APACHE II评分和SOFA评分低于对照组(P<0.05)。中药治疗组患者氧合指数高于对照组(P<0.05),中药治疗组患者CRP、PCT、纤维蛋白原(Fib)水平较治疗前下降(P<0.05)。中药治疗组患者全血黏度值(mPas)1、mPas 5、全血低切还原黏度低于较对照组(P<0.05)。结论桃仁承气汤治疗脓毒症ARDS患者是有效的,它可改善患者临床症状、氧合状况、减轻患者全身炎症反应、改善患者血液高凝状态、改善器官功能、减轻病情严重程度。