多穗柯MYB转录因子的鉴定及适应光因子调控黄酮类合成成员的筛选

为了研究多穗柯(Lithocarpus polystachyus Rehd)MYB转录因子在光胁迫时调控多穗柯黄酮类物质合成的作用,以不同光处理条件的多穗柯为试验材料,通过转录组学测序和生物信息学分析方法,对多穗柯MYB转录因子和多穗柯黄酮类物质合成关键基因进行了分析。结果标明:在多穗柯的转录组学测序数据中,鉴定得到60个LpMYB转录因子,按照DNA结合结构域的特点,将这些转录因子分为4个亚族(1R-MYB,R2R3-MYB,3R-MYB,4R-MYB),其中R2R3-MYB数量最多,占总LpMYB转录因子的43.33%。多穗柯大部分MYB转录因子能够适应红光胁迫;长时间的光照、适当的光照度提高了LpMYB转录因子的表达。鉴定得到10个参与调控黄酮类物质生物合成的S4、S5、S6和S7亚族LpMYB转录因子。多穗柯黄酮类物质合成相关基因与LpMYB转录因子的相关性分析结果表明,LpMYB转录因子在调控黄酮化合物的合成中发挥着重要的作用,LpMYB转录因子能够正调控黄酮类物质合成基因PAL、C4H、CHS3、ANS的表达,从而提高多穗柯的品质。

微波辅助提取多穗柯嫩叶黄酮工艺研究

该研究比较了微波辅助水提(MW)、微波辅助氢氧化钙溶液提取(MCW)、水提(W)、氢氧化钙溶液提取(CW)、乙醇回流(E)和甲醇回流(Me)等工艺提取多穗柯黄酮的效果,用正交设计筛选MCW工艺条件,并对材料预煮与微波处理时间的关系、氢氧化钙溶液浓度对提取效果的影响进行了探讨。结果表明,MCW提取效果明显优于W、CW、MW和E或Me;材料预煮和适当的氢氧化钙浓度可以明显提高MCW黄酮提取效果;研究得出的最佳工艺条件为:1.2%氢氧化钙水溶液,固液比1∶12,预煮时间5min,高档功率微波处理25min。此工艺提取率达到96%,提取物黄酮含量达到37%,是一种高效、无污染的提取多穗柯黄酮工艺。

多穗柯黄酮根皮苷对糖尿病小鼠的降血糖血脂效果

甜茶多穗柯是我国传统民间草药和保健饮料植物,其嫩叶含有丰富的黄酮根皮苷。本研究用分离纯化的多穗柯根皮苷(STPh),以4个剂量灌喂四氧嘧啶诱导的糖尿病模型小鼠18d,以非模型和模型小鼠罐喂同量蒸馏水作对照,灌喂消渴丸为阳性对照,然后检测其血糖(BG)、血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、丙二醛(MDA)水平和超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性。结果表明,STPh处理有效地降低了糖尿病模型小鼠的BG、TG、TC和MDA水平,对增加血清SOD、GSH-Px活性也有明显促进作用,其中以70mg/kgbw·d为最佳剂量。这表明STPh对糖尿病防治有明显的积极作用。

多穗柯总黄酮提取工艺及其含量动态变化研究

目的:探讨多穗柯总黄酮的提取工艺及含量动态变化。方法:以怀化产多穗柯为原料,采取乙醇为溶剂超声波辅助提取,以L9(34)正交试验方法优化总黄酮提取工艺,然后在该工艺条件下对自然存放时间不同、采摘季节不同、不同叶的多穗柯原料进行总黄酮含量的动态变化考察。结果:乙醇体积分数对总黄酮提取量有显著影响,提取温度对总黄酮提取量有影响;多穗柯自然存放时间越长,总黄酮含量越低,平均每年下降24.74%;不同季节采摘的多穗柯其总黄酮含量以8～10月最高;经对怀化多穗柯嫩叶和老叶中总黄酮的提取测定表明,多穗柯中嫩叶总黄酮含量最高,二年生最低。结论:以原料35倍量的70%乙醇作为溶剂,在提取功率600W、提取时间15min的条件下,即可获得多穗柯总黄酮最佳提取效果;8～10月采摘嫩叶存放时间越短,总黄酮含量越高。

多穗柯化学成分研究

目的:研究多穗柯的化学成分。方法:对多穗柯的化学成分进行提取和分离纯化,并通过理化数据及波谱分析鉴定化合物结构。结果:从多穗柯的醇提物中分离出9个化合物,分别是:根皮苷(Ⅰ)、根皮素(Ⅱ)、二氢查尔酮-2′--βD-吡喃葡萄糖苷(Ⅲ)、胡萝卜苷(Ⅳ)、β-谷甾醇(Ⅴ)、槲皮素(Ⅵ)、木犀草素(Ⅶ)、槲皮苷(Ⅷ)及齐墩果酸(Ⅸ)等9种化合物。结论:除化合物Ⅰ和Ⅲ外均为首次从该植物中分离。

多穗柯三叶苷的抑制糖尿病关键酶活性和抗氧化性

从多穗柯中提取分离得到三叶苷,以抗糖尿病药物阿卡波糖为阳性对照,检测多穗柯三叶苷对小肠α-葡萄糖苷酶和胰脏α-淀粉酶活性的抑制作用和对α-葡萄糖苷酶活性抑制类型,并以芦丁为阳性对照检测其清除DPPH自由基能力。结果显示:多穗柯三叶苷对α-葡萄糖苷酶有明显抑制作用,为非竞争性抑制,抑制效果与阿卡波糖无明显差别,对α-淀粉酶活性的抑制率低于阿卡波糖;清除DPPH自由基能力强于芦丁。表明多穗柯三叶苷是一种有应用潜力的抗糖尿病活性物质。

保健甜茶-多穗柯的研究与开发

多穗柯甜茶是一种具有很长食用历史的民间非糖甜味饮品,中医药认为其对多种心血管疾病有预防作用。研究表明,多穗柯甜茶含有较高的黄酮类和多酚物质,其甜味和药理保健功能与其所含的黄酮类物质有关。本文系统地综述了多穗柯甜茶在化学成分研究,加工提取技术研究和药理保健功能3个方面的研究进展,并对多穗柯甜茶的开发前景进行了展望。

广西多穗柯叶片性状变异及幼苗生长量研究

多穗柯是一种珍贵天然野生药用植物,可以开发出保健食品色素和天然医用药品,广西的资源较丰富,该研究采集巴马、那坡、德保及田林等4个产地的多穗柯种子进行播种育苗,并跟踪调查测定一年生幼苗的叶片性状及幼苗生长量,并进行相关性分析。结果表明：（1）不同产地间叶片性状及幼苗生长指标均存在不同程度的差异,其中巴马与那坡、德保、田林在叶长、叶宽、叶面积、叶脉间距、叶鲜重、叶片干物质含量、叶片组织密度等叶片性状上的差异均达到显著水平,在株高、地径、单株干重、主根长、单株根干重及单株叶干重等生长指标上亦存在显著差异,且生长量是后3个产地的1~2倍;通过比较各产地的叶片保水力及植株净生长量,巴马的多穗柯植株耐旱性及生长速度优于其他三地。综合各性状表现,认为巴马的多穗柯苗期表现比较好,生长速度快,长势好,抗旱性较强,可作为多穗柯优良种源的初步选择。（2）8月份是多穗柯株高、地径的生长高峰期,建议此时应加强肥水管理,调节适宜的水肥光热条件,尽量延长幼苗的快速生长时间,以获得苗木的最大累积生长量。（3）叶片性状与幼苗生长量的相关性分析结果显示,叶面积与株高、地径、单株干重、单株根干重以及单株叶干重等呈极显著正相关,叶脉间距、叶绿素相对含量（SPAD）与株高、单株干重呈显著或极显著正相关,比叶面积与株高、地径呈显著负相关。因此,在以后的优株表型选择中,要优先考虑叶子大、叶脉间距宽、中老熟叶片叶色浓绿的植株。该研究结果为多穗柯优良种质资源的早期筛选提供了一定的依据。

大孔树脂ADS-7分离纯化多穗柯黄酮工艺研究

采用大孔树脂ADS-7分离纯化多穗柯黄酮粗提物(CE),对主要工艺条件进行了研究。得出最佳工艺条件为:将CE先配成10%(体积分数)CE溶液,10%CE溶液体积与树脂质量比值(mL∶g)略大于3、在中性pH值下静态吸附2 h,再以3倍装柱体积(1 500 mL)的80%(体积分数)乙醇、每小时1倍装柱体积流速进行动态洗脱。该工艺条件得到的纯化产物中黄酮的质量分数由粗提物中的40%提高到纯化产物的88%,得率为91%。

野金柴化学成分的分离和研究

目的分离野金柴中的化学成分。方法利用ODS柱层析,聚酰胺树脂柱层析,制备液相的方法对野金柴中的化学成分进行分离和纯化,并通过IR、NMR等光谱技术和化学方法鉴定化合物的结构。结果分离得到7个化合物,经鉴定分别为胡萝卜苷(1)、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷(2)、槲皮苷(3)、3-羟基根皮苷(4)、根皮苷(5)、山柰酚-3-O-α-L-鼠李糖苷(6)、齐墩果酸(7)。结论山柰酚-3-O-α-L-鼠李糖苷为首次从野金柴植物中分离得到。

多穗柯总黄酮对四氯化碳致小鼠急性肝损伤的保护作用

目的探讨多穗柯总黄酮(TFL)对四氯化碳(CCl4)致小鼠急性肝损伤的保护作用及其机制。方法小鼠随机均分为6组,正常对照组、模型对照组(6%CCl4橄榄油溶液)、水飞蓟素组(水飞蓟素120 mg·kg^-1)、TFL低、中、高剂量组(50,100,150 mg·kg^-1)。正常对照组、模型对照组灌胃等剂量0.9%氯化钠溶液,其余各组按剂量连续灌胃7 d,末次用药2 h后,按剂量5 mL·kg^-1腹腔注射6%CCl4橄榄油溶液建立急性肝损伤模型,造模6 h后收集血清和肝脏组织。测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)水平以及肝组织白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)水平,苏木精-伊红(HE)染色进行常规组织学观察,Western blotting法检测肝组织中含NLR家族Pyrin域蛋白3(NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、Caspase-1水平。结果与模型对照组比较,多穗柯总黄酮可降低肝质量、肝指数(P<0.05),下调ALT、AST活力(P<0.05),降低肝组织IL^-1β、IL-6、TNF-α水平(P<0.05),增加肝组织SOD、GSH-Px水平,降低MDA水平(P<0.05),下调NLRP3、ASC、Caspase-1蛋白水平(P<0.05),镜下观察显示肝组织损伤得到不同程度改善。结论多穗柯总黄酮对CCl4诱导的急性肝细胞损伤的保护作用,与减轻氧化应激水平,降低炎症因子水平,调控ROS/NLRP3/IL^-1β信号通路有关。

多穗柯中二氢查耳酮的提取、纯化与含量测定

以多穗柯(LithocarpuspolystachyusRehd)叶为原料,研究了二氢查耳酮提取及纯化的适宜条件。结果表明,二氢查耳酮提取的适宜条件为:以1∶8的料水比,在80℃条件下提取60min;二氢查耳酮纯化的适宜条件为:以聚合氯化铝为絮凝剂,在pH值为7·5,温度为55℃时絮凝40min;以ADS-7树脂为吸附剂,以100mg/mL为上样液浓度,80%乙醇为洗脱液浓度。二氢查耳酮的提取率达5·26%。用高效液相色谱法检测,二氢查耳酮含量为98·37%。

镉胁迫下多穗柯幼苗的生长及生理响应

分别用0(对照)、50、100、150、200和250 mg/L的镉处理多穗柯(Lithocarpus polystachyus Rehd)幼苗,研究镉胁迫环境对其生长、生理和光合特性的影响。结果表明:50 mg/L处理的多穗柯幼苗株高和地茎的增长量以及整株的干重均比对照显著性提高;100、150和200 mg/L处理的幼苗各生长指标均有所降低但差异不显著,但相对电导率和渗透调节物质、CAT和POD活性均显著性增高;250 mg/L处理时,幼苗的生物量、形态指标显著性降低,而相对电导率和渗透调节物质显著性增大。说明50 mg/L镉浓度处理有利于多穗柯幼苗的生长,250 mg/L处理则幼苗的生长、生理和光合作用受到显著性抑制。

不同种源多穗柯叶表型与叶脉特征差异分析

为探讨不同种源多穗柯叶表型性状变异规律,提高优异多穗柯资源的利用率,以11个不同种源30个多穗柯无性系为研究对象,分析6个叶表型特征和3个叶脉特征.结果表明:除叶长外,8个性状指标变异系数皆达到10%以上,且无性系间皆达到差异极显著,可见多穗柯叶表型特征和叶脉结构变异极丰富;性状指标与地理因子相关性分析表明,叶面积和叶宽由北向南逐渐减小,叶脉密度较稀,由东北向西南叶形逐渐狭长.平均气温越高,降水量越低,叶面积越小,叶脉密度越大.叶形偏长椭圆形;采用聚类分析可将30个无性系分为4类,其中ZJ5的叶面积和叶宽最大,长宽比和叶片厚度最小,且与其他无性系差异较大,在系统聚类分析中单独分为1类.TL3,TL5,JYS7和DB6的叶长较长,长宽比皆在4.00以上,为第2类.YJ3,YJ4,TL6和TL8叶面积较小,长宽比皆在4.00以上,为第3类.其余21个无性系为第4类.

野金柴抗炎、镇痛和免疫调节作用的研究

目的研究野金柴的抗炎、镇痛、免疫调节作用。方法采用小鼠耳郭肿胀法、腹腔毛细血管通透性观察法、扭体法、碳粒廓清法和迟发型超敏反应法研究野金柴水提物和醇提物的抗炎、镇痛、免疫调节作用。将小鼠随机分8组,分别为空白、阳性对照、野金柴水提取物(低、中、高剂量)、野金柴醇提取物(低、中、高剂量)组。实验结束时测定相应指标。结果野金柴水提物高剂量和醇提物中剂量均能显著减轻二甲苯致炎小鼠的耳肿胀度(P<0.05或P<0.01);水提物低、中、高3个剂量均能显著抑制对乙酸所致腹腔毛细血管通透性的增大(P<0.05或P<0.01);水提物及醇提物均能显著抑制乙酸所致扭体次数(P<0.01);水提物高剂量和醇提物中剂量能显著提高小鼠吞噬细胞的吞噬功能(P<0.05或P<0.01);除醇提物低剂量外,水提物及醇提物各剂量均能显著抑制过敏反应引起的耳肿胀(P<0.05或P<0.01)。结论野金柴具有一定的抗炎、镇痛作用,对免疫功能有一定的双向调节作用。

瑶山甜茶和百色甜茶化学成分及药理研究进展

瑶山甜茶和百色甜茶主要含甜味成分、抗过敏成分等,都具有抗过敏作用。瑶山甜茶还具有控糖、降血脂等作用,百色甜茶的其它药理作用研究尚少。

光质与光周期对多穗柯幼苗生长及光合参数的影响

采用发光二极管LED(Light Emitting Diode)为光源,设置不同光质(正白光、蓝光、红光)和光周期(8、12、16 h)处理,对2年生多穗柯(Lithocarpus polystachyus)扦插苗进行试验。结果表明:处理2个月后,多穗柯幼苗叶面积、叶长、叶宽、叶片数、苗高增量及地径增量差异显著(P<0.05),说明不同光质和光周期处理对其叶片特征及幼苗生长有影响作用。与正白光相比,蓝光有利于多穗柯幼苗的苗高增长,幼苗叶片数量增多,最大净光合速度达到8.59μmol/(m^2·s),而红光则有利于促进幼苗的地径增长量;对比正白光,长日照处理的叶片数及苗高增长量显著提高,有效光强在400μmol/(m^2·s)之后光合速率均高于对照,而短日照处理叶片数显著减少,有效光强在400μmol/(m^2·s)之后光合速率均低于对照。

甜茶应用开发研究

应用茶叶加工技术可将甜茶（ＬｉｔｈｏｃａｒｐｕｓｐｏｌｙｓｔａｃｈｙｕｓＲｅｈｄ．）嫩叶加工成不发酵、半发酵和发酵的“茶叶”。其中，以炒青甜茶和乌龙甜茶为佳，成品无咖啡碱、毒性和苦味。用简单的工艺可制备二氢查尔酮粗提物，直接用于食品工业和制药业。甜茶的抗过敏作用也被体外的透明质酸酶抑制试验所证实。

大孔吸附树脂分离纯化多穗石柯根皮苷

为优化筛选最优树脂分离纯化根皮苷的工艺技术参数,以多穗石柯根皮苷提取液为原料,比较研究D101、X-5、ADS-7、S-8、AB-8、NKA-9、HPD-100及HPD-400 8种大孔吸附树脂对多穗石柯根皮苷的静态吸附与解吸效果。结果表明:S-8树脂对根皮苷有较好的吸附与解吸效果,静态吸附量与解吸量分别达到14.70 mg/g和8.395 mg/g。当主要考虑根皮苷得率时,最优工艺条件为根皮苷上样浓度0.9 mg/m L、上样流速3 BV/h、上样体积7 BV,洗脱剂乙醇体积分数60%、洗脱流速为4 BV/h、洗脱体积为3 BV,其根皮苷得率为89.89%,纯度为10.50%,根皮苷分离富集倍数为2.76倍;当主要考虑根皮苷纯度时,最优工艺参数为根皮苷上样浓度0.9 mg/m L、上样流速3 BV/h、上样体积7 BV,洗脱剂乙醇体积分数70%、洗脱流速为3 BV/h、洗脱体积为3.5 BV,其根皮苷纯度为13.51%,得率为83.26%,根皮苷分离富集倍数为3.56倍。

天然野生植物多穗柯甜茶的化学成分分析

通过对天然野生植物多穗柯营养及化学成分的分析,确认了其富含多种营养物质及人体必需的微量元素和维生素,药用成分含量高并富含二氢查耳酮新型甜味剂而有独特的甜茶特色,为大力开发天然野生植物多穗柯资源提供了科学依据。