六味地黄膏膏摩对脑瘫幼鼠大脑皮层损伤修复及BDNF/TrkB表达的影响

目的:观察六味地黄膏膏摩对脑瘫(CP)幼鼠大脑皮层损伤修复的影响,探讨其促进脑损伤修复的作用机制。方法:采用左侧颈总动脉凝断合并缺氧的方式制备CP模型,并将其随机分为模型对照组、推拿组、涂膏组及膏摩组,同时设立假手术对照组。术后第1天开始,推拿组给予摩肾俞的推拿干预;涂膏组给予六味地黄膏外涂干预;膏摩组给予六味地黄膏外涂及摩肾俞相结合的膏摩干预;假手术对照组及模型对照组在其余3组接受干预的同时给予禁食处理。以上干预或禁食措施1次/d,连续28 d。采用尼氏染色观察幼鼠皮层神经元的形态及数量,并测定外周血清及大脑皮层中脑源性神经营养因子(BDNF)/酪氨酸激酶受体B(TrkB)的蛋白表达水平。结果:推拿组、涂膏组及膏摩组幼鼠大脑皮层正常形态神经元数量均多于模型对照组(P<0.01),膏摩组多于推拿组(P<0.05)及涂膏组(P<0.01),3组幼鼠大脑皮层神经元的形态分布较模型对照组均有所改善。膏摩组幼鼠血清BDNF含量高于模型对照组(P<0.05),大脑皮层BDNF表达水平高于模型对照组、推拿组、涂膏组(P<0.01);但其大脑皮层TrkB表达水平低于模型对照组(P<0.05)。推拿组、涂膏组幼鼠血清及大脑皮层BDNF/TrkB表达水平与模型对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:推拿、涂膏或膏摩均能对脑瘫幼鼠大脑皮层的损伤起到修复作用,其中膏摩效果最佳;六味地黄膏膏摩的促大脑皮层损伤修复机制可能与BDNF/TrkB或其他神经营养因子有关。

HPLC法测定六味地黄膏中莫诺苷和马钱苷含量

目的:建立六味地黄膏中莫诺苷及马钱苷的含量测定方法。方法:采用ZORBAX SB-C18柱(4.6mm×150 mm,5μm),流动相为乙腈-0.3%磷酸溶液梯度洗脱;流速1.0 m L/min;检测波长均为240 nm;柱温为40℃。结果:莫诺苷、马钱苷分别在5.5~87.6μg/m L(r=0.9999),5.4~85.6μg/m L(r=0.9999)范围内线性关系良好;莫诺苷、马钱苷平均回收率分别为96.7%,91.09%,RSD<2.0%,供试品溶液在24h内稳定性良好,且此法重复性较好。结论:该方法简便准确,可用于六味地黄膏中莫诺苷及马钱苷的含量测定,以控制六味地黄膏质量。

HPLC-PDA 波长切换法同时测定六味地黄膏中5种活性成分的含量

目的建立HPLC-PDA波长切换法同时测定六味地黄膏中莫诺苷、马钱苷、芍药苷、毛蕊花糖苷和丹皮酚的含量。方法采用Agilent HC-C 18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);以乙腈(A)-2 mL·L^-1磷酸溶液(B)为流动相,梯度洗脱;流速:1.0 mL·min^-1;莫诺苷、马钱苷、芍药苷、毛蕊花糖苷和丹皮酚的检测波长分别为240(0~33 min),240(0~33 min),230(33~37 min),334(37~44 min)和274 nm(44~55 min);进样量:10μL;柱温:40℃。结果各指标成分分离度良好,莫诺苷、马钱苷、芍药苷、毛蕊花糖苷和丹皮酚5种成分的进样量分别在0.040 12~0.802 40(r 1=0.999 9),0.041 66~0.833 20(r 2=0.999 8),0.090 82~1.816 40(r 3=0.999 9),0.010 86~0.217 20(r 4=0.999 9)和0.092 94~1.858 80(r 5=0.999 9)μg范围内线性关系良好;平均回收率(n=8)分别为98.22%(RSD=0.96%),99.00%(RSD=0.87%),98.62%(RSD=0.77%),98.06%(RSD=0.91%)和99.18%(RSD=0.72%)。结论该方法操作简便、快速,结果准确、可靠,重复性好,可用于六味地黄膏的质量控制。

六味地黄膏摩对脑瘫幼鼠GAS及MTL影响的研究

目的:观察六味地黄膏摩对脑瘫幼鼠胃泌素以及胃动素表达的影响,探究其是否能够改善脑瘫幼鼠的消化吸收功能。方法:选取SD幼鼠50只,随机分为模型对照组、推拿组、涂膏组、膏摩组、假手术对照组,每组10只。推拿组采用摩肾俞进行干预;涂膏组将六味地黄膏涂于肾俞穴部位;膏摩组将六味地黄膏涂于肾俞穴部位并采用指摩法摩肾俞穴;每日1次,共28天。模型对照组、假手术对照组给予禁食处理。干预28天后处死取血,检测血清中GAS及MTL含量。结果:与假手术对照组相比较,模型对照组血清GAS含量降低,差异有统计学意义(P<0.05);模型对照组血清MTL未发生明显变化,差异无统计学意义(P>0.05);推拿组、涂膏组血清GAS、MTL含量与模型对照组相比较,差异无统计学意义(P>0.05);膏摩组血清GAS含量高于模型对照组及推拿组,差异有统计学意义(P<0.05);膏摩组血清MTL与模型对照组相比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:脑瘫幼鼠缺血缺氧损伤后GAS分泌减少,消化吸收功能减弱;六味地黄膏摩能够促进脑瘫幼鼠GAS的表达,改善其消化吸收功能;单纯摩肾俞或涂六味地黄膏未能改善脑瘫幼鼠的消化吸收功能。