不同施硒量接种AM真菌对丹参幼苗期生理指标的影响

为分析不同施硒量条件下接种AM真菌菌种对丹参幼苗期生理指标的影响,本文使用盆栽法种植单身作物,并将施硒量(Na_(2)SeO_(3))设定为四个浓度水平,将试验植物分为接种组和对照组。结果发现,接种AM真菌的组别的丹参幼苗的生理质量要显著优于未接种组别并促进其对硒元素的吸收。当硒浓度水平为20µg·mL^(-1)和40µg·mL^(-1)时,其生长指标和生理指标表现优异。同一浓度水平下,接种AM真菌丹参幼苗组别绿素含量和蛋白质含量呈现显著优势,丙二醛和脯氨酸含量均保持在较低水平,表明接种AM真菌能提升植物的抗逆性。同时还发现,接种AM真菌对丹参幼苗的可溶性糖水平不具备直接影响。

四川地区29家医院临床分离真菌的菌种分布及耐药性监测

目的了解2022年四川地区临床分离真菌的菌株分布以及其对常用抗真菌药物的耐药率,促进四川地区抗真菌药物的合理选择。方法收集2022年1月1日—2022年12月31日全国真菌病监测网四川省29家医院临床分离的非重复真菌菌株,参照美国临床和实验室标准协会(CLSI)推荐标准,运用WHONET 5.6及Microsoft Excel进行数据统计与分析。结果该研究共收集非重复真菌菌株16969株,其中念珠菌属占86.95%(14755/16969);隐球菌属占0.47%(80/16969);曲霉菌占8.07%(1371/16969);其他酵母占4.49%(763/16969)。在念珠菌属中,白念珠菌(63.36%,9350/14755)、光滑念珠菌(15.09%,2222/14755)及热带念珠菌(6.44%,951/14755);在隐球菌属中,新生隐球菌占97.50%(78/80);在曲霉菌中,烟曲霉占比最多(56.16%,770/1371)。所有念珠菌属对两性霉素B、棘白菌素的耐药率或非野生型占比相对较低,光滑念珠菌和热带念珠菌对唑类药物的耐药率或非野生型占比相对较高。新生隐球菌对两性霉素B的非野生型占比为10.29%,略高于唑类药物和氟胞嘧啶。曲霉菌总体对两性霉素B和唑类药物以及卡泊芬净的非野生型占比相对较低。结论四川省2022年临床分离的真菌以念珠菌属为主,光滑念珠菌和热带念珠菌对唑类药物耐药率或非野生型占比相对较高,需进行动态监测。

无菌部位侵袭性真菌感染的病原学特点及预后不良危险因素分析

目的探讨患者无菌部位侵袭性真菌感染(IFI)的菌种分布、药物敏感性、临床特征及预后不良危险因素。方法收集2019年7月至2023年6月于承德医学院附属医院从血液、胸腔、腹腔等无菌部位培养物分离出的真菌菌株,通过基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)等方法进行鉴定。酵母菌采用ATB Fungus 3酵母样真菌药敏试剂盒检测抗真菌药物敏感性。利用东华医院信息管理系统收集患者的临床和实验室资料,并进行统计分析。结果175株真菌菌株主要由酵母菌(169/175,96.57%)和丝状真菌(6/175,3.43%)构成,白念珠菌是IFI最常见致病菌(91/175,52.00%)。单因素分析显示,入住ICU、中心静脉置管、机械通气、连续性肾脏替代治疗(CRRT)、感染性休克及感染热带念珠菌是患者预后的影响因素(P<0.05)。多因素Logistic回归分析发现机械通气与感染热带念珠菌是患者预后不良的独立危险因素。降钙素原(PCT)是IFI患者预后不良的可靠预测指标。药敏结果显示多数光滑念珠菌和热带念珠菌的耐药株出现唑类交叉耐药的现象。结论临床需重视非白念珠菌,尤其是重视光滑念珠菌和热带念珠菌对唑类药物的耐药率及交叉耐药。

农药对土壤微生物种群的影响以及对抗药性菌株的初筛

【目的】筛选对乐果(有机磷类)、高效氯氰菊酯(菊酯类)和吡虫啉(新烟碱类)有抗药性的优势菌株,探究上述农药对土壤微生物种群生长的影响。【方法】通过人为施药筛掉敏感菌,采用稀释涂布法和连续划线法分离纯化对农药有一定抗性的优势细菌进行表型特征和16SrDNA的鉴定。【结果】从农药处理后的土壤中筛选到的优势细菌主要为芽孢杆菌属、金黄杆菌属、假单胞菌属和不动杆菌属4类:芽孢杆菌属中的C3菌株在高质量浓度4.000 g/L乐果和0.100 g/L的吡虫啉处理的土壤中不存在其菌落;不动杆菌属中的C5菌株在0.120 g/L和0.040 g/L的高效氯氰菊酯以及0.100 g/L吡虫啉处理组中均未发现该菌生长;假单胞菌属中的C6菌株在4.000 g/L的乐果及0.050 g/L和0.100 g/L的吡虫啉处理的土壤中无此菌株生长。不同质量浓度农药对土壤菌落均有不同程度的抑制。土壤中细菌和真菌菌落的抑制率与质量浓度之间呈正相关,且随时间推移,抑制率呈递减趋势,第14天仅有0.100 g/L吡虫啉处理组中的土壤细菌和真菌菌落数未恢复至正常水平;真菌中乐果和吡虫啉处理组间,第14天低质量浓度的土壤真菌菌落数显著(P<0.05)高于高质量浓度的土壤菌落数。【结论】土壤中存在对乐果、高效氯氰菊酯和吡虫啉农药有一定抗药性的优势细菌,为后续定向培育优良菌株提供理论基础;各农药的种类不同对土壤真菌和细菌菌落数量的抑制程度也有差异,其抑制程度为:吡虫啉>乐果>高效氯氰菊酯,且吡虫啉对土壤细菌数量抑制程度最高,对土壤真菌影响较小。

长白山北虫草鉴定及灵芝真菌免疫调节蛋白基因的转化

选用采自长白山的野生虫草为材料,分离虫草真菌并进行分子生物学鉴定,通过ITS引物扩增和基因序列比对鉴定出4个新的北虫草真菌。用农杆菌介导法将灵芝真菌免疫调节蛋白基因(Fip)转化北虫草,经PCR、Southern等分子生物学检测,灵芝Fip基因已转入北虫草基因组中。

功能微生物对土壤重金属的活化作用研究

为了解决土壤中重金属对水资源、人类健康造成威胁的问题,避免采用传统物理、化学方法处理土壤重金属所导致的二次污染,提出采用微生物对土壤中的重金属进行治理的思路。在对土壤重金属含量分析的基础上,对H_(1)细菌、H_(2)细菌、Su_(1)真菌、Su_(2)真菌四种菌株对土壤中重金属Cd、Cu以及Pb的活化作用展开研究,最后得出:Su_(1)真菌菌株对土壤中重金属具有较佳的活化作用。

166例真菌感染分离鉴定及药敏试验结果分析

目的 分析 16 6例真菌感染阳性标本分离鉴定及药敏试验结果 ,以探讨其预防措施。方法 沙保弱培养基培养标本 ,用 ID真菌鉴定板条进行鉴定分型 ,纸片扩散法进行药敏实验。结果 16 6株真菌中 ,白色念珠菌感染率最高 ,占 74 .1% ,并且分离出了烟曲霉菌、构巢曲霉菌等少见菌株 ;分离的菌株对制霉菌素、两性霉素 B和伊曲康唑的敏感率较高 ,分别为 10 0 %、97.8%和 96 % ;对 5 -氟胞嘧啶和咪康唑的耐药率较高 ,分别为 7.3%和 8.6 %。结论 对于提高真菌的检测手段、及时进行真菌的培养和药敏实验、合理使用抗菌药物、减少真菌感染、特别是耐药菌株感染的发生有着重要的意义。

花生品种(系)抗黄曲霉筛选鉴定

选用若干花生主栽品种、从ICRISAT引进品种及福建农林大学近年来选育的品种(系)为材料,用所分离的产毒力较强的6个菌株接种测定。结果表明,闽花6号等3份品种(系)对黄曲霉AF2菌株表现较抗,侵染率<30%,感染指数<6,明显低于对照抗黄1号和粤油9号,且闽花6号具较宽的抗菌谱,可为花生抗黄曲霉育种提供抗性基因源,而抗黄1号属中感品种。并对花生品种抗黄曲霉病性的鉴定做了讨论。

耐汞真菌的分离及其对废水中Hg(Ⅱ)吸附的研究

该研究以一株从汞(Hg(Ⅱ))污染土壤中分离、纯化得到的具有高耐受Hg(Ⅱ)特性的真菌菌株GX-5为对象,考察了该菌在不同条件下(反应时间、初始浓度、p H值以及投加量等)对Hg(Ⅱ)的吸附特征,并且利用扫描电子显微镜(SEM)对该菌吸附Hg(Ⅱ)前后进行表征。ITS(Internal Transcribed Spacer)r RNA基因测序结果表明,该菌株属于细极链格孢菌(Alternaria tenuissima);条件因素影响实验表明:反应时间6h,p H为5,投加量体积分数为1%时,该菌对废水中的Hg(Ⅱ)吸附效率最高。对该菌处理含汞废水后的菌丝进行扫描电镜观察,结果表明,该菌对Hg(Ⅱ)具有有效的表面吸附作用,并且能够通过某种机理将吸附在菌体表面的Hg(Ⅱ)转化为稳定的晶体结构。

真菌菌株XS3-2-5对含锰废水中Mn(Ⅱ)的生物氧化作用

该研究以一株从锰污染土壤中筛选、分离得到的具有高Mn（Ⅱ）耐受性并具有氧化Mn（Ⅱ）的特性的真菌菌株XS3-2-5为对象,考察了p H值和Mn（Ⅱ）初始浓度对该菌株生长及其氧化Mn（Ⅱ）能力的影响,并结合扫描电镜（SEM）、透射电镜（TEM）、X射线能量色散谱（EDS）、X射线光电子能谱（XPS）等方法,对经过菌株XS3-2-5氧化后的生物锰氧化物进行了表征。ITS（internal transcribed spacer）r RNA基因测序结果表明,该菌株属于Phaeosphaeriopsis sp。pH和Mn（Ⅱ）初始浓度对该菌株的生长速度无显著影响。该菌株（湿重）在p H 5-7范围内对Mn（Ⅱ）（300μmol/L）的氧化率接近200 mg/g。SEM、TEM、EDS和XPS的分析结果表明,Mn（Ⅱ）经过该菌株氧化后的生物锰氧化物主要为二氧化锰。

烤烟有益真菌菌株的筛选与鉴定

为比较不同真菌对烟叶品质的影响,用分离到的27株真菌菌株处理烟叶,通过烟叶化学成分和评吸结果的比较得出:SZ14和YZ2 2个菌株处理烟叶后,烟叶化学成分较协调,烟叶评吸得分明显高于对照;CZ3、CZ12、CZ19、CZ22、CZ61、CZ62和SZ5 7个菌株处理烟叶后,烟叶化学成分较协调,评吸得分高于对照;其它18个菌株对烟叶品质影响不明显。对得分较高的2个菌株进行分子鉴定表明,YZ2为木霉属长梗木霉(Trichoderma longibrachiatum),SZ14为曲霉属(Aspergillussp)。

十株野生猴头菌菌株的栽培性状及麦角甾醇含量

考查采自黑龙江省不同地区的10个猴头菌(Hericium erinaceus)野生菌株的液体培养性状和栽培农艺性状,同时测定了菌丝体、子实体中麦角甾醇含量,为猴头菌育种筛选亲本材料。结果表明:液体培养中,5号和10号菌株菌丝产量较高,分别为2.23g/100 mL、2.39g/100 mL,麦角甾醇含量分别为0.92 mg/g、0.90mg/g;栽培中,5号和10号菌株子实体产量高,菇型圆整、商品性状好;4、6和9号菌株子实体中麦角甾醇含量相对较高。

一种简捷的分离杜鹃花类菌根真菌的方法

目的:简化杜鹃花类菌根真菌的分离方法,快速得到菌株。方法:选择并改良马丁氏-孟加拉红培养基,调整其pH值约为5.0,0.3～0.5cm根段平铺于平板中培养分离菌株,培养条件为25℃黑暗培养12～15d。结果:得到了菌落特征有明显差异的9种类型138个菌根真菌菌株,其中7类菌株在人工条件下回接云锦杜鹃形成了菌根结构。结论:实验证明改良的分离方法操作简单快捷,是杜鹃花类菌根真菌分离的一种可靠方法。

一株纤维素降解菌的鉴定及产酶活力测定

为寻找高效纤维素降解微生物用于蚕沙堆肥的腐熟发酵,以羧甲基纤维素钠为碳源,从泰山林地腐殖土中分离纤维素降解菌,结合纤维素刚果红水解圈测定、滤纸条降解试验和纤维素酶活力(滤纸酶活力)测定,从中筛选出一株高效纤维素降解真菌,命名为C2。经形态学鉴定和18S rDNA序列分析,鉴定该菌株为草酸青霉(Penicillium oxalicum)。该菌株有较强的滤纸条降解能力,5 d可将滤纸条降解成糊状,产纤维素酶活力高,摇瓶发酵3 d后滤纸纤维素酶活力达到132.26 U/mL,具有实用价值。

应用原生质体融合技术构建纤维素发酵产油脂菌株的试验

原生质体融合(protoplast fusion)技术是将遗传性状不同的亲本原生质体融合杂交的基因重组技术。从健康桑树根系中分离到一株产油脂内生真菌MOD-1,采用酶解方法制备内生真菌MOD-1和产纤维素酶菌株绿色木霉TP4、T44及长柄木霉TL的原生质体,获得4个菌株的原生质体产量分别为7.02×10~6个/m L、4.43×10~6个/m L、6.35×10~6个/m L和4.35×10~6个/m L,再生率分别为4.90%、3.26%、4.51%和4.12%。优化亲本原生质体灭活条件为:MOD-1菌株经紫外线照射10 min或加热15 min,TP4菌株经紫外线照射25 min或加热20 min,T44菌株经紫外线照射25 min或加热25 min,TL菌株经紫外线照射30 min或加热25 min。在上述条件下各亲本原生质体的灭活率均达到100%。将灭活的MOD-1菌株原生质体分别与不同方式灭活的TP4、T44、TL菌株原生质体融合,经初筛和复筛获得了一株兼具MOD-1与TP4双亲优良性状的融合菌株MP-1,其油脂产量、油脂含量(质量分数)分别为0.082 4 g/L、14.46%,显著高于亲本菌株MOD-1。融合菌株MP-1传代培养10代后,油脂产量与油脂含量的遗传稳定性分别达到92.84%和95.00%。

一株桑枝纤维降解菌株的鉴定及纤维素降解能力测定

利用高产纤维素酶微生物分解桑树枝条中的木质纤维素,有益于桑枝条资源的高效开发利用。采用刚果红染色法,将分离自桑园土壤的菌株经羧甲基纤维素钠（CMC-Na）培养基初筛和桑枝粉培养基复筛后,获得1株能产生纤维素酶的真菌菌株PTY1。PTY1菌株能够在以桑枝粉末为碳源的培养基中良好生长,最适生长p H为6,最适生长温度为32℃。基于形态和18S r DNA序列鉴定PTY1为烟管菌（Bjerkandera adusta）。该菌株产生的纤维素酶类呈现较高的滤纸酶（FPAase）、羧甲基纤维素酶（CMCase）和β-葡萄糖苷酶活性,其中FPAase在发酵第8天的活力最高,可达5.466 U/m L,CMCase在发酵的第6天和第10天出现2个活力小高峰,β-葡萄糖苷酶活力总体较高,发酵第8天活力最高为12.220 U/m L;FPAase最适反应温度为40℃,最适反应p H为5.5,而CMCase在50℃、p H 4.5-5.5时活力较高,均为酸性酶;以CMC-Na为底物时PTY1菌株酶促反应的Km为0.676 mg/m L,Vmax为0.038 9 mg/（m L·min）。PTY1菌株经过诱变处理后,有望成为降解桑枝纤维素的专用菌株。

重庆地区足部真菌感染的现状及耐药性

目的了解近年重庆地区足部真菌感染的分布及耐药情况,为病原学调查及临床治疗提供依据。方法萨布罗培养基培养标本,用ID真菌鉴定板条进行鉴定分型,纸片扩散法进行药敏试验。结果在分离菌株中,红色发癣菌感染率最高占79.1%;分离的菌株对两性霉素B和伊曲康唑的敏感率较高分别为98.9%和98.0%;对5-氟胞嘧啶的耐药率为22.1%。结论及时了解足部真菌感染的变迁及耐药性的变化,对于合理使用抗菌药物、减少真菌感染、特别是耐药菌株感染的发生有着重要的意义。

小麦孢囊线虫病生防真菌08F04菌株的鉴定及防效测定

小麦禾谷孢囊线虫病已成为我国黄淮麦区的重要病害,目前生产上尚缺乏有效的防控方法。菌株08F04是作者从禾谷孢囊线虫孢囊上分离的1株寄生真菌。本研究通过形态学和分子生物学方法,将其鉴定为球孢白僵菌Beauveria bassiana(Bals.)Vuill。2011和2012年对该菌株进行了盆栽和田间防效试验,菌株08F04麦粒砂培养物6%(w/w)土壤处理的盆栽试验孢囊减退率分别达到65.03%和50.95%;田间试验中,菌剂08F04 20 g·m 2沟施处理土壤,2011年在许昌和荥阳的孢囊减退率分别为58.28%和32.13%,2012年分别达到58.49%和44.50%。结果表明,菌株08F04是防治小麦禾谷孢囊线虫病具有较大潜在开发价值的生防菌株。

毛蜂窝菌的栽培技术研究

毛蜂窝菌是一种珍贵的药用真菌,自然资源十分稀有。本文对生长于龙眼树枯枝上的毛蜂窝菌进行了菌株的分离纯化,并通过人工栽培技术首次成功获得了毛蜂窝菌的子实体,为今后开发利用毛蜂窝菌奠定了基础。

土壤真菌中具有引起稻瘟霉孢子形态异常活性的菌株筛选

利用稻瘟霉孢子形态异常或生长抑制活性的模型 ,对从土壤中分出的 732株真菌进行初步筛选 ,得到 2 4 5株活性菌株 ,再经多次反复筛选 ,得到既稳定又能抑制一些病原真菌生长的11株活性菌株 ,其中 131号菌株活性最好且具有抗病原真菌作用 ,亦具有良好的遗传稳定性。