UPLC-MS/MS同时测定麦冬配方颗粒中4个成分的含量及山麦冬成分的检查

目的:采用超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱法(UPLC-MS/MS)建立同时测定麦冬配方颗粒中4个有效成分的含量,并检查是否含有山麦冬的2个专属性成分的方法。方法:采用XBridge BEH C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,2.5μm),流动相为乙腈(A)-0.1%甲酸水溶液(B),梯度洗脱,流速:0.2 mL·min^(–1),柱温:35℃,电喷雾离子源,多反应监测模式正、负离子全扫描。对麦冬配方颗粒中麦冬皂苷C、麦冬皂苷D、甲基麦冬黄烷酮A、甲基麦冬黄烷酮B、山麦冬皂苷B、短葶山麦冬皂苷C进行含量测定并聚类分析。结果:6个待测成分在各自线性范围内线性关系良好(r≥0.995),平均加样回收率为95.9%~99.3%,RSD为0.9%~2.2%。26批样品中麦冬皂苷C、麦冬皂苷D、甲基麦冬黄烷酮A、甲基麦冬黄烷酮B的质量分数分别为6.4~17.3、15.1~29.1、9.0~22.6、4.5~14.4μg·g–1;有3批检出山麦冬皂苷B,其中2批同时检出短葶山麦冬皂苷C。结论:该方法简单、快速、准确,可用于麦冬配方颗粒的质量控制。

气候变化下阔叶山麦冬的潜在适生区预测

基于MaxEnt最大熵模型和ArcGIS10.2软件,利用阔叶山麦冬(Liriope muscari(Decne.)L.H.Bailey)205条有效分布记录和10个生物气候变量,对现代和未来4个时期ssp245和ssp585气候情景下阔叶山麦冬潜在适生区进行预测,评估了制约阔叶山麦冬现代潜在分布区的主导气候因子。结果表明,训练及测试的AUC值范围分别为0.9861—0.9877和0.9849—0.9869,阔叶山麦冬现代潜在适生区的预测结果可信度较高。现代气候条件下阔叶山麦冬的潜在适生区主要分布于中国江西、安徽、广西、浙江、重庆及四川东部等地;总适生区面积占比为0.73%,其中高度、中度、一般适和低度适生区分别为0.08%、0.12%、0.17%和0.36%。影响其现代潜在适生区分布的主导气候因子为温度(bio11、bio10和bio4)和降水量(bio18和bio16)。未来4个时期2种气候情景下阔叶山麦冬适生区总面积较现代呈下降趋势,特别是在ssp585情景下,2090s时期适生区面积减少达到了0.68%。以上结果都为阔叶山麦冬的栽培、引种以及进一步探究单个气候因子对阔叶山麦冬生长发育的影响提供一定的参考价值。

高效液相色谱-串联质谱法测定天王补心丸中山麦冬

建立超高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)法测定天王补心丸中麦冬的混淆品山麦冬(湖北麦冬、短葶山麦冬)的方法。样品经甲醇提取,以0.1%(体积分数)甲酸-乙腈为流动相,用Waters CORTECS®C18色谱柱分离,采用电喷雾离子源(ESI),以多反应监测(MRM)模式进行正、负离子同时扫描,用HPLC-MS/MS法测定湖北麦冬、短葶山麦冬的代表性成分山麦冬皂苷B、短葶山麦冬皂苷C。山麦冬皂苷B、短葶山麦冬皂苷C的质量浓度分别在5.18~207.4、5.2~2080 ng/mL范围内与色谱峰面积线性关系良好,相关系数均为0.9993,方法检出限分别为56、134 ng/g。样品加标回收率分别为99.16%、101.54%,测定结果的相对标准偏差分别为2.57%、5.27%(n=9)。该方法简单、稳定、可靠,可用于分析天王补心丸中麦冬的掺假情况。

短葶山麦冬皂苷DT-13研究进展

短葶山麦冬[Liriope muscari(Decne)Baily]为山麦冬的基原植物之一。短葶山麦冬皂苷DT-13为其主要的活性成分,具有抗肿瘤转移、增强免疫、抗炎等多种药理活性。本文对短葶山麦冬皂苷DT-13的化学结构、提取分离、含量测定、药理活性和安全性评价等进行综述,进一步阐明短葶山麦冬皂苷DT-13的研究价值和应用前景。

RAPD在山麦冬属四种植物分类中的应用

采用随机扩增多态DNA（RAPD）技术对山麦冬属的4种植物进行研究，并以沿阶草OphiopogonbodlinienLevl．为组外比较，用SPSS3．1＋软件对实验数据进行统计分析，得到聚类图。观察所得结果，发现这5种植物被分为两大类群，短葶山麦冬、阔叶山麦冬、山麦冬、湖北山麦冬为一类，沿阶草为另一类，这与经典分类相一致，前4种隶属于山麦冬属，后一种属于沿阶草属；同时，我们发现短葶山麦冬和阔叶山麦冬相对遗传距离较近，结果为阔叶山麦冬是短葶山麦冬的阔叶变种提供分子遗传方面的佐证。

短葶山麦冬吸肥规律初步研究

通过对短葶山麦冬生长周期内定期取样,测定植株不同时期和不同部位氮、磷、钾含量,结果表明:分蘖期、开花期、块根生长期和块根膨大期均为吸肥高峰期;每生产100 kg干麦冬需吸收氮、磷、钾分别为5.17 kg、0.69 kg、4.83 kg,对氮、磷、钾的吸收比例为1:0.13:0.74。

土壤水分胁迫对短葶山麦冬光响应特性的影响

以盆栽的短葶山麦冬为材料,研究不同土壤水分梯度即土壤含水量分别为土壤田间持水量的80%(CK)、65%(W1)、50%(W2)和35%(W3)条件下,短葶山麦冬光合作用—光响应特性。结果表明,当光合有效辐射高于200μmol.m-.2s-1时净光合速率表现为CK>W2>W1>W3,水分胁迫处理降低了最大净光合速率和表观量子效率,重度水分胁迫(W3)降幅最大,W3提高了光补偿点和光饱和点。不同土壤水分条件下短葶山麦冬水分利用效率均在光合有效辐射为400μmol.m-.2s-1时达到最大值,50%和35%的土壤田间持水量条件下提高了短葶山麦冬的水分利用效率。

不同种植密度对短葶山麦冬生长动态及产量质量的影响

研究不同种植密度对短葶山麦冬生长动态、产量及多糖的影响,以期为短葶山麦冬规范化栽培提供理论依据。采用大田随机区组试验,定期采集短葶山麦冬样品,测定各器官生长量,采收时测定产量与多糖等含量。不同密度下的短葶山麦冬地上部生长发育规律相似,均呈"先升后降再升"的发育趋势,地下部块根的生长均为"先快后缓"的生长趋势。种植密度小的地上部和地下部先期生长发育均优于高密度。种植密度对多糖含量影响极小,不同种植密度间麦冬产量存在差异。种植密度对短葶山麦冬产量起重要作用,每丛6株、每hm2种植33万丛为适宜种植密度。

短葶山麦冬最佳采收期研究

采用折干率法测定不同生长期短葶山麦冬的产量;采用苯酚硫酸法测定短葶山麦冬药材中麦冬多糖的含量,并计算总量。考查比较短葶山麦冬的产量和多糖含量的动态变化,结果表明5月中旬短葶山麦冬的产量和多糖含量积累达到最高,可以确定5月份为短葶山麦冬药材的最佳采收期。

不同移栽期对短葶山麦冬产量和质量的影响

为了给短葶山麦冬规范化栽培提供理论依据,采用大田随机区组试验,定期采集短葶山麦冬样品,测定各器官生长量,采收时测定产量与多糖、水浸出物等含量,研究不同移栽期对短葶山麦冬生长发育动态、产量及品质的影响。结果表明,不同移栽期的短葶山麦冬地上部生长发育规律相似,均呈"先升后降再缓升"的发育趋势,分蘖数则呈"先快后慢"的趋势。4月份移栽的地上部和地下部生长发育均优于其他移栽期,此间移栽,植株生长迅速,有利于分蘖和块根形成,且增加了块根的发育时间。不同移栽期的产量差异显著,随着移栽期的推迟,产量逐渐下降,多糖和水浸出物含量也随之下降,综合以上研究结果可知适宜的移栽时期为4月初至5月初。

短葶山麦冬块根发育期光合日变化特征对水分胁迫的响应

以盆栽短葶山麦冬为材料,研究块根发育的3个时期不同土壤水分处理(对照(CK)、轻度胁迫(W1)、中度胁迫(W2)、重度胁迫(W3)4个处理)下短葶山麦冬光合参数和水分利用效率日变化特征。结果表明,不同土壤水分条件下短葶山麦冬光合速率均在10:00达到最大值,光合速率日变化总体表现为单峰型曲线。3个时期光合速率日最大峰值和日平均值都表现为CK>W1>W2>W3,3个时期的蒸腾速率和气孔导度均表现为CK>W1>W2>W3,水分利用效率(WUE)日均值以W3最大,并且上午时段大于下午时段。不同土壤水分条件下光合速率、气孔导度和水分利用效率日均值和日峰值均表现为块根膨大前期>块根发生后期>块根发生中期,而蒸腾速率日均值则表现为块根发生中期>块根发生后期>块根膨大前期。综合分析表明,不同生育时期,水分胁迫导致净光合速率(Pn)、蒸腾速率(Tr)和气孔导度(Gs)下降,提高了WUE,Pn下降的原因在不同生育时期表现不同,进入块根膨大期后短葶山麦冬光合速率与水分利用效率表现为上升趋势。

人工模拟水分胁迫对短葶山麦冬若干生理指标的影响

以盆栽的短葶山麦冬为材料,通过设置80%、65%、50%和35%土壤田间持水量(FC),研究土壤水分胁迫对短葶山麦冬碳、氮代谢若干生理指标的影响,探讨短葶山麦冬的水分适应性.结果表明,不同生育期短葶山麦冬叶片色素含量对水分胁迫响应规律不同.块根发生期,中度胁迫(50%FC)显著提高叶绿素a+b(Chla+b)、叶绿素a(Chla)、叶绿素b(Chlb)及类胡萝卜素(Car)含量,重度胁迫(35%FC)降低了Chla+b、Chla、Chlb含量.胁迫后期,水分胁迫显著降低Chla、Chla+b及Car含量.块根膨大期之前,80%FC下叶片可溶性蛋白含量最高,但各处理间差异不显著,块根膨大期中度胁迫(50%FC)显著提高叶片可溶性蛋白含量.水分胁迫对叶片游离氨基酸含量影响因生育期而不同,至胁迫末期表现为随土壤含水量降低而减少.胁迫初期脯氨酸和可溶性糖含量各处理间差异不显著,随胁迫时间延长,中、重度胁迫显著提高脯氨酸和可溶性糖含量,有利于其抗旱.

福建省短葶山麦冬施肥模式研究

以福建省泉州市短葶山麦冬施肥的田间试验结果和分析数据为依据,经过多年试验资料的归类,建立福建省短葶山麦冬的肥料效应数学模型,提出短葶山麦冬的施肥模型,得出科学施肥方案:N 330kg.hm-2,P2O554kg.hm-2,K2O 270kg.hm-2。

短葶山麦冬花蕾离体培养及快繁技术研究

短葶山麦冬为重要的园林观赏植物和药用植物,目前野生资源破坏严重,而通过组织培养技术可以获得大量种苗,满足市场需求。为解决短葶山麦冬组织培养存在消毒难的问题,以短葶山麦冬花蕾为外植体,通过对不同消毒方法、不同的培养基配方及不同移栽基质的筛选,建立了短葶山麦冬组培快繁体系。结果表明,75%酒精消毒30 s,无菌水清洗3遍,0.1%升汞溶液浸泡10 min,再用无菌水清洗5遍的消毒效果最好。最佳初代培养基是MS+1 mg.L-16-BA+0.2 mg.L-1NAA,最佳继代培养基为MS+4 mg.L-16-BA+0.2 mg.L-1NAA,最佳生根培养基为1/2 MS+1 mg.L-1IBA+30 g.L-1蔗糖。红壤土、珍珠岩、沙的混合比为6∶3∶1时的成活率最高达到93.33%。

短葶山麦冬遗传多样性的ISSR标记研究

利用ISSR分子标记对47种短葶山麦冬种质资源进行遗传多样性分析,18条引物共扩增出131个位点,多态性位点为83个,占63.4%。通过UPGMA聚类分析,47份短葶山麦冬种质分为四大类,遗传相似系数（GS）变化范围在0.64~0.98之间,其中莆田仙游的野生品种为一类,与地方品种间遗传差异最大。聚类分析的结果显示短葶山麦冬的亲缘关系与地理分布的相关性不显著。

短葶山麦冬多糖对免疫抑制小鼠的免疫功能的影响

目的研究短葶山麦冬多糖(LMP)对环磷酰胺致免疫低下小鼠的影响。方法应用环磷酰胺建立免疫低下小鼠模型,连续21天灌胃给予不同剂量(0.5、1.0、2.0g·kg-1)LMP后,测定小鼠胸腺指数、脾脏指数、腹腔巨噬细胞吞噬率、血清溶血素、细胞因子IL-2、TNF-α、IL-6含量、脾淋巴细胞增殖、NK细胞活性等免疫指标。结果 LMP能升高免疫低下小鼠胸脏指数,明显增加小鼠腹腔巨噬细胞吞噬率,增加血清溶血素和细胞因子(IL-2、TNF-α)含量,同时能明显提高脾淋巴细胞增殖能力和NK细胞活性。结论 LMP能够增强免疫抑制小鼠机体免疫功能。

短葶山麦冬总多糖对小鼠免疫功能的影响

目的观察短葶山麦冬总多糖对小鼠免疫功能的影响。方法短葶山麦冬多糖以0.11、0.33、1.0g·kg-1 3个剂量对小鼠连续灌胃30d,检测短葶山麦冬总多糖对小鼠碳廓清能力、巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力及NK细胞活性等免疫指标。结果短葶山麦冬总多糖对胸腺指数、碳廓清能力、巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力、NK细胞活性均有显著作用。结论短葶山麦冬总多糖能增强小鼠非特异性免疫功能。

短葶山麦冬茎尖愈伤组织的诱导与植株再生

以短葶山麦冬茎尖为外植体,进行了优化愈伤组织诱导与植物再生的最适激素配比试验。结果表明:诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+2.0 mg/L 2,4-D+1.5 mg/L 6-BA+1.0 mg/LNAA,愈伤组织紧密块状,生长状况良好,诱导率达94.55%;愈伤组织继代培养最佳培养基为MS+1.0 mg/L 2,4-D+1.50 mg/L 6-BA+0.5 mg/LNAA,愈伤组织净增鲜重为1.08g,增殖系数达到5.1;愈伤组织分化不定芽最佳培养基在MS+4 mg/L6-BA+0.5 mg/LNAA,不定芽增殖系数达到5.54,最有利于不定芽形成。

短葶山麦冬多糖提取纯化及组分的研究

目的建立短葶山麦冬多糖的提取纯化方法,以及对多糖组分的初步研究。方法采用水提醇沉法提取短葶山麦冬粗多糖,SephadexG-100凝胶柱(16mm×800mm)对粗多糖进行纯化,将纯化所得的麦冬多糖完全水解,分别以木糖、阿拉伯糖、果糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖等单糖色谱纯为标准品,采用高效液相色谱法对上述全水解产物进行比对分析。结果 HPLC-ELSD定性分析发现麦冬多糖中单糖组成主要是果糖和葡萄糖,以果糖和葡萄糖的质量浓度对数与HPLC-ELSD峰面积对数的线性关系定量分析出其组分的含量。由果糖的线性回归方程和葡萄糖的线性回归方程计算出两者的摩尔浓度比。结论短葶山麦冬中多糖的糖单元基本组成是果糖和葡萄糖,并确定了其摩尔浓度比约为10∶1。

短葶山麦冬多糖质量控制方法研究

目的建立短葶山麦冬多糖质量控制方法。方法采用高效凝胶渗透色谱(HP-GPC)法测定短葶山麦冬多糖相对分子质量及其分布和样品中多糖含量。色谱条件:Ultrahydrogel 250(300mm×7.8mm,5μm)凝胶色谱柱,流动相为水,流速0.5m L·min^(-1),柱温35℃,进样量20μL,检测器为示差检测器。结果短葶山麦冬多糖的主峰出现在16.23~18.75min,重均分子量约为1831~1910Da,分子量分布系数1.31~1.35;在0.01~2.0mg·m L^(-1)呈良好的线性关系(r=0.9991);短葶山麦冬多糖的含量约为80%(以葡聚糖标准品(Fluka)为对照)。多糖检测限和定量限分别为0.1μg和0.2μg。结论所建立的方法简单、快速、准确、重现性好、灵敏度较高,可作为短葶山麦冬多糖质量控制的方法。