支气管哮喘患者血清CCR5、LXA4表达水平及其与免疫功能失调、气道重塑的相关性分析

目的分析支气管哮喘患者血清细胞趋化因子受体5(CCR5)、脂氧素A4(LXA4)表达水平及其与免疫功能失调、气道重塑的相关性。方法采用回顾性研究,根据疾病严重程度将2021年1月至2023年5月北京市大兴区人民医院收治的80例支气管哮喘患者分为轻中度组(n=60)和重度组(n=20),另选取同期入院体检的50名健康体检者作为对照组。检测各组血清CCR5、LXA4和免疫功能指标(CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)),并采用CT仪检查其右肺上叶尖段的气道重塑指标[气道管腔面积(LA)、气道管壁面积(WA)和气道总面积(TA)]。根据双变量Spearman相关性检验分析血清CCR5、LX4A与免疫功能失调和气道重塑的相关性,并建立多因素Logistic模型分析影响支气管哮喘患者血清CCR5、LX4A的独立危险因素。结果轻中度组、重度组患者血清CCR5、LX4A水平均高于对照组,重度组患者血清CCR5高于轻中度组患者,LXA4水平低于轻中度组患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。轻中度组、重度组患者血清CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)水平均低于对照组,CD8^(+)水平高于对照组患者,且重度组患者CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)水平均低于轻中度组患者,CD8^(+)水平高于轻中度组患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。轻中度组、重度组患者右肺上叶尖段LA、WA、TA水平均低于对照组,且重度组患者右肺上叶尖段LA、WA、TA水平均低于轻中度组,差异均有统计学意义(P<0.05)。血清CCR5、LX4A与CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)呈负相关性(P<0.05),与CD8^(+)、LA、WA、TA呈正相关性(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,疾病严重程度、CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)、LA、WA、TA均是导致支气管哮喘患者血清CCR5、LX4A升高的独立危险因素(P<0.05)。结论血清CCR5、LX4A与支气管哮喘疾病严重程度、免疫功能失调和气道重塑密切相关。

脂氧素A4及脂氧素A4受体在慢性鼻-鼻窦炎上皮-间质转化中的作用

目的研究脂氧素A4(lipoxin A4,LXA4)及脂氧素A4受体(lipoxin A4 receptor,ALXR)在慢性鼻-鼻窦炎(CRS)上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)中的作用,进一步探究CRS黏膜组织重塑的发病机制。方法①检测CRS患者鼻黏膜中ALXR的表达;②通过转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)诱导体外人鼻黏膜上皮细胞(human nasal mucosa epithelial cells,HNEpC)上皮向间质转化后,分别加入0、1、10、100、200 nM的LXA4,显微镜下观察细胞的形态变化,RT-PCR、Western blot检测细胞表面标志物钙黏附蛋白E(E-cadherin,E-Cad)、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)的表达变化,酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测细胞培养液中Ⅲ型胶原蛋白的含量;预先用ALXR拮抗剂叔丁氧羰基-2(Butoxycarbonyl-2,BOC-2)处理30 min后,再依次加入LXA4及TGF-β1,观察LXA4对TGF-β1诱导的HNEpC发生EMT的影响。结果①ALXR在CRS患者中高表达,与对照组比较有统计学差异(χ^(2)=4.862,P<0.05);②TGF-β1作用120 h,细胞变得疏松,部分由扁平状变为长梭形,E-Cad表达减少,α-SMA表达增加,且培养皿中Ⅲ型胶原蛋白的沉积量也随着观察时间的延长逐渐增加;③LXA4可抑制TGF-β1诱导的EMT,阻止细胞转化为梭形,抑制α-SMA的表达,而ALXR拮抗剂BOC-2可减弱LXA4的抑制作用(χ^(2)=3.027,P<0.05)。结论①ALXR在CRS患者中高表达;②一定浓度的TGF-β1能够诱导HNEpC发生EMT,致细胞形态、功能及表面标志均发生变化;③一定浓度的LXA4可通过ALXR抑制TGF-β1诱导的鼻黏膜EMT。LXA4及ALXR可能参与黏膜组织的重塑,与CRS的病理生理过程密切相关。

脂氧素A4受体ALXR在子宫内膜异位症患者在位及异位子宫内膜组织中的表达及意义

目的探讨脂氧素A4受体ALXR在子宫内膜异位症(EMs)患者在位及异位内膜组织中的表达水平及其临床意义。方法因EMs行腹腔镜手术治疗的患者27例,留取在位子宫内膜组织(EMs在位内膜组)和异位子宫内膜组织(EMs异位内膜组),取同期因良性卵巢囊肿行腹腔镜手术治疗患者30例为对照组,留取宫腔内正常内膜组织。分别采用实时荧光定量PCR技术、免疫组化法检测各组内膜组织中ALXR mRNA及蛋白表达水平。结果 EMs异位内膜组ALXR mRNA表达水平为0.069±0.020,EMs在位内膜组为0.039±0.013,对照组为0.019±0.008,EMs异位和在位内膜组的表达水平均明显高于对照组(均P<0.05),EMs异位内膜组又高于在位内膜组(P<0.05)。EMs异位和在位内膜组ALXR蛋白表达水平明显高于对照组(P<0.05)。结论 ALXR mRNA及蛋白在EMs异位及在位内膜组织中均呈高表达状态,推测ALXR可能与EMs发病有关。

脂氧素A4受体在大肠癌中的表达及临床意义

目的探讨脂氧素A4受体(ALX)在大肠癌组织中的表达及其与各临床病理因素间的关系。方法应用免疫组织化学方法(SABC法)检测正常大肠组织、大肠腺瘤组织及大肠癌组织中脂氧素A4受体的表达。结果 ALX在正常大肠组织、大肠腺瘤组织及大肠癌组织中表达逐渐降低,3组间比较差异有统计学意义(P<0.05);ALX在不同分化程度的大肠癌组织中表达依次降低,但无显著性差异(P>0.05);ALX在不同Dukes分期的大肠癌组织中差异无统计学意义(P>0.05)。结论 ALX在大肠癌的发生发展中起重要作用,具有一定的疾病预防、临床诊断的指导意义。

甲酰基肽受体2介导脂氧素A4减轻缺氧/复氧所致大鼠心肌细胞凋亡的作用

目的探讨甲酰基肽受体2(FPR2)介导脂氧素A4(LXA4)减轻缺氧/复氧所致大鼠心肌细胞凋亡的作用。方法将大鼠心肌细胞H9C2分为空白对照组、缺氧/复氧组、LXA4处理组。空白对照组细胞不做任何处理,缺氧/复氧组细胞建立缺氧/复氧模型,LXA4处理组细胞在缺氧/复氧处理后给予10 nmol/L LXA4干预。检测各组心肌细胞FPR2 mRNA的表达情况及细胞凋亡情况,并计算凋亡指数。结果缺氧/复氧组、LXA4处理组、空白对照组细胞的FPR2 mRNA相对表达量依次升高,而凋亡指数依次降低(均P<0.05)。结论 LXA4在FPR2介导下减轻了缺氧/复氧损伤导致的心肌细胞凋亡。

脂氧素A4受体在炎症中的作用

脂氧素A4受体是一种经典的G蛋白偶联受体;其表达在微观上受到转录和翻译水平的调节,在宏观上受到促炎与抗炎介质的调节以及药物、年龄等其它因素的影响。该受体主要表达于白细胞,结合多种激动性配体,调节炎症反应,在炎症中具有重要作用。本综述着重介绍脂氧素A4受体在炎症中所起的作用,并对该受体的称谓进行了简单的整理。

BML-111通过抑制p38 MAPK/NF-κB通路减轻大鼠肠缺血再灌注早期急性肺损伤

目的:探讨脂氧素受体激动剂BML-111在肠缺血再灌注早期急性肺损伤中的作用及其机制。方法:32只8周龄健康雄性SD大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组、缺血再灌注+BML-111处理组(BML-111组)和缺血再灌注+Boc-2+BML-111处理组(Boc-2组),BML-111组和Boc-2组在再灌注开始时通过腹腔注射给予BML-111(1mg/kg),Boc-2组在麻醉后通过腹腔注射给予Boc-2(50μg/kg),另两组注入等量生理盐水。采用夹闭SD大鼠肠系膜上动脉45 min后再灌注6 h的方法造成肠缺血再灌注损伤模型。处死大鼠取肺标本,HE染色观察肺组织病理学改变,检测肺组织含水率;ELISA检测肺组织TNF-α、IL-1β和IL-6水平;蛋白质印迹法检测肺组织磷酸化p38 MAPK和NF-κB蛋白表达水平。结果 :肠缺血再灌注导致明显肺损伤,肺含水率增加,TNF-α、IL-1β和IL-6含量明显升高,p38 MAPK/NF-κB通路活化;BML-111可抑制肺组织p38 MAPK/NF-κB活化,减轻小肠缺血再灌注引起的肺损伤,并下调肺组织TNF-α、IL-1β和IL-6含量,当应用Boc-2处理后,BML-111的肺保护作用被取消。结论 :BML-111通过抑制p38 MAPK/NF-κB通路活化促进肠缺血再灌注早期肺损伤炎症消退。

ALX-R在子痫前期患者胎盘组织中的表达及其与NF-κB p65的相关性

目的:观察子痫前期(PE)患者胎盘组织中脂氧素A4受体(ALX-R)、核因子-κB p65(NF-κB p65)表达的变化,探讨两者在PE发生发展中的作用及相关性。方法:采用RT-PCR方法、免疫组化法检测PE组(轻度10例、重度20例)与对照组(20例)孕妇胎盘组织中ALX-R、NF-κB p65 mRNA和蛋白的表达水平。结果:(1)胎盘组织中ALX-RmRNA表达水平随病情严重程度而明显下降,重度PE组低于轻度PE组、对照组(P<0.01);NF-κB p65 mRNA表达水平随病情严重程度而升高,重度PE组高于轻度PE组、对照组(P<0.05);(2)胎盘组织中PE组ALX-R蛋白的表达强度低于对照组(P<0.01);PE组NF-κB p65蛋白的表达强度高于对照组(P<0.01);(3)重度与轻度PE组胎盘组织中ALX-R与NF-κB p65的mRNA和蛋白表达水平无明显相关性;对照组胎盘组织中ALX-R与NF-κB p65的mRNA和蛋白表达水平呈负相关(r=-0.86,P<0.01;r=-0.63,P<0.01)。结论:ALX-R与NF-κB p65的表达,可能与PE发生发展的病理生理过程密切相关。

ALX-R、5-LOX及IL-1β在子痫前期胎盘组织中的表达及其意义

目的探讨子痫前期患者胎盘组织中脂氧素受体(ALX-R)、5-脂氧合酶(5-LOX)、白介素-1β(IL-1β)的mRNA表达及其意义。方法采用RT-PCR方法检测30例子痫前期组患者(重度20例,轻度10例)和正常妊娠孕妇(20例,对照组)胎盘组织中ALX-R mRNA、5-LOX mRNA、IL-1βmRNA的表达情况。结果(1)与轻度组、对照组比较,重度组ALX-R mRNA表达降低,5-LOX mRNA和IL-1βmRNA表达增高(P<0.05);而轻度组与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。(2)重度组与对照组胎盘组织ALX-R mRNA与IL-1βmRNA、5-LOX mRNA表达水平呈负相关关系(P<0.05),重度组、轻度组与对照组胎盘组织中5-LOX mRNA与IL-1βmRNA表达呈正相关关系(P<0.05)。结论子痫前期胎盘组织中ALX-R表达减少,5-LOX和IL-1β表达增高,提示3者可能参与子痫前期的发生发展。

ALX-R mRNA和5-LOX mRNA在子痫前期胎盘组织中的表达及其意义

目的:探讨子痫前期患者胎盘组织中脂氧素受体(ALX-R)、5-脂氧合酶(5-LOX)的mRNA表达及其意义。方法:采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法检测子痫前期组(轻度10例、重度20例)和对照组(20例)孕妇胎盘组织中ALX-R mRNA、5-LOX mRNA的表达水平。结果:①重度子痫前期组胎盘组织中ALX-R mRNA表达水平低于轻度子痫前期组、对照组,差异有统计学意义(P<0.01),轻度子痫前期组与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);②5-LOX mRNA的表达随着病情的严重程度而升高,重度子痫前期组患者胎盘组织中5-LOX表达高于轻度子痫前期组、对照组,差异有统计学意义(P<0.05),轻度子痫前期组与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:子痫前期胎盘组织中ALX-R表达减少,5-LOX表达增高,可能与子痫前期的发生、发展的病理生理过程密切相关。

甲酸基肽受体2抑制滋养细胞增殖侵袭功能的机制

目的:研究甲酸基肽受体2(FPR2)对滋养细胞(TEV-1)增殖侵袭功能的调控作用及其机制。方法:构建FPR2慢病毒载体后,转染人TEV-1细胞来过表达FPR2;采用MTT法、Transwell法和划痕实验检测细胞的增殖、迁移和侵袭能力;采用RT-PCR和Westernblot检测核转录因子(NF-κB)和基质金属蛋白酶9(MMP9)m RNA和蛋白表达。结果:过表达FPR2后,TEV-1细胞的FPR2基因和蛋白的表达水平显著升高(P<0.001),证明过表达FPR2成功。过表达FPR2后,TEV-1细胞的增殖能力受到显著抑制(P<0.01),TEV-1细胞侵袭能力明显下降(P<0.05),TEV-1细胞迁移能力显著下降(P<0.01)。过表达FPR2转染TEV-1细胞后,NF-κB和MMP9的m RNA和蛋白水平显著下降(P<0.001)。结论:FPR2可能通过NF-κB/MMP9信号通路抑制TEV-1细胞的增殖、迁移和侵袭功能。

乌司他丁对ARDS大鼠ALX/cAMP/p-Akt/Nedd4通路及肺泡液体清除率的影响

目的:探讨乌司他丁对急性呼吸窘迫综合征(ARDS)大鼠脂氧素A4受体(ALX)/环磷酸腺苷(c AMP)/磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)/Nedd4通路及肺泡液体清除率的影响。方法:45只SD大鼠随机分为对照组、模型组、乌司他丁低(25000 U/kg)、中(50000 U/kg)、高(100000 U/kg)剂量组,每组9只,除对照组外,其余各组大鼠均通过气管滴注脂多糖(LPS)诱导大鼠ARDS模型,对照组气管滴注等量生理盐水,模型构建成功后根据各组给药剂量行腹腔注射,对照组及模型组腹腔注射等量生理盐水。血气分析仪检测各组大鼠动脉氧分压(PaO_(2))及氧合指数(PaO_(2)/FiO_(2)),ELISA检测大鼠肺组织炎症因子表达,HE染色检测大鼠肺组织形态学变化,测定离体肺组织肺泡液体清除率,Western blot检测ALX/c AMP/p-Akt/Nedd4通路相关蛋白表达。结果:与对照组相比,模型组大鼠PaO_(2)及PaO_(2)/FiO_(2)显著降低,肺损伤评分显著升高,肺组织及肺泡结构损伤严重,肺组织中TNF-α、IL-6、IFN-γ等炎症因子表达显著升高,肺泡液体清除率、ALX、c AMP、p-Akt、钠通道(ENa C)、钠/钾-ATP酶(Na/K-ATPase)蛋白表达显著降低;与模型组相比,乌司他丁各剂量组大鼠PaO_(2)及PaO_(2)/FiO_(2)呈升高趋势,肺组织及肺泡结构损伤得到一定缓解,炎症因子表达呈降低趋势,肺泡液体清除率逐渐升高,ALX/c AMP/p-Akt/Nedd4通路相关蛋白表达逐渐升高,且呈剂量依赖性,高剂量组效果更好。结论:乌司他丁可显著提高ARDS大鼠肺泡液体清除率,可能与其激活ALX/c AMP/p-Akt/Nedd4通路有关。

脂氧素A4对脓毒症肥胖大鼠肝脏TLR4、TRAF6表达的影响

目的探讨脂氧素A4(LXA4)对脂多糖诱导肥胖大鼠感染脓毒症的保护作用及其对肝脏Toll样受体4(TLR4)、肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)表达的影响。方法选取3周龄雄性SpragueDawley大鼠60只随机分为普通组和肥胖组(n=30),建立高脂饮食诱导的肥胖大鼠模型,将两组大鼠再随机分成对照组、脓毒症组、脂氧素组,每组各取8只大鼠。对照组、脓毒症组、脂氧素组分别予生理盐水、脂多糖、脂氧素A4+脂多糖腹腔注射,观察12 h后心脏采血并采集肝脏组织。ELISA法检测血清白细胞介素6(IL-6)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;蛋白免疫印迹法检测肝脏组织TLR4、TRAF6蛋白水平;实时荧光定量PCR法检测TLR4 m RNA、TRAF6 m RNA的表达水平。结果高脂饮食喂养6周后,肥胖组大鼠的平均体重、Lee's指数明显高于普通组(P<0.05)。与普通组比较,肥胖组血清IL-6、TNF-α水平明显增高(P<0.05);同一饮食组内,脓毒症组较对照组血清IL-6、TNF-α水平明显增高(P<0.05),脂氧素组较脓毒症组血清IL-6、TNF-α水平显著降低(P<0.05)。与普通组比较,肥胖组大鼠肝脏组织中TLR4、TRAF6蛋白及TLR4 m RNA、TRAF6m RNA表达水平上调(P<0.05);同一饮食组内,脓毒症组较对照组TLR4、TRAF6蛋白及TLR4 m RNA、TRAF6 m RNA表达量明显增高(P<0.05),而与脓毒症组比较,脂氧素组TLR4、TRAF6蛋白及TLR4 m RNA、TRAF6 m RNA表达量显著降低(P<0.05)。结论 LXA4能降低血清IL-6、TNF-α水平,减轻炎症反应。LXA4能抑制TLR4、TRAF6在脓毒症大鼠肝脏中的表达,可能是通过抑制TLR4的信号传导途径来实现的。