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Effects of Rosiglitazone and Serum on the Expressions of PPARα and PPARγ Genes in the Induced Differentiation Process of Pig Preadipocyte 被引量:1
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作者 李芳琼 刘海峰 朱砺 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2011年第6期893-896,共4页
[Objective] The research aimed to discuss the effects of rosiglitazone and serum on the expressions of PPARα and PPARγ genes in the induced differentiation process of pig preadipocyte.[Method] The pig preadipocyte w... [Objective] The research aimed to discuss the effects of rosiglitazone and serum on the expressions of PPARα and PPARγ genes in the induced differentiation process of pig preadipocyte.[Method] The pig preadipocyte was separated by using the collagenase digestion method.Three kinds of different differentiation culture solutions were used to induce the differentiation of pig preadipocyte.The oil red O staining extraction method was used to contrast the influences of different differentiation culture solutions on the variation of cellular fat content in the differentiation process.Moreover,the variation trends of PPARα and PPARγ expressions in the cellular differentiation process in the different differentiation culture solutions were detected by the real-time quantification PCR.[Result] The cellular fat accumulation was the fastest in MII which contained rosiglitazone and was the slowest in MI which didn't contain rosiglitazone.Rosiglitazone could significantly increase the expression of PPARγ gene(P0.01),but had the certain inhibition effect on the expression of PPARα gene,which wasn't significant.The serum had the extremely significant up-regulation effect on the expression of PPARγ gene(P0.01),but had the extremely significant down-regulation effect on the expression of PPARα gene(P0.01).[Conclusion] Rosiglitazone could greatly promote the expression of PPARγ gene,which increased the cellular fat deposition.Maybe the activator of PPARγ gene existed in the serum,and the inhibitor of PPARα gene existed simultaneously. 展开更多
关键词 ROSIGLITAZONE SERUM ADIPOgeneSIS preadipocyte gene expression pig
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肾上腺素对民猪脂肪细胞基因表达模式的影响
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作者 孟煜晖 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2024年第5期49-54,72,共7页
为了探究冷刺激对民猪脂肪细胞代谢的影响,试验以体外培养的前脂肪细胞为试验材料,通过添加终浓度为1 000 nmol/L的肾上腺素模拟冷刺激环境,同时设置未添加肾上腺素的对照组,诱导分化7 d后收集细胞进行转录组测序(RNA-seq)分析,筛选出... 为了探究冷刺激对民猪脂肪细胞代谢的影响,试验以体外培养的前脂肪细胞为试验材料,通过添加终浓度为1 000 nmol/L的肾上腺素模拟冷刺激环境,同时设置未添加肾上腺素的对照组,诱导分化7 d后收集细胞进行转录组测序(RNA-seq)分析,筛选出表达水平发生变化的差异基因,对差异表达基因进行GO功能注释和KEGG信号通路富集分析,最后通过qRT-PCR验证试验检测RNA-seq结果的准确性。结果表明:肾上腺素会改变脂肪细胞中基因的表达模式,引起128个基因显著上调,93个基因显著下调,其中游离脂肪酸受体4(FFAR4)基因上调倍数最大,为4.63倍。对差异表达基因进行GO功能注释,在分子功能注释分析中有8个条目显著富集,在生物过程注释分析中有128个条目显著富集,在细胞组分注释分析中无显著富集的条目。对差异基因进行KEGG信号通路富集分析,仅神经活性配体-受体相互作用通路被富集。说明肾上腺素可以改变脂肪细胞原有的代谢模式,与脂肪酸代谢和糖原合成等相关的基因发生了显著变化,同时细胞内外的信号转导也发生了改变。 展开更多
关键词 肾上腺素 民猪 前脂肪细胞 高通量测序 基因表达
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猪脂肪前体细胞分化过程中聚脂相关基因的表达模式 被引量:22
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作者 张罕星 朱晓彤 +5 位作者 束刚 高萍 高淑静 张常明 江青艳 陈瑶生 《动物学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第1期143-150,共8页
本实验采用胶原酶消化法分离猪皮下脂肪前体细胞,用含850nmol/L胰岛素和50nmol/L地塞米松的诱导培养液进行诱导,采用油红O提取法测定了细胞中的甘油三酯含量,同时采用实时定量RT-PCR方法检测了细胞分化过程中聚脂相关基因的表达。结果显... 本实验采用胶原酶消化法分离猪皮下脂肪前体细胞,用含850nmol/L胰岛素和50nmol/L地塞米松的诱导培养液进行诱导,采用油红O提取法测定了细胞中的甘油三酯含量,同时采用实时定量RT-PCR方法检测了细胞分化过程中聚脂相关基因的表达。结果显示:转录因子PPARγ和C/EBPβ在诱导后12h即迅速表达,SREBP-1mRNA表达水平在诱导后12h出现显著下调,随后逐渐升高,96h达到最高水平;脂肪合成相关酶基因GPDH、FAS、ACC和LPL呈现出与SREBP-1相似的表达模式;脂肪酸转运相关基因aP2、FAT、FATP1与VLDLR的表达量随着细胞分化过程的延长而不断增加,并且与细胞内甘油三酯的含量变化高度相关。本实验结果表明,PPARγ、C/EBPβ和SREBP-1可能是调控猪脂肪前体细胞分化的关键转录因子。猪皮下脂肪组织在聚脂过程中,在分化早期可能以脂肪细胞自身合成脂肪酸为主,而后期则主要依赖细胞外脂肪酸的跨膜转运。这些结果可能有助于揭示脂肪细胞的分化调控规律。 展开更多
关键词 脂肪生成 脂肪前体细胞 基因表达
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猪肌内脂肪前体细胞与皮下脂肪前体细胞分化过程中基因差异表达分析 被引量:23
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作者 张罕星 朱晓彤 +6 位作者 束刚 周桂炫 高萍 高淑静 张常明 江青艳 陈瑶生 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期3760-3768,共9页
【目的】探讨猪肌内脂肪细胞与皮下脂肪细胞的基因表达差异。【方法】通过改进的胶原酶消化法,分别从猪(大×长二元杂)皮下脂肪组织和背最长肌肌肉组织中分离脂肪前体细胞,用850nmol·L-1胰岛素和50nmol·L-1地塞米松诱导... 【目的】探讨猪肌内脂肪细胞与皮下脂肪细胞的基因表达差异。【方法】通过改进的胶原酶消化法,分别从猪(大×长二元杂)皮下脂肪组织和背最长肌肌肉组织中分离脂肪前体细胞,用850nmol·L-1胰岛素和50nmol·L-1地塞米松诱导细胞分化,采用油红O提取法测定细胞分化过程中的聚酯水平。同时采用实时荧光定量PCR方法检测细胞分化过程中的转录调控因子基因(PPARγ、C/EBPβ与SREBP-1)、脂肪合成酶相关基因(GPDH、ACC和SCD-1)、脂肪酸转运相关基因(LPL、FAT与AP2)以及肌肉旁分泌因子受体基因(ACVR2B、IL-6R和IGF-1R)的表达模式。【结果】猪肌内脂肪前体细胞诱导后聚酯的速度快于皮下脂肪前体细胞。与此相似,肌内脂肪前体细胞中PPARγ、SREBP-1、SCD-1、LPL、AP2和FAT的mRNA表达在分化后期均显著高于皮下脂肪细胞。肌肉旁分泌因子受体基因ACVR2B、IGF-IR和IL-6RmRNA在皮下脂肪前体细胞随分化程度的增加其表达水平逐渐降低,但肌内脂肪前体细胞ACVR2B却在诱导后不断上调。【结论】建立了猪肌内和皮下脂肪前体细胞的原代培养模型,发现在离体培养条件下猪肌内脂肪前体细胞比皮下脂肪前体细胞具有更强的分化聚酯能力。从在体情况下肌内脂肪的沉积量少,沉积时间晚等现象可以推测肌内脂肪前体细胞的分化有可能受到肌肉旁分泌因子的局部抑制。 展开更多
关键词 脂肪前体细胞 离体培养 肌内脂肪 基因表达
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从江香猪FoxO 4基因真核表达载体的构建及其在皮下脂肪前体细胞中的表达 被引量:3
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作者 孙成娟 许厚强 +3 位作者 段志强 陈伟 赵佳福 周迪 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期2268-2276,共9页
本研究旨在克隆从江香猪FoxO 4基因编码区序列,对FoxO 4基因功能进行初步探究。采用qRT-PCR技术对从江香猪(6月龄)不同组织中FoxO 4基因的相对表达量进行检测;PCR扩增FoxO 4基因CDS区,构建真核表达载体pEGFP-N3-FoxO 4;利用脂质体法将... 本研究旨在克隆从江香猪FoxO 4基因编码区序列,对FoxO 4基因功能进行初步探究。采用qRT-PCR技术对从江香猪(6月龄)不同组织中FoxO 4基因的相对表达量进行检测;PCR扩增FoxO 4基因CDS区,构建真核表达载体pEGFP-N3-FoxO 4;利用脂质体法将重组质粒pEGFP-N3-FoxO 4瞬时转染从江香猪皮下脂肪前体细胞,通过qRT-PCR方法,检测FoxO 4、PPARγ、LPL、FAS、ACC、ATGL、HSL的表达水平。结果显示:FoxO 4基因在从江香猪脂肪组织中表达量最高;构建的重组真核表达载体pEGFP-N3-FoxO 4在从江香猪皮下脂肪前体细胞中成功表达,与对照组相比,LPL、FAS、ACC、ATGL、HSL基因的表达均显著上调。综上表明,FoxO 4对脂质代谢具有一定的调控作用,可能是影响从江香猪猪肉品质的重要候选基因,为进一步了解从江香猪脂肪沉积机制提供理论基础。 展开更多
关键词 FoxO4基因 真核表达载体 皮下脂肪前体细胞 从江香猪
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罗格列酮和血清对猪前脂肪细胞诱导分化过程中PPARα和PPARγ基因表达的影响 被引量:1
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作者 李芳琼 刘海峰 朱砺 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2011年第15期9281-9283,9320,共4页
[目的]探讨罗格列酮和血清对猪前脂肪细胞诱导分化过程中PPARα和PPARγ基因表达的影响。[方法]利用胶原酶消化法分离了猪皮下前脂肪细胞,采用3种不同分化培养液对猪前脂肪细胞进行了诱导分化,借助油红O染色提取法比较了不同分化培养液... [目的]探讨罗格列酮和血清对猪前脂肪细胞诱导分化过程中PPARα和PPARγ基因表达的影响。[方法]利用胶原酶消化法分离了猪皮下前脂肪细胞,采用3种不同分化培养液对猪前脂肪细胞进行了诱导分化,借助油红O染色提取法比较了不同分化培养液对分化过程中细胞内脂肪含量变化的影响,并运用实时定量RT-PCR方法检测了不同分化培养液细胞分化过程中PPARα和PPARγ基因表达的变化趋势。[结果]细胞内脂肪聚积以含罗格列酮的MⅡ最快,不含罗格列酮的MⅠ最慢。罗格列酮可极显著上调PPARγ基因的表达(P<0.01),而对PPARα基因的表达存在一定的抑制作用,但不显著。血清对PPARγ基因的表达有极显著的上调作用(P<0.01),而对PPARα基因的表达有极显著下调作用(P<0.01)。[结论]罗格列酮可极大地促进PPARγ基因的表达,继而增进细胞内脂肪沉积;血清中可能存在PPARγ基因的激活剂,同时存在PPARα基因的抑制因子。 展开更多
关键词 罗格列酮 血清 脂肪形成 前脂肪细胞 基因表达
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