酚类化合物混合暴露与男性精液质量的关联分析

酚类化合物是一类常见的环境内分泌干扰物,流行病学研究表明酚类化合物可能影响男性精液质量,但结果迥异。此外,现有的研究大多局限于单一酚类化合物的影响,忽视了现实情况中多种酚类物质混合暴露的健康影响,酚类化合物混合暴露与男性精液质量的关联仍需进一步探讨。本研究将所建立的高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)方法应用于大样本人群(799名向上海人类精子库捐赠精子样本的志愿者)尿样中18种酚类化合物的浓度测定,并探索了酚类暴露与精液质量之间的关联。通过测量精液指标(包含精子浓度、精子总数、精液体积和精子前向运动百分比),采用多元线性回归和加权分位数之和模型(WQS)分别探索单一酚类化合物暴露和多污染物混合暴露与精液质量参数间的关联。调整潜在的协变量后,多元线性回归模型发现尿液中对羟基苯甲酸乙酯(EtP)暴露与男性精子浓度和精子总数呈显著负相关(P<0.05);WQS混合暴露模型发现,酚类化合物混合暴露与精子浓度下降相关,其中对羟基苯甲酸甲酯与EtP是起主要影响作用的化合物。综上,酚类暴露可能与男性精液质量下降相关,主要表现在降低精子浓度和精子总数。

HPLC法测定新乐康片相关药材中8种活性成分含量

建立HPLC法同时测定新乐康片中三味原料药材钩藤、酸枣仁和萝芙木中钩藤碱、异钩藤碱、斯皮诺素、酸枣仁皂苷A、酸枣仁皂苷B、育亨宾、阿义吗啉及利血平等8种活性成分的含量。采用Titank C18(250 mm×4.6mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.4%磷酸水溶液(含0.05%三乙胺)为流动相,梯度洗脱,检测波长204 nm,流速为1.0 mL/min,柱温为30℃。上述三味药材相关成分之间分离度良好,在λ=204 nm条件下,其在分别的线性范围内与响应值之间的线性关系良好(R^(2)≥0.9990);8种活性成分的平均加样回收率98.37%~101.21%,RSD<2%,仪器精密度、供试品溶液的稳定性与方法重复性均良好。建立的HPLC法可一法对钩藤、酸枣仁和萝芙木三味中药材中8种活性成分含量进行测定,为药业在生产新乐康片前期选材上节约了测定时间,提高了生产效率,同时为新乐康片中活性成分HPLC含量测定方法的建立及其质量标准升级提供参考。

Effect of Semen Extender and Storage Temperature on Motility of Ram Spermatozoa

Cryopreservation of ram semen results in low post-thaw survival. Thus, studies were conducted to optimize liquid-storage of chilled semen. In Experiment 1, semen collected from rams (n = 5) was extended using either milk, TRIS (tris[Hydroxymethyl]aminomethane), TEST (N-Tris (hydroxymethyl)-methyl-2-aminoethane sulfonic acid), or CJ-2 (choline-based extender) and stored at either 4℃ and 15℃. All extenders were supplemented with 5% (v/v) egg yolk. In Experiment 2, semen collected from 9 rams was distributed across TRIS or milk extenders supplemented with 5% or 20% (v/v) egg yolk, and 0 or 1% ethylene glycol (EG), during storage for 72 hours at 4℃. The effect of penicillamine, hypotaurine, and epinephrine (PHE) on motility parameters was also evaluated following storage. In Experiment 1, most of the sperm motility parameters were higher after extension, and storage at 4℃ compared with 15℃ (P P in vivo sperm viability and conception rates when using extended, stored semen for artificial insemination of ewes.

猪冷冻精液应用研究进展

猪冷冻精液使具有高遗传价值的公猪基因在群体中迅速传播,然而实际生产中的低繁殖率导致其推广应用受限。近20年来使用猪冷冻精液配种的繁殖成绩有了显著提高,配种分娩率达80%以上,产仔数达10头以上。显然这些重大进展不能简单地归功于冷冻保护剂的开发和冷冻程序的优化,而是解冻程序、输精方法、母猪发情排卵调控等一系列操作过程不断改进的结果。本文搜集整理了国内外20世纪80年代至今的27篇猪冷冻精液的生产及应用相关的文献,对其中母猪样本量、输精剂量、精子数量、输精方法时间以及不同处理组等技术因素进行分类,明确冻精繁殖成绩出现显著变化的时间节点,并对提高猪冷冻精液应用效果的技术因素进行分析展望,为进一步提高冷冻精液受精效率提供参考与借鉴。

菟丝子提取物UPLC指纹图谱建立及抗氧化谱效关系研究

目的 建立菟丝子提取物的超高效液相色谱(UPLC)指纹图谱,分析其与抗氧化活性的谱效关系。方法 采用UPLC法测定11批菟丝子提取物的指纹图谱,以1,1-二苯基-2-苦基肼自由基、2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐法测定菟丝子体外抗氧化活性,结合正交偏最小二乘法(OPLS)以及灰色关联度法分析指纹图谱与抗氧化活性的关联度,筛选出对抗氧化活性贡献较大的关键物质。结果 菟丝子提取物相似度均在0.97以上,共有21个共有峰,通过与对照品对比,指认了10个峰,其中峰5为新绿原酸,峰8为绿原酸,峰9为隐绿原酸,峰10为咖啡酸,峰12为对香豆酸,峰15为金丝桃苷,峰16为异槲皮苷,峰17为紫云英苷,峰20为槲皮素,峰21为山奈素。灰色关联度以及OPLS结果表明,峰8、15、16、18与抗氧化活性呈现正相关,为主要药效成分。结论 菟丝子抗氧化活性是多组分联合效应的结果,通过指纹图谱与抗氧化谱效分析,可为后面菟丝子的进一步研究提供数据参考。

以酸枣仁、天麻为主的复方口服液改善睡眠作用机制研究

目的评价以酸枣仁、天麻为主的复方口服液改善睡眠的作用及机制。方法以酸枣仁、天麻为主的复方口服液按照低(19.5 mL/kg)、中(39 mL/kg)、高(117 mL/kg)3个剂量每天给予小鼠灌胃,阴性对照物为生理盐水,连续给药30 d后通过直接睡眠实验、延长戊巴比妥钠睡眠时间实验、戊巴比妥钠阈下剂量催眠实验和巴比妥钠睡眠潜伏期实验来观察小鼠睡眠相关指标,并采用ELISA法测定脑组织内GABA、5-HT、DA的水平。结果与阴性对照组相比,复方口服液3个剂量组对小鼠体质量无影响,均无直接睡眠作用,可显著延长小鼠在戊巴比妥钠睡眠实验中的睡眠时间(P<0.001或0.01),均能增加戊巴比妥钠阈下剂量诱导的小鼠睡眠发生率,均能显著缩短小鼠巴比妥钠睡眠潜伏期(P<0.001)。不同剂量组均能提高小鼠脑组织内神经递质GABA(P<0.001或0.01)、5-HT(P<0.001)的水平;低、中剂量虽能提高多巴胺的含量,但差异没有统计学意义,高剂量能显著提高和多巴胺(P<0.001)的水平。结论在实验条件和所设剂量下,实验结果显示该复方口服液对睡眠具有明显的改善作用,其作用机制可能与提高脑组织中GABA、5-HT、DA的水平有关。

反相高效液相制备色谱法分离淡豆豉中的大豆苷、黄豆苷、染料木苷

目的:建立一种快速、高效地从淡豆豉的乙醇提取物中分离3种大豆异黄酮苷的方法。方法:采用索氏提取除去脂溶性成分,再经1300型大孔吸附树脂初步分离纯化,分别用水、10%、20%、30%、40%、50%、70%、95%乙醇梯度洗脱,其中对40%乙醇洗脱流分采用反相高效液相色谱法制备,色谱条件:YWG C18柱(10.0 mm×200 mm,10μm),进样量750μl,乙腈-水-冰醋酸(25:75:1,V/V/V)为流动相,流速3.0 m l/m in,检测波长260 nm。结果:快速分离得到大豆苷、黄豆苷和染料木苷,经外标法检测,所得化合物纯度均达到99%以上。结论:该方法操作简便,可重复进样,适用于高纯度大豆异黄酮苷的制备。

不同稀释液对猪精液4℃保存效果的影响研究

[目的]利用改进的BF-5稀释液（命名为naBF5），开发一种4℃液态保存猪精子的方法。[方法]把猪精子在LEN、BF5和mBF5这3种稀释液中4℃条件下保存5d，按照保存天数分别检测精子的活力、顶体形态、活率和ATP浓度并进行比较。[结果]在4℃条件下保存的1～2d，精子的活率在3种稀释液中没有显著的差异；但是第3天开始，3种稀释液中的精子活率有显著差异，在mBF5中保存的精子活率显著地高于在LEN和BF5中保存的精子。第1～5天，在mBF5和B巧稀释液中保存的精子正常顶体的百分率高于LEN稀释液中保存的精予；并且，在4℃保存5d后，在mBF5稀释液中保存的精子正常顶体的百分率要高于在BF5中保存的精子。在4℃条件下保存的第1～5天，mBF5稀释液中的精子活力百分率高于LEN和BF5稀释液保存的精子活力。在3种稀释液中，保存的第1～5天，精子活力的百分率都持续地降低。保存的第1～5天，mBF5稀释液中保存的精子ATP浓度比LEN和BF5稀释液中保存的高。保存5d之后3种稀释液中精子ATP浓度都迅速下降。[结论]在4℃条件下保存5d，与LEN和BF5稀释液相比，保存在mBF5稀释液中的精子表现出较高的活力、正常的顶体百分率、活率和ATP浓度。

猪精液液态保存的研究进展

猪的人工授精主要使用液态保存精液 ,此法保存精子的存活率高、功能受损较小、授精繁殖率较高且操作简便。体外液态保存猪精液时 ,不仅要注意猪精子对温度变化敏感的特性 ,还要考虑酸碱度、离子的种类和强度、渗透压、过氧化损伤和微生物污染等对精子的影响 ,要向稀释液中添加各种保护成分 ,维持精子的存活和功能。目前主要是比较和改进各种稀释液 ,建立准确的精子质量评价方法 。

高效液相色谱法测定巴豆中巴豆苷的含量

目的:建立用高效液相色谱法(high—performance liquid chromatography,HPLC)测定巴豆中巴豆苷含量的方法。方法:采用反相 HPLC,色谱柱为汉邦 Hedera ODS-2(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-甲醇-水(1:4:95),流速为1 mL/min,检测波长292 nm,柱温25℃.进样量10 μL。结果:该方法的线性范围为0.161～0.967 mg,r=0.999 8(n=6);平均回收率为98.78%,峰面积相对标准差为0.02%。结论:该方法简便、准确、重现性好,可用于巴豆药材中巴豆苷的定量测定。

影响精液质量的几个冷冻技术因素

本文提出冷冻精液生产工艺的技术关键是由冷冻温度和降温速度所构成的精液冷冻温度曲线。通过对国内１５个省、市级牛冷冻精液生产单位的生产工艺程序进行监测，对细管型及颗粒型精液冷冻温度曲线的类型。存在的问题及其影响因素进行了分析研究，提出了提高牛冷冻精液质量的建议。

纯种发酵对淡豆豉主要有效成分的影响

目的:研究纯种发酵对淡豆豉主要有效成分的影响。方法:以高效液相色谱法分别测定自然发酵和纯种发酵淡豆豉中染料木素和大豆黄素的含量并进行比较。结果:纯种发酵淡豆豉中染料木素和大豆黄素的含量均高于自然发酵。结论:利用纯种发酵可以保证淡豆豉生产的稳定性和提高产品质量。

小尾寒羊精液冷冻温度曲线初步研究

在超低温温度计的监控下 ,用氟板法进行了小尾寒羊冻精颗粒的制作。结果表明 ,小尾寒羊精液冷冻的关键因素是冷冻温度和降温速度 ,其冷冻温度曲线的始冻温度为 - 12 4～ - 10 8℃ ,热平衡温度和入氮温度为- 133℃ ,熏蒸温度为 - 10 8～ - 133℃ ;其降温温区分别为滴冻时间 45 s,熏蒸和热平衡共 5 m in,其中熏蒸时间2 5 6 s,热平衡时间 44 s,从而构成了完整的小尾寒羊精液冷冻温度曲线。

HPLC法测人体精液中2,3-吲哚醌的含量

目的建立测定人体精液中2,3-吲哚醌(ISA)浓度的液相方法。方法精液处理后用乙酸乙酯提取,提取液吹干加盐酸溶解后进样,采用高效液相色谱仪外标法检测2,3-吲哚醌的含量结果 2,3-吲哚醌在30～1000μg/L范围内线性关系良好(r=0.9996),回归方程为A=87.366c-381.68,最低检测限为9ng。结论该测定方法准确可靠,可用于精液中2,3-吲哚醌的含量测定。

常用十字花科药用植物中芥子碱的分布研究

十字花科植物中的芥子碱是一种非常有价值的天然抗氧剂,在抗衰老药物的研究中受到了许多学者的重视。为了考察芥子碱在我国药用植物中的分布情况,采用反相高效液相色谱法测定了我国常用的4种十字花科药用植物白芥子、莱菔子、葶苈子、黄芥子中该成分的含量。采用的色谱柱为A lltim a Pheny l柱(250mm×4.6mm i.d.,5μm);流动相:3%醋酸溶液和乙腈的混合溶液,梯度洗脱;检测波长:326nm;柱温:25℃。该法快速,准确度高,重现性好,方法的建立不仅为上述4种药材的质量监测提供了有效的定量分析方法,而且对于芥子碱的深入研究具有重要意义。

乌梅酸枣仁口服液的质量标准研究

目的建立乌梅酸枣仁口服液的定性鉴别和含量测定的方法,为乌梅酸枣仁口服液制定质量标准提供参考依据。方法用薄层色谱(Thin Layer Chromatography)法鉴别乌梅酸枣仁口服液中熊果酸、柠檬酸以及酸枣仁皂苷A;高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography)测定乌梅酸枣仁口服液中的有效成分柠檬酸、酸枣仁皂苷A的含量。结果薄层色谱方法简便、专属性强、重复性好。HPLC法测定结果表明柠檬酸、酸枣仁皂苷A分别在0.2～2.4 mg/ml,50～250μg/ml范围内线性关系良好(r=0.999 8,r=0.999 5),平均加样回收率分别为99.53%、99.88%,RSD分别为0.76%,0.71%。结论建立的特征图谱能够准确、快速进行定性、定量检测,可有效的监测该制剂的质量。

菟丝子中槲皮素药代动力学研究

目的建立菟丝子中槲皮素的含量测定方法,研究槲皮素体内动力学规律。方法建立快速敏感的高效液相色谱-紫外检测法(HPLC-UV),以卡马西平为内标,以菟丝子灌胃给药后,大鼠含药血清样品经液-液萃取后在C18反相色谱柱上进行分离测定。结果槲皮素血药浓度在0.05～9μg/mL浓度范围内线性关系良好(r=0.9998)。方法回收率为86.65～99.07%,提取回收率为79.91～84.56%,最低检测限为0.05μg/mL。结论槲皮素在大鼠体内的动力学过程表现为具吸收的二室开放模型,其中t1/2(Ab)=0.13h,t1/2(α)=0.19h,t1/2(β)=1.22h,tmax=0.333h。实验结果可为菟丝子在临床用药的安全性和有效性提供依据。

矮脚黄羽肉鸡的精液冷冻研究

对矮脚黄羽肉鸡,运用采集精液进行研究,其方法为人工徒手按摩其背、以尾部可以采得精液．对其品质进行测试表明:采精量平均0．512±0．316 mL(变动范围0．3-0．8 mL);精液似浓稠的牛乳状,每毫升精液中精子数17-19亿个,活力9级以上,pH值6．5,微腥．采出的鲜精,用2号 (3％柠檬酸三钠-卵黄稀释液)、3号(11％蔗糖-卵黄稀释液)、5号(11％蔗糖-0．1％柠檬酸三钠-卵黄稀释液)稀释液稀释,精子活力都8-9级,以5号液最好．即11％蔗糖-0．1％柠檬酸三钠溶液 100 mL中,加6 mL甘油,加16 mL鲜卵黄．与原精液做1:1稀释后用水浴套或毛巾包裹,直接放入5℃冰箱中平衡1 h后装入0．25 mL塑料细管,吊入液氮(-196℃)中冻存．在50℃温水中解冻后,精子活力在9级以上．其冻精稀释液以5号最佳．精子活力达6-7级．8号液(5％葡萄糖溶液 77 mL中加入甘油6 mL,鲜卵黄17 mL),3号液(11％柠檬酸三钠溶液100 mL中加6 mL甘油,16 mL鲜卵黄)也较好,冻精复苏后,活力达5-6级．

骨筋丸胶囊中马钱子的含量检测

目的建立骨筋丸胶囊中马钱子的含量检测方法。方法采用SinochromODS-BP(4.6mm×250mm,粒径5μm)色谱柱,甲醇∶水∶三乙胺(55∶45∶0.135)为流动相,流速1.0ml/min,检测波长254nm,柱温40℃。结果番木鳖碱(士的宁)在8.8￣88.0μg/ml范围内线性关系良好(r=0.9998),平均回收率为99.11%[相对标准偏差(RSD)=2.29%];马钱子碱在10.2￣102.0μg/ml范围内线性关系良好(r=0.9999),平均回收率为99.31%(RSD=2.72%)。结论该方法专属性强、准确、可靠,可方便地同时测定士的宁和马钱子碱的含量,有效地控制制剂中马钱子的量。

HPLC-ELSD法测定苦杏仁中苦杏仁苷含量的研究

目的建立高效液相色谱法-蒸发光散射检测器(HPLC-ELSD)测定苦杏仁中苦杏仁苷含量的的分析方法。方法采用Hypersil-ODS(4.0mm×250mm,5μm)色谱柱;流动相为甲醇-水(30∶70),流速0.5ml/min;柱温25℃;利用ELSD检测器检测:漂移管温度98℃,载气流速3.2L/min。结果苦杏仁苷进样量在1.0￣15.1μg范围内,标准曲线呈良好的线性关系,r=0.9999,苦杏仁苷的平均回收率为99.0%,RSD为2.9%(n=5)。结论本方法简便快速,结果准确可靠,为苦杏仁苷的含量测定提供了一个新方法,可用于苦杏仁药材及含苦杏仁复方制剂的质量控制。