荔枝核提取物对HepG-2细胞生长抑制及凋亡诱导机制的探讨

目的:探讨荔枝核提取物成分L2.3对人肝癌细胞HepG-2的生长抑制作用及其分子机制。方法:MTT法测定样品对HepG-2细胞的增殖抑制,荧光染色观察细胞凋亡;比色法检测样品对HepG-2中caspase-3、caspase-8和caspase-9活性的影响,流式细胞仪检测并分析Fas蛋白表达的变化。结果:L2.3对HepG-2细胞表现出时间及剂量依赖性增殖抑制活性(P<0.05),其半数抑制质量浓度为43.0μg/mL;处理组细胞中出现致密浓染亮蓝色凋亡小体。较高质量浓度的L2.3处理细胞后,caspase-3、8、9的活性均呈时间依赖性增高(P<0.01),且Fas蛋白的表达也明显上调(P<0.05)。结论:荔枝核提取物L2.3对HepG-2细胞有体外增殖抑制活性,并介导caspase-3、caspase-8、caspase-9活性改变及Fas蛋白表达的上调,以此诱导细胞凋亡的发生。

荔枝核活性成分分析及其提取物抗氧化性能研究

对不同荔枝核样品采用香草醛-高氯酸比色法测定荔枝核总皂甙含量,用硝酸铝-亚硝酸钠比色法测定总黄酮含量,用蒽酮-硫酸法测定多糖成分的含量;结果表明:不同荔枝核样品中总皂甙含量在1.30%～1.40%之间,总黄酮含量在5.78%～6.80%之间;多糖2.85%～3.34%之间。以芦丁为对照,从对不同体系产生的超氧阴离子自由基、羟自由基和DPPH自由基的清除能力及脂质过氧化的抑制活性等方面研究荔枝核提取物的抗氧化活性。结果显示:荔枝核提取物质量浓度为0.8mg/ml时,对超氧阴离子自由基的清除率达92.96%,超过同质量浓度的芦丁;质量浓度为0.5mg/ml时,对羟自由基的清除率达85.56%,略低于相应对照。荔枝核提取物对脂质过氧化的抑制率随浓度的增加而增大,质量浓度为0.5mg/ml时,抑制率达52.56%,稍低于相应对照。妃子笑荔枝核提取物质量浓度为1mg/ml时,其清除DPPH自由基的能力超过同质量浓度的芦丁。

荔枝核增强2型糖尿病-胰岛素抵抗大鼠胰岛素敏感性作用

目的 :观察荔枝核水提取物 (以下简称荔枝核 )对 2型糖尿病 (T2DM )大鼠胰岛素抵抗 (IR)的影响 ,并初步探讨其作用机制。方法 :采用给大鼠腹腔一次性注射小剂量链脲霉素 (30mg·kg-1) ,并加饲高热量饮食 (富含脂肪和蔗糖 ) ,制备T2DM伴IR大鼠模型 ,观察荔枝核对病鼠血糖、血脂、胰岛素和胰岛素敏感性指数的影响。结果 :荔枝核能显著降低T2DM伴IR模型大鼠空腹血糖和口服葡萄糖耐量试验后 2h血糖 (P <0 0 5 ) ,同时改善了病鼠的糖耐量减退。荔枝核 3个剂量组还能明显降低病鼠的血清总胆固醇 (TC)和三酰甘油 (TG) (P <0 0 1) ,提高高密度脂蛋白 胆固醇 (HDL C)含量和HDL C/TC比值 (P <0 0 1)。降低病鼠高胰岛素血症 ,提高了胰岛素敏感性指数 (P <0 0 1)。实验中未发现明显的不良反应。结论 :荔枝核对T2DM伴IR大鼠有降血糖及调血脂的作用 ,并改善其IR。

荔枝核水提物抗氧化和抑菌作用的研究

以荔枝核为原料,经过粉碎,采用传统中药水煎法制备得到荔枝核水提物。通过测定还原能力、总抗氧化能力以及水提物对1,1-二苯基-2-三硝基苦肼自由基(DPPH.)、羟自由基(.OH)、超养阴离子自由基(O2-.)的清除能力来评价水提物的抗氧化活性。同时,通过侧定抑菌圈直径大小和最小抑菌浓度研究的荔枝核水提物对金黄色葡萄球菌的抑菌效果。实验结果表明:荔枝核水提物有较好的抗氧化性,对DPPH.、.OH、O2-.的IC50分别是0.1819mg/mL、16.3652mg/mL、31.6767mg/mL。同时荔枝核水提物表现出一定的还原能力和抗氧化能力。通过抑菌实验,得出荔枝核水提物对金黄色葡萄球菌有抑制效果。当水提物的浓度为3.125%,抑菌圈直径为8.8±0.58mm。荔枝核水提物对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度为6.25%。

野生酸荔枝核中多糖的提取及其抗氧化活性

研究了从野生酸荔枝(Litchi chinensis Sonn)核中提取多糖的最佳条件及其体外抗氧化活性。结果表明,最佳提取条件为提取温度70℃,提取时间3.0 h,乙醇体积分数70%,在此条件下多糖的提取率为5.72%。体外试验表明,酸荔枝核多糖对·OH具有明显的清除作用。

荔枝核提取物对D-半乳糖诱致小鼠学习记忆障碍的影响及其机制

目的:探讨荔枝核提取物对学习记忆障碍的影响及其机制。方法:50只昆明种小鼠随机分为空白对照组、模型组、石杉碱甲组(0.4 mg/kg)及荔枝核提取物低(15 g/kg)、高(60 g/kg)剂量组。上述动物除空白对照组外,均皮下(sc)注射D-半乳糖(500 mg/kg)8 w,并于第5周起分别灌胃相应药物。采用水迷宫和自主活动仪测试小鼠学习和记忆能力,并测定血清糖基化终末产物(AGEs)及脑组织一氧化氮(NO)、乙酰胆碱(Ach)的含量和一氧化氮合酶(NOS)、乙酰胆碱酯酶(AchE)活性。结果:荔枝核提取物能显著改善模型小鼠学习和记忆能力,减少血清糖基化产物(AGEs)含量,同时降低脑组织NO含量和NOS活性,对脑组织Ach含量、AchE的活性无明显影响。结论:荔枝核提取物具有改善D-半乳糖诱致小鼠学习记忆障碍的作用,其机制可能与抑制过多的AGEs和NO等对脑细胞损伤作用有关。

酸荔枝核黄酮体外抗氧化作用的研究

为探讨酸荔枝核总黄酮的提取工艺及体外抗氧化作用。采用正交试验乙醇热浸的方法考察提取溶剂浓度、提取时间、料液比等因素对酸荔枝核总黄酮提取率的影响。结果以液固比20∶1,提取时间30min,乙醇体积百分数为95%vol这3个因素为最佳。酸荔枝核中总黄酮对DPPH和氧自由基这2种自由基有很好的清除作用以及还原能力。

荔枝核提取物清除亚硝酸盐的研究

采用对氨基苯磺酸-盐酸萘乙二胺分光光度法测定了荔枝核提取物对亚硝酸盐的清除作用,研究了影响荔枝核提取物清除亚硝酸盐的因素。结果表明:最佳清除条件为提取物浓度8%,反应时间10m in,反应温度80℃,pH=2。此条件下,荔枝核提取物对亚硝酸盐清除率为99.07%。

不同工艺的荔枝核提取物抗氧化活性的比较

分别采用回流提取、热浸提取、微波辅助提取法分离荔枝核活性成分,测定了不同工艺制备的荔枝核提取物抑制油脂氧化以及清除羟基自由基和超氧阴离子自由基的抗氧化活性.结果表明,荔枝核提取物具有较强的抗氧化活性,能够有效地抑制油脂氧化;不同工艺的提取物对油脂抗氧化作用的排序为微波提取物>热浸提取物>回流提取物.与此同时,荔枝核提取物能够有效地清除羟基自由基,其中微波提取物的半清除率质量浓度(EC50)约为0.76 g/L,热浸提取物的EC50约为0.94 g/L,回流提取物的EC50约为2.0 g/L.此外,荔枝核提取物对超氧阴离子自由基也有一定的清除效果.

荔枝核活性成分及其提取物抑菌活性分析

为给荔枝副产品的增值利用提供理论依据,对不同荔枝核样品采用香草醛-高氯酸比色法测定了荔枝核总皂苷含量,用硝酸铝-亚硝酸钠比色法测定了总黄酮含量,用蒽酮-硫酸法测定了多糖的含量,分别采用纸碟法和菌丝生长速率法测定了荔枝核提取物对细菌和真菌抑菌圈的大小,并采用混平板稀释法测定了其最小抑菌浓度。结果表明:不同荔枝核样品中总皂苷含量在1.30%～1.40%之间,总黄酮含量在5.78%～6.80%之间,多糖含量在2.85%～3.34%之间。不同品种荔枝核提取物具有不同抑菌活性。妃子笑荔枝核的抑菌活性强于其它品种,其甲醇提取物对细菌的最小抑菌浓度在1～2mg/mL之间。

GC-MS分析荔枝核超临界CO_2萃取物

采用超临界CO2萃取荔枝核,并用气相色谱-质谱联用仪对荔枝核萃取物的挥发性成分进行分析。结果表明:超临界CO2萃取荔枝核的萃取率为4.26%,气相色谱-质谱联用鉴定出67种化合物,主要为甾醇类、萜类、不饱和脂肪酸、棕榈酸、脂肪酸酯、VE,相对含量分别为31.3%、25.7%、12.03%、9.63%、7.53%、7.21%。

荔枝核棕色素提取及稳定性研究

对荔枝核棕色素的提取工艺及其稳定性进行了研究,结果表明:以70%乙醇溶剂作为提取剂,料液配比为1∶10,温度为80℃,提取时间为2 h是最佳提取工艺条件;荔枝核棕色素在光照、酸性、温度低于80℃、有还原剂(Na2SO3)的加入下稳定,但在强碱、高温及氧化剂(H2O2)下不稳定。

荔枝核提取物改善D-半乳糖诱致小鼠学习记忆障碍与体内抗氧化作用的关系

目的观察荔枝核提取物对D-半乳糖诱致小鼠学习记忆障碍的改善作用,并探讨其改善作用与脑内抗氧化作用的关系。方法 50只昆明种小鼠随机分为空白对照组、模型对照组、石杉碱甲组(0.4mg/(kg.d))、荔枝核提取物低(15g/(kg.d))和高(60g/(kg.d))剂量组。上述动物除空白对照组外,皮下(sc)注射D-半乳糖(500mg/(kg.d))8周,并于第5周起分别灌胃相应药物。采用水迷宫和自主活动仪测试小鼠学习和记忆能力及自主活动情况,并取血测定MDA含量和SOD及GSH-Px的活力。结果荔枝核提取物可明显改善模型小鼠的学习和记忆能力,并提高血清GSH-PX和SOD的活力。结论荔枝核提取物具有改善D-半乳糖诱致小鼠学习记忆障碍的作用,其作用可能与其提高机体抗氧化能力有关。

荔枝核皂苷对小鼠学习记忆障碍的改善

目的:探讨荔枝核皂苷对D-半乳糖诱致小鼠学习记忆障碍的改善作用。方法:50只昆明种小鼠完全随机分为正常对照组、模型对照组、石杉碱甲组(0.4 mg/kg·d)、荔枝核皂苷低(15 g/kg·d)和高(60 g/kg·d)剂量组。上述动物除空白对照组外,均皮下(sc)注射D-半乳糖(500 mg/kg·d)8周,并于第5周起分别灌胃相应药物。采用水迷宫和自主活动仪测试小鼠学习和记忆能力,测定血清糖基化;醛糖还原酶活性;采用高效液相库仑阵列电化学检测系统检测人神经氨酸酶(NA)、多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)、5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)二羟苯乙酸(DOPAC)的含量变化。结果:荔枝核皂苷明显改善模型小鼠学习和记忆能力,各给药组与模型对照组相比单胺类递质含量差异无统计学意义(P>0.05)。结论:荔枝核皂苷具有改善D-半乳糖诱致小鼠学习记忆障碍的作用;其作用可能与其减少抑制对脑神经细胞的损伤作用有关。

荔枝核提取物对D-半乳糖诱发小鼠学习记忆损伤的保护机制

目的探讨荔枝核提取物（Litchi Seed Aqueous Extracts，LSAE）对D-半乳糖诱发小鼠学习记忆障碍的改善作用及其机制。方法50只KM小鼠随机分为空白组、模型组、石杉碱甲组（HU，0．4mg·kg^-1·d^-1）、LSAE低剂量（15g·kg^-1·d^-1）和高剂量（60g·kg^-1·d^-1）剂量组。上述动物除空白组外，均连续8周皮下（sc）注射D．半乳糖（500mg·kg^-1·d^-1），并于第5周起分别灌胃相应药物。采用Morris水迷宫测试小鼠学习和记忆能力，用流式细胞仪测小鼠脑组织线粒体膜电位，采用RT—PCR方法测凋亡基因bcl-2mRNA、baxmRNA及B淀粉样前体蛋白（β-APP）mRNA的表达。结果LSAE可明显改善模型小鼠的学习和记忆能力，提高脑细胞线粒体膜电位，增强抗凋亡基因bcl-2mRNA表达，降低促凋亡基因baxmRNA含量，同时下调脑组织B-APPmRNA的表达。结论LSAE具有改善D-半乳糖诱发小鼠学习记忆障碍的作用，其作用机制可能与其提高脑细胞内线粒体膜电位，抑制细胞凋亡和下调淀粉样前体蛋白D—APP的表达有关。

荔枝核提取液抗小鼠体内FM1流感病毒的作用

目的:研究荔枝核提取液对甲1型流感病毒鼠肺适应株的影响。方法:用病毒滴鼻感染小鼠建立病毒感染小鼠模型,观察肺指数、病毒致小鼠死亡率。停药后处死小鼠,取各组小鼠肺组织光镜和电镜观察。结果:荔枝核高、低剂量组对小鼠流感病毒性肺炎均有抑制作用,对流感病毒感染小鼠有明显的死亡保护作用。在光镜与电镜观察下,正常对照组小鼠肺组织形态学未发生改变,病毒模型组肺组织明显出现充血、变性、白细胞浸润等现象,治疗组肺组织充血等现象明显轻于模型组。结论:荔枝核提取液在小鼠体内具有抗FM1流感病毒的作用。

纤维素酶辅助醇提荔枝核黄酮的工艺研究

以荔枝核为原料,研究纤维素酶辅助醇提荔枝核黄酮的工艺。考察酶添加量、酶解时间、醇提温度、醇提时间4个单因素对荔枝核黄酮提取率的影响,在单因素试验的基础上,选择四因素三水平进行正交试验优化工艺条件。结果表明,纤维素酶辅助醇提荔枝核黄酮的最优工艺条件为酶添加量5 000 U/g、酶解时间90 min、醇提温度70℃、醇提时间2.5 h,在此条件下,荔枝黄酮提取率可达5.64%,比乙醇回流法提取提高了74.07%。

荔枝核多糖的水提醇沉工艺优化及其对α-葡萄糖苷酶的抑制活性研究

目的:优化荔枝核多糖的水提醇沉工艺,并评价其体外降糖的活性。方法:采用苯酚-硫酸比色法测定多糖含量,并计算多糖提取率。采用单因素试验和响应面法,以料液比、提取次数、提取时间为因素,多糖提取率为指标,对水提工艺进行优化;采用单因素试验对醇沉工艺中水提液的浓缩体积和醇沉浓度进行筛选,并进行验证。以阿卡波糖为对照,采用4-硝基酚-α-D-吡喃葡萄糖苷法考察荔枝核多糖对α-葡萄糖苷酶的体外抑制活性。结果:荔枝核多糖水提醇沉的最优工艺为料液比1∶19(g/mL),煎煮3次,每次1 h,水提液浓缩至原体积的40%,加乙醇醇沉至含醇量80%,经Sevage法除蛋白后得荔枝核粗多糖。3次验证试验结果显示,多糖提取率分别为7.61%、7.89%、7.99%,平均提取率为7.83%(RSD=2.52%,n=3);多糖含量分别为55.57%、55.83%、56.66%,平均含量为56.02%(RSD=1.81%,n=3)。荔枝核多糖对α-葡萄糖苷酶的抑制活性有随浓度升高而增强的趋势,其半数抑制浓度为0.056 mg/mL,低于阳性对照阿卡波糖的0.196 mg/mL。结论:优化的荔枝核多糖水提醇沉工艺稳定、可行。荔枝核多糖对α-葡萄糖苷酶具有明显的体外抑制作用,且活性强于阿卡波糖。

荔枝核醇提工艺优化以及抗氧化作用研究

目的:以总黄酮得率为评价指标,研究从镇隆荔枝核醇提条件的最佳工艺,并研究其抗氧化作用。方法:以本地特产镇隆荔枝核作为提取总黄酮的原料,以提取时间、温度、料液比、乙醇体积分数以及微波超声功率为考察因素,进行L16(45)正交试验得出最佳提取条件;应用DPPH法检测提取所得总黄酮的抗氧化作用。结果:研究表明荔枝核醇提的最佳条件是以50%乙醇溶液为提取溶剂,温度为50℃、料液比例为1:30,超声功率为600W提取40min。各因素对总黄酮得率的影响大小依次为:超声功率>提取时间>乙醇体积分数>提取温度>料液比例;所得的荔枝核总黄酮在浓度0~50μg·mL^-1范围内抗氧化作用明显。结论:经优化后的醇提取工艺可以提高镇隆荔枝核总黄酮的得率,且其抗氧化作用明显。

超声辅助乙醇提取荔枝核总皂苷工艺优化及其抗炎作用研究

优选超声辅助乙醇提取荔枝核总皂苷的工艺条件,并研究其抗炎活性。在单因素的基础上,以乙醇浓度、提取时间、料液比为影响因素,通过正交试验优化提取工艺。进而以LPS诱导RAW 264.7细胞为炎症模型,考察其抗炎活性。最优提取工艺为70%乙醇为溶剂,料液比为1∶20,超声辅助提取为30 min,总皂苷的含量为4.61 mg/g;抗炎活性研究结果表明荔枝核总皂苷在2~80μg/mL未表现出细胞毒性,但对LPS诱导RAW264.7细胞导致的NO和IL-6的释放均有很好的抑制效果。超声辅助乙醇提取荔枝核总皂苷工艺稳定可靠,而且具有较低的细胞毒性和较好的抗炎活性。