玻璃化法超低温保存荔枝胚性悬浮细胞

研究荔枝(Litchi chinesis Sonn)胚性悬浮细胞玻璃化法超低温保存的一些因素,建立玻璃化法超低温保存荔枝胚性悬浮细胞的冻存程序:继代培养3d的胚性悬浮细胞,在含有0.4mol/L山梨醇培养基上预培养2d后,先在室温下用60%玻璃化溶液(PVS2)装载15min,再用PVS2于0℃下处理15～20min,换1次新鲜的PVS2溶液后,迅速投入液氮,保存24h后,在40℃水浴中快速化冻,用1.2mol/L蔗糖培养液洗涤2次,经TTC检测,相对存活率达到27.1%。