短葶山麦冬皂苷DT-13研究进展

短葶山麦冬[Liriope muscari(Decne)Baily]为山麦冬的基原植物之一。短葶山麦冬皂苷DT-13为其主要的活性成分,具有抗肿瘤转移、增强免疫、抗炎等多种药理活性。本文对短葶山麦冬皂苷DT-13的化学结构、提取分离、含量测定、药理活性和安全性评价等进行综述,进一步阐明短葶山麦冬皂苷DT-13的研究价值和应用前景。

不同种植密度对短葶山麦冬生长动态及产量质量的影响

研究不同种植密度对短葶山麦冬生长动态、产量及多糖的影响,以期为短葶山麦冬规范化栽培提供理论依据。采用大田随机区组试验,定期采集短葶山麦冬样品,测定各器官生长量,采收时测定产量与多糖等含量。不同密度下的短葶山麦冬地上部生长发育规律相似,均呈"先升后降再升"的发育趋势,地下部块根的生长均为"先快后缓"的生长趋势。种植密度小的地上部和地下部先期生长发育均优于高密度。种植密度对多糖含量影响极小,不同种植密度间麦冬产量存在差异。种植密度对短葶山麦冬产量起重要作用,每丛6株、每hm2种植33万丛为适宜种植密度。

短葶山麦冬最佳采收期研究

采用折干率法测定不同生长期短葶山麦冬的产量;采用苯酚硫酸法测定短葶山麦冬药材中麦冬多糖的含量,并计算总量。考查比较短葶山麦冬的产量和多糖含量的动态变化,结果表明5月中旬短葶山麦冬的产量和多糖含量积累达到最高,可以确定5月份为短葶山麦冬药材的最佳采收期。

不同移栽期对短葶山麦冬产量和质量的影响

为了给短葶山麦冬规范化栽培提供理论依据,采用大田随机区组试验,定期采集短葶山麦冬样品,测定各器官生长量,采收时测定产量与多糖、水浸出物等含量,研究不同移栽期对短葶山麦冬生长发育动态、产量及品质的影响。结果表明,不同移栽期的短葶山麦冬地上部生长发育规律相似,均呈"先升后降再缓升"的发育趋势,分蘖数则呈"先快后慢"的趋势。4月份移栽的地上部和地下部生长发育均优于其他移栽期,此间移栽,植株生长迅速,有利于分蘖和块根形成,且增加了块根的发育时间。不同移栽期的产量差异显著,随着移栽期的推迟,产量逐渐下降,多糖和水浸出物含量也随之下降,综合以上研究结果可知适宜的移栽时期为4月初至5月初。

短葶山麦冬多糖对免疫抑制小鼠的免疫功能的影响

目的研究短葶山麦冬多糖(LMP)对环磷酰胺致免疫低下小鼠的影响。方法应用环磷酰胺建立免疫低下小鼠模型,连续21天灌胃给予不同剂量(0.5、1.0、2.0g·kg-1)LMP后,测定小鼠胸腺指数、脾脏指数、腹腔巨噬细胞吞噬率、血清溶血素、细胞因子IL-2、TNF-α、IL-6含量、脾淋巴细胞增殖、NK细胞活性等免疫指标。结果 LMP能升高免疫低下小鼠胸脏指数,明显增加小鼠腹腔巨噬细胞吞噬率,增加血清溶血素和细胞因子(IL-2、TNF-α)含量,同时能明显提高脾淋巴细胞增殖能力和NK细胞活性。结论 LMP能够增强免疫抑制小鼠机体免疫功能。

短葶山麦冬总多糖对小鼠免疫功能的影响

目的观察短葶山麦冬总多糖对小鼠免疫功能的影响。方法短葶山麦冬多糖以0.11、0.33、1.0g·kg-1 3个剂量对小鼠连续灌胃30d,检测短葶山麦冬总多糖对小鼠碳廓清能力、巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力及NK细胞活性等免疫指标。结果短葶山麦冬总多糖对胸腺指数、碳廓清能力、巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力、NK细胞活性均有显著作用。结论短葶山麦冬总多糖能增强小鼠非特异性免疫功能。

短葶山麦冬多糖提取纯化及组分的研究

目的建立短葶山麦冬多糖的提取纯化方法,以及对多糖组分的初步研究。方法采用水提醇沉法提取短葶山麦冬粗多糖,SephadexG-100凝胶柱(16mm×800mm)对粗多糖进行纯化,将纯化所得的麦冬多糖完全水解,分别以木糖、阿拉伯糖、果糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖等单糖色谱纯为标准品,采用高效液相色谱法对上述全水解产物进行比对分析。结果 HPLC-ELSD定性分析发现麦冬多糖中单糖组成主要是果糖和葡萄糖,以果糖和葡萄糖的质量浓度对数与HPLC-ELSD峰面积对数的线性关系定量分析出其组分的含量。由果糖的线性回归方程和葡萄糖的线性回归方程计算出两者的摩尔浓度比。结论短葶山麦冬中多糖的糖单元基本组成是果糖和葡萄糖,并确定了其摩尔浓度比约为10∶1。

短葶山麦冬多糖质量控制方法研究

目的建立短葶山麦冬多糖质量控制方法。方法采用高效凝胶渗透色谱(HP-GPC)法测定短葶山麦冬多糖相对分子质量及其分布和样品中多糖含量。色谱条件:Ultrahydrogel 250(300mm×7.8mm,5μm)凝胶色谱柱,流动相为水,流速0.5m L·min^(-1),柱温35℃,进样量20μL,检测器为示差检测器。结果短葶山麦冬多糖的主峰出现在16.23~18.75min,重均分子量约为1831~1910Da,分子量分布系数1.31~1.35;在0.01~2.0mg·m L^(-1)呈良好的线性关系(r=0.9991);短葶山麦冬多糖的含量约为80%(以葡聚糖标准品(Fluka)为对照)。多糖检测限和定量限分别为0.1μg和0.2μg。结论所建立的方法简单、快速、准确、重现性好、灵敏度较高,可作为短葶山麦冬多糖质量控制的方法。

短葶山麦冬多糖对S-180荷瘤小鼠免疫调节功能的影响

目的观察短葶山麦冬多糖(LMP)对S-180荷瘤小鼠免疫调节功能的影响。方法ICR小鼠随机分为正常对照组,模型组,LMP低剂量组(0.5 g·kg^(-1)),LMP中剂量组(1.0 g·kg^(-1))和LMP高剂量组(2.0 g·kg^(-1))。除正常对照组外,其余四组建立S-180荷瘤小鼠模型。生理盐水或LMP灌胃给药14天后,检测抑瘤率、脾脏和胸腺指数、巨噬细胞吞噬功能和血清中IL-1β、TNF-α、IL-6的含量。结果LMP各剂量组抑瘤率与模型组相比无显著差异。但LMP高剂量组(2.0 g·kg^(-1))巨噬细胞吞噬中性红能力较模型组明显增强,血清中IL-1β含量较模型组明显增高。结论LMP可能通过增强免疫功能间接抗肿瘤。

基于转录组测序与生物信息学综合分析短葶山麦冬中调控甾体皂苷积累的分子机制

本研究旨在以短葶山麦冬的叶与根为研究对象进行高通量Illumina转录组测序,并结合生物信息学分析参与调控短葶山麦冬主要活性成分甾体皂苷类化合物积累的相关酶基因及关键转录因子,为研究短葶山麦冬甾体皂苷积累的分子机制提供理论基础。通过转录组测序,鉴定到AACT、CAS、DXS与DXR等31个参与甾体皂苷类化合物合成的代谢酶,其中萜类化合物骨架合成阶段有16个,倍半萜和三萜生物合成阶段有3个,甾体化合物合成阶段有12个。基因差异表达显示,在叶与根之间具有34条差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs),分别编码甾体皂苷合成有关的15个代谢酶,通过基因共表达模式进一步分析,编码其中14个代谢酶的31条DEGs呈现共表达模式。此外,还通过共表达分析及PlantTFDB的转录因子分析工具预测到8个转录因子GAI、PIF4、PIL6、ERF8、SVP、LHCA4、NF-YB3和DOF2.4可能参与调节6个代谢酶DXS、DXR、HMGR、DHCR7、DHCR24和CAS。通过启动子分析预测这些转录因子表明,其主要调控机制涉及脱落酸响应、干旱诱导胁迫响应及光响应等过程,特别是脱落酸响应元件(abscisic acid responsive elements,ABRE)与干旱诱导胁迫响应元件(MYB binding site involved in drought-inducibility,MBS)响应途径;并通过qRT-PCR分析这8个关键转录因子和代谢酶基因,结果表明它们在叶与根中差异表达与测序结果一致。

短葶山麦冬药材定性与定量分析方法研究

目的:建立短葶山麦冬药材主要药用成分的定性与定量分析方法。方法:采用薄层色谱法对短葶山麦冬药材中甾体皂苷类成分进行定性鉴别;采用紫外-可见分光光度法对短葶山麦冬药材中多糖成分进行含量测定,以苯酚-硫酸显色,在490nm的波长处测定吸收度。结果:应用所建立的方法对14批药材进行定性与定量分析,结果在TLC图谱中均可检出短葶山麦冬药材的特征斑点;14批样品多糖含量测定结果以无水葡萄糖计为6.34%～13.69%。结论:本方法操作简便,重复性好,结果准确可靠,可用于该药材的定性与定量分析。