鼠疫溶菌疫苗免疫小鼠的体液免疫应答

为选择以F1抗原为主要有效成分的鼠疫溶菌疫苗(Whole cell lysate of Yersinia pestis vaccine,WCLY)的免疫程序,设计了这组试验。在37℃培养鼠疫EV菌,通过超声波裂解法制备鼠疫溶菌疫苗。设计(0,2周)、(0,4周)、(0,2,4周)三种免疫程序,以每剂总蛋白量7.9μg、31.5μg和126.0μg三个剂量皮下接种NIH小鼠。分别在第一针免疫后2、4、8、12周采集血清,通过间接ELISA检测抗鼠疫菌F1抗原和总抗原抗体。结果显示:免疫后血清抗体上升很快,2周内即可测出;无论哪种免疫程序,至12周时抗体滴度仍保持高水平;加强免疫后,抗体水平在4周或8周达到较高,可与活疫苗免疫者相比;溶菌疫苗的接种剂量为7.9μg时,动物只出现轻度不良反应。提示鼠疫溶菌疫苗需要两剂免疫,最短可间隔2周,接种剂量应不超过7.9μg,疫苗中应富含F1抗原。

鼠疫活菌苗的研究

试验用鼠疫菌株0614F是自喜马拉雅早獭体内分离的毒力型菌株,通过挑选无毒的个体而获得,其毒力因子为PI^+、PI^+、VW^+、Pgm^-。经豚鼠多次传代,该菌株FI抗原含量高,通过动物亦无毒力增强现象,对豚鼠的免疫效果较EV兰株好,返祖实验中子代质粒与原代相同,无质粒的变异及丢失。采用皮下注射及皮上划痕两种途径免疫豚鼠,免疫3～6个月抗体水平随免疫时间推移逐渐下降,保护率亦随之下降。经加强免疫后对毒菌P_(141)50亿活菌的攻击全部得以保护,其保护率(100％)与EV兰株有明显差异,残余毒力也略高于EV兰株。

鼠疫活菌苗接种后人群血清学反应及动物自动保护力试验

以微量被动血凝方法,观测了两组人群用冻干鼠疫活菌苗(EV活菌苗)皮上划痕免疫后的抗体变化以及对豚鼠皮上接种后的保护力试验。经EV活菌苗皮上接种后,人群血清阳转率约80～90％,血凝试验抗体滴度持续时间不长,接种后15天抗体滴度最高,1个月后逐渐下降。但动物试验显示在免疫后的6个月内具有一定的免疫力。EV活菌苗皮上接种易被群众接受,剂量以15亿个菌可靠性大。