三维酰胺质子转移成像在原发性肝癌临床扫描可行性及图像质量评估中的初步研究

目的 评估参数优化的三维酰胺质子转移加权(3 dimensions-amide proton transfer weighted,3D-APTw)成像在原发性肝癌扫描中的图像质量并分析其临床扫描的可行性。材料与方法 前瞻性招募2020年10月至2022年2月临床怀疑原发性肝癌患者,共109例。采用飞利浦3.0 T MRI设备进行扫描,分别采集T1WI、T2WI、弥散加权成像、酰胺质子转移加权(amide proton transfer weighted,APTw)及多期增强图像。机器自动生成经过B0校正的肝脏APTw图像。计算3D-APTw成像的扫描成功率及计算成功率。采用Kendall一致性系数对观察者内及观察者间主观评分进行一致性分析,对主观评分3分以上的病例测量3D-APTw图像的信噪比(signal-to-noise ratio,SNR)、肿瘤对比噪声比(contrast-to-noise ratio,CNR)、肿瘤及肝实质的APTw值并计算各参数值的变异系数,采用组内相关系数进行观察者内及观察者间可重复性测量的一致性分析。结果 109例患者中有11例患者3D-APTw图像中病变区域存在信号缺失,扫描成功率为89.91%(98/109),剩余98例患者中78例3D-APTw图像的主观评分为3分以上,计算成功率为71.56%(78/109)。观察者内及观察者间图像质量主观评分一致性分别为0.771和0.692,P<0.01。肿瘤组织APTw值观察者内及观察者间ICC分别为0.822和0.811,肝实质APTw值、SNR及CNR观察者ICC分别为0.675、0.634、0.666,肝实质APTw值、SNR及CNR观察者间ICC分别为0.614、0.290、0.560。肿瘤组织APTw值高于肝实质[(2.55±0.08)%vs.(1.45±0.07)%],两者间差异有统计学意义(P<0.001)。肿瘤组织和肝实质APTw值的变异系数分别为30.40%和44.40%。SNR和CNR为25.92±18.50和3.35±3.20。SNR变异系数为71.40%,CNR变异系数为90.00%。结论 参数优化后的3D-APTw成像可以用于原发性肝癌的临床扫描,但容易受呼吸运动、胆囊或血管的影响而出现信号缺失或伪影,在参数设置及成像技术上仍有需要改进和提高的空间,以进一步优化其图像质量。

Transplantation of primary and reversibly immortalized human liver cells and other gene therapies in acute liver failure and decompensated chronic liver disease

Studies performed in experimental small animalswith hepatic-based metabolic disorders but nostructural liver disease,including Gunn andanalbuminaemic rats and rabbits with inherited low-density lipoprotein receptor deficiency,have shownthat up to 95% of hepatocytes transplanted into thespleen or liver remain in these sites,withimprovement in metabolic function

Prevention of recurrent hepatitis B infection after liver transplantation

BACKGROUND:Recurrence of hepatitis B virus(HBV) infection after liver transplantation can lead to graft loss and a reduction in long-term survival.The purpose of this review is to summarize the current therapeutic options for preventing HBV recurrence in liver transplant recipients.DATA SOURCES:Up to January 2013,studies that were published in MEDLINE and EMBASE on prevention of HBV recurrence after liver transplantation were reviewed.RESULTS:There have been remarkable advancements in the past two decades on the prevention of HBV recurrence after liver transplantation,from the discovery of hepatitis B immune globulin(HBIG) and lamivudine monotherapy to the combination therapy using HBIG and lamivudine.With the development of newer and stronger antiviral agents,the need for life-long HBIG is doubtful.With their low resistance profile,oral antiviral prophylaxis using these new agents alone is sufficient and is associated with excellent outcome.CONCLUSIONS:Restoration of host HBV immunity with adoptive immunity transfer and vaccination may represent the ultimate strategy to withdraw prophylactic treatment and to achieve a drug free regimen against HBV recurrence after liver transplantation.

动态增强磁共振成像定量参数鉴别诊断肝脏小占位性病变良恶性价值研究

目的 研究动态增强磁共振成像(DCE-MRI)定量参数鉴别诊断肝脏小占位性病变良恶性的价值。方法 2020年3月~2022年3月我院收治的肝脏占位性病变患者83例,纳入病灶≤3(2.2±0.3)cm。所有患者接受DCE-MRI检查,应用Tissue4D软件获得容量转移常数(Ktrans)、速率常数(Kep)、血管外细胞外容积分数(Ve)和增强曲线下初始面积(IAUC)参数。经手术或穿刺组织病理学检查确定诊断。应用受试者工作特征曲线(ROC)分析DCE-MRI定量参数的诊断效能。结果 在本组83例肝内占位性病变患者中,经病理学检查诊断良性病灶38例,恶性病灶45例;恶性病灶Krans、Kep、Ve和IAUC分别为(0.4±0.2)min^(-1)、(0.9±0.3)min^(-1)、(0.5±0.2)和(37.2±7.1),显著大于病灶周围肝组织【分别为(0.1±0.1)min^(-1)、(0.4±0.2)min^(-1)、(0.3±0.1)和(11.1±2.9),P<0.05】,也显著大于良性病灶【分别为(0.2±0.1)min^(-1)、(0.4±0.3)min^(-1)、(0.3±0.2)和(22.1±5.7),P<0.05】;经ROC曲线分析显示,应用Krans、Kep、Ve和IAUC联合判断肝脏小占位性病变良恶性的AUC为0.920,其灵敏度为95.0%,特异度为78.5%,显著高于参数单独诊断(P<0.05)。结论 DCE-MRI定量参数可有效鉴别肝脏小占位性病变的性质,具有很大的临床应用价值。

化学交换饱和转移成像在肝脏疾病中的应用进展

化学交换饱和转移(chemical exchange saturation transfer,CEST)技术是近年来新兴的磁共振成像技术。它可以使用体内的物质作为对比剂观察生物代谢的变化,避免了外源性对比剂的缺点。CEST技术作为一种无创的细胞分子水平的磁共振技术,能够鉴别良恶性肿瘤、预测恶性肿瘤组织学分级、预测肿瘤患者术后复发风险;与其他生物指标联合使用来提高诊断的准确性,有时更表现出优于现有指标的诊断效能。本研究主要阐述CEST成像在肝脏疾病中的应用现状及进展。

肝硬化伴肝癌患者动态增强MRI影像学特点及评估价值

目的探究肝硬化伴肝癌患者动态增强MRI影像学特点及评估价值。方法选取2021年8月—2022年8月100例肝硬化伴肝癌作为研究组,另选取同期100例肝硬化不伴肝癌作为对照组。比较2组动态增强MRI影像学特点,动态增强MRI参数[速率常数(K_(ep))、容积转移常数(K^(trans))、血管外细胞外间隙体积百分比(V_(e))],血清肿瘤标志物[癌胚抗原(CEA)、甲胎蛋白(AFP)]水平;采用Pearson相关系数模型分析肝硬化伴肝癌患者动态增强MRI参数与血清CEA、AFP的相关性;采用受试者工作特征曲线分析动态增强MRI参数诊断肝硬化伴肝癌的价值;并比较研究组不同病理特征患者动态增强MRI参数及与患者病理特征的相关性。结果研究组动脉期强化、门静脉期廓清及肝胆期低信号占比均较对照组高(P<0.01)。研究组K_(ep)、K^(trans)、V_(e)及血清CEA、AFP水平均较对照组高(P<0.01)。肝硬化伴肝癌患者K_(ep)、K^(trans)、V_(e)与血清CEA、AFP水平呈正相关(P<0.01)。K_(ep)、K^(trans)、V_(e)联合诊断肝硬化伴肝癌的曲线下面积(AUC)大于血清CEA、AFP联合诊断的AUC(P<0.01)。K_(ep)、K^(trans)、V_(e)与肝硬化伴肝癌患者肿瘤分期、淋巴结转移情况呈正相关(P<0.01)。结论肝硬化伴肝癌患者动态增强MRI影像学特点以动脉期强化、门静脉期廓清及肝胆期低信号为主,其定量参数在肝硬化伴肝癌诊疗方面具有良好的应用价值。

前路经寰枢外侧关节螺钉内固定术的生物力学评价

目的 :评价不同方法前路经寰枢外侧关节螺钉内固定的稳定性和刚度。方法 :通过体外生物力学实验 ,对15例新鲜尸体标本的正常、齿状突切除、三种不同方法前路经寰枢外侧关节螺钉内固定术、后路Brooks法寰枢关节内固定术等状态进行三维角度运动范围和关节刚度进行测试。结果 :前路经寰枢外侧关节螺钉内固定术明显减少寰枢关节的各向角度运动范围 ;三种不同方法之间寰枢关节的各向角度运动范围和刚度无明显差异 ;前路经寰枢外侧关节螺钉内固定术较后路Brooks法内固定术 ,寰枢关节的旋转和侧屈运动范围减少更明显 ,寰枢关节的由前向后剪切和旋转刚度更高。结论 :前路经寰枢外侧关节螺钉内固定术的稳定性和刚度达到了临床治疗的要求 ,术后对外固定强度的依赖较低 ,三种不同方法的生物力学结果相近 ,为简化操作和设计提供了新思路。

重组人胰岛素原基因在培养的大鼠肝癌细胞中基因转移和表达

目的:探讨含有葡萄糖反应元件的重组人胰岛素原基因在培养的大鼠肝癌细胞中基因转移及表达情况。方法:将含有3点突变及2点突变的人胰岛素原基因转染至大鼠肝癌CBRH7919细胞,测定不同葡萄糖浓度下瞬时及用G418筛选稳定表达后胰岛素的分泌量,并检测基因整合情况。结果:①转染后38 h及1个月,不同葡萄糖浓度下,含有3点突变胰岛素原基因的肝癌细胞胰岛素分泌量不同;含有2点突变胰岛素原基因的肝癌细胞,只有在25 mmol/L的葡萄糖浓度培养液中,才能测出胰岛素分泌量;②阳性克隆细胞基因组扩增出特异目的电泳条带,未转染细胞无此条带。结论:①用逆转录病毒为载体能将重组人胰岛素原基因转染到肝癌细胞中,并使之稳定表达。②所构建的重组人胰岛素原基因能指导靶细胞随葡萄糖浓度的变化调节胰岛素分泌。

作为基因转移载体的乙肝病毒衣壳的制备及其功能的初步鉴定

目的构建具有肝脏靶向性的乙型肝炎病毒衣壳基因转移载体。方法采用PEG8000病毒浓缩法提取HepG2.2.15细胞上清液中的乙型肝炎病毒,用β-丙内酯法制备乙型肝炎病毒衣壳,用它包裹5.3kb的绿色荧光蛋白质粒以测试其装载能力,并用ELISA法、PCR法、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳、透射电镜等对它进行定量、定性研究,最后将其转染HepG2细胞,通过荧光显微镜观察绿色荧光蛋白表达情况,通过流式细胞仪检测细胞发光率。结果制备的乙型肝炎病毒衣壳载体保留病毒衣壳的表面蛋白HBsAg+preS1+preS2,无病毒DNA;该载体对绿色荧光蛋白质粒较高装载容量,装载绿色荧光蛋白质粒后在肝癌细胞中有很高的转移效率,并能实现高表达。结论采用PEG8000病毒浓缩法、β-丙内酯法可从HepG2·2·15细胞上清液中制备乙型肝炎病毒衣壳基因转移载体,该载体具有良好的生物学功能。

非酒精性脂肪肝患者血清铁、转铁蛋白、血清铁蛋白水平测定

目的:研究非酒精性脂肪肝(NAFL)患者血清铁、转铁蛋白、血清铁蛋白的水平,确定诊断指标。方法:分别用原子吸收光谱法和放射免疫法检测患者和正常对照者血清铁、转铁蛋白、血清铁蛋白水平。采用1sec快速肝穿刺法,对68例NAFL患者取肝组织标本,行HE和铁染色。结果:患者组血清铁、转铁蛋白、血清铁蛋白水平分别为19.5±11.8μmol/L、44.2±10.3μmol/L、178.7±72.1ng/mL,对照组20例血清铁、转铁蛋白、血清铁蛋白分别为10.5±5.7μmol/L、40.7±10.3μmol/L、139.3±71.9ng/mL。患者组血清铁及血清铁蛋白与对照组有显著性差异(P<0.01)。重度NAFL患者转铁蛋白与对照组间比较有统计学差异(P<0.05)。结论:NAFL患者多出现血清铁、转铁蛋白及血清铁蛋白增高,这三项指标可作为诊断NAFL的重要参考指标。

血管内皮细胞生长因子的初始水平在肝癌外周血转移中的作用

目的研究肝癌患者外周血VEGF的初始表达水平以及与转移的关系。方法应用ELISA法测定肝癌患者、慢性肝炎患者和健康志愿者血浆VEGF水平,并评价其初始水平对肝癌转移和死亡的诊断效率。结果肝癌组的VEGF水平明显高于对照组和慢肝组(P<0.01);慢肝组与对照组的VEGF水平无明显差异(P>0.05);肝癌组VEGF水平升高的阳性率为71.9%;在肝癌组VEGF水平升高组中,6个月内转移和死亡的阳性率为87.0%;在肝癌组VEGF水平正常组中,6个月内转移和死亡的阳性率为33.3%(与升高组比较,P<0.01,);VEGF水平升高对肝癌转移和死亡的诊断效率为81.3%。结论血VEGF与肝癌的发生发展密切相关,是肝癌生长和转移的重要因子,其初始水平高表达提示患者预后差。

B7-1和IL-12基因转染对肝癌细胞免疫原性的影响

目的 观察B7 1和IL 12基因表达对人肝癌细胞免疫原性的影响。方法 分别将B7 1和IL 12基因以逆转录病毒介导转染HepG2细胞。阳性克隆细胞与健康人外周血淋巴细胞 (PBL)混合培养后 ,用流式细胞仪检测PBL表面Ⅰ类人白细胞抗原 (HLA Ⅰ )分子表达 ,以MTT法检测PBL的特异性杀伤活性及杀伤K5 6 2细胞的活性。结果 混合培养后HepG2 /B7 1和HepG2 /IL 12细胞组PBL表面的HLA Ⅰ分子表达分别较HepG2 /neo细胞组增加16 .95 %和 14 .71% (P <0 .0 5 ) ;与HepG2 /neo组比较 ,HepG2 /B7 1组PBL特异性杀伤活性增高 12 .5 % (P <0 .0 5 ) ,HepG2 /IL 12组PBL的特异性杀伤活性无明显增高 (P >0 .0 5 )。HepG2 /B7 1、HepG2 /IL 12细胞活化的PBL对K5 6 2细胞的杀伤活性较HepG2 /neo组分别增高 19.38%和 14 .78% (P <0 .0 5 )。 结论 B7 1和IL 12分子均能增强免疫细胞对肝癌细胞的识别和杀伤 。

介导大鼠结缔组织生长因子基因沉默的慢病毒载体转移质粒的构建及鉴定

目的:构建介导大鼠结缔组织生长因子(CTGF)基因沉默的慢病毒载体转移质粒pGCL-CTGF,为进一步包装慢病毒载体奠定基础。方法:以大鼠CTGF基因为靶基因,根据RNA干扰(RNAi)序列设计原则,设计4对有小发夹结构的RNAi靶点序列,退火形成双链DNA,双酶切后定向克隆到慢病毒载体转移质粒pGCL-GFP中,构建4个含靶基因片段的重组慢病毒载体转移质粒pGCL-CTGF,并对质粒进行PCR及测序鉴定。结果:CTGF的短发夹RNA(shRNA)片段被成功克隆到慢病毒载体转移质粒pGCL-GFP中,4个插入序列与设计的靶基因片段完全一致。结论:构建了能够表达4个含CTGF靶基因片段的慢病毒载体转移质粒,为进一步包装介导CTGF基因沉默的慢病毒载体奠定了基础。

实验性自身免疫性肝炎的研究

本文通过 S-100肝抗原多次免疫同种 C57BL/6小鼠后,成功地建立了实验性自身免疫性肝炎的动物模型,并在此基础上进一步探讨了过继输注致敏脾淋巴细胞给正常同种小鼠后自身免疫性肝炎的发生情况.结果表明,导致过继输注后自身免疫性肝炎主要为 T 淋巴细胞,揭示了 T 淋巴细胞在自身免疫性肝炎发病中起着重要作用.另外,本文还就免疫抑制剂环孢素 A 对实验性自身免疫性肝炎的防治作用进行了探讨.组织学检查结果表明预防和治疗用药时均能减轻肝脏病理变化和/或减少自身免疫性肝炎的发生率.为临床治疗自身免疫性肝炎提供了实验室依据.

磁化传递对比成像在大鼠肝硬化的初步应用

目的探讨磁化传递对比(MTC)成像在大鼠肝硬化的初步应用价值。材料与方法二乙基亚硝胺诱导的单纯性肝硬化Wistar大鼠6只,5只正常大鼠作为对照组;全部大鼠均行附加磁化传递(MT)脉冲前后SE序列T1WI及FSE序列T2WI扫描。测量感兴趣区平均信号强度、背景噪声,计算信噪比及磁化传递率(MTR)。结果6只大鼠病理证实均为单纯性肝硬化。电镜下见肝硬化细胞间隔增宽,胶原纤维明显增多。T1WI上正常肝实质附加MT脉冲后信噪比(SNR)低于无MT脉冲图像(P=0.002);肝硬化附加MT后SNR明显低于无MT时(P=0.000);肝硬化的MTR显著高于正常肝实质(P=0.000)。T2WI上正常肝实质附加MT后SNR低于无MT时(P=0.021);肝硬化附加MT后SNR显著低于无MT时(P=0.000);肝硬化的MTR较正常肝实质明显增高(P=0.002)。结论MTC成像能间接反映肝硬化组织中胶原成分变化,为肝硬化的诊断和分期提供依据,可作为评价肝硬化的有效手段。

肝组织TGF-β_1、TIMP-1及MMP-2表达与纤维化关系的实验研究

目的 探讨免疫性肝纤维化肝组织TGF β1、TIMP 1及MMP 2表达与肝纤维化间的关系。方法 2 4只雄性Wistar大鼠尾静脉注射白蛋白建立实验性免疫性肝纤维化模型 ,检测血清HA、ALT、AST、ALB ,流式细胞仪定量分析肝组织TGF β1、TIMP 1、MMP 2和α SMA基因表达量 ,观察大鼠肝组织病理、肝组织Pollak三重染色和Gomori银染色、苦味酸 天狼红染色、Ⅳ型胶原免疫组化、α SMA免疫组化、肝匀浆Hyp测定。结果 随着肝纤维化程度的加重血清HA、ALT、AST、肝组织匀浆Hyp的浓度和TGF β1、TIMP 1及α SMA基因表达量均增加 ,MMP 2于肝纤维化早期明显升高 ,晚期明显降低。结论 实验性肝纤维化过程中TGF β1、TIMP 1促进肝纤维化的进展 ,MMP 2抑制其进展。

疏肝法联合滋阴补肾汤治疗IVF-ET周期卵巢低反应临床研究

目的:疏肝法联合滋阴补肾汤对辅助生殖技术体外受精-胚胎移植(IVF-ET)周期卵巢低反应患者子宫内膜容受性、促性腺激素使用量及妊娠结局的影响。方法:将符合纳入标准的IVF-ET周期卵巢低反应患者180例按照随机分组原则,分为联合组、疏肝法组、对照组3组。对照组患者采用控制性超排卵治疗;疏肝法组患者采用疏肝法配合控制性超排卵治疗;联合组患者采用疏肝法联合滋阴补肾汤配合控制性超排卵治疗。分别对3组GnRH-a启动使用剂量、使用天数以及使用总剂量,使用人绒毛膜促性腺激素当天血清雌二醇(E2)、黄体生成素(LH)、孕酮(P)水平,子宫内膜容受性,妊娠成功率和不良妊娠结局进行对比观察。结果:3组GnRH-a启动使用剂量、使用天数、使用总剂量、使用人绒毛膜促性腺激素当天E2、P、LH水平,子宫内膜全层厚度和子宫形态之间,差异均有统计学意义(P<0.05)。经两两比较,联合组GnRH-a启动使用剂量、使用天数以及使用总剂量显著低于对照组及疏肝法组(P<0.05),联合组患者的使用人绒毛膜促性腺激素当天E2、P、LH水平和子宫内膜全层厚度显著高于对照组及疏肝法组(P<0.05),联合组临床妊娠率71.67%,高于疏肝法组51.67%及对照组41.67%(P<0.05);3组畸形、流产、早产、胎停育等情况,差异均有统计学意义(P<0.05),且联合组妊娠异常情况明显低于对照组及疏肝法组(P<0.05)。结论:疏肝法联合滋阴补肾汤对IVF-ET周期卵巢低反应患者,可有效改善患者子宫内膜容受性,降低促性腺激素使用量,提高和改善妊娠成功率和妊娠结局。

半乳糖化壳聚糖-低分子聚乙烯亚胺/DNA复合物的肝靶向性研究(英文)

目的：研究半乳糖化壳聚糖-低分子聚乙烯亚胺（galactosylated chitosan-graft-polyethyleneimine,GC-PEI）/DNA复合物在体内外的肝靶向性。方法：GC-PEI与增强型绿色荧光蛋白（enhanced green fluorescentprotein,EGFP）质粒（pEGFP-Cl）在0.01 mol/L PBS,150 mmol/L NaCl,5%葡萄糖溶液中自组装成3种不同溶媒介导的GC-PEI/DNA复合物,检测复合物粒径大小与形态,Zeta电位以及结合和保护DNA的能力;并进一步测定GC-PEI聚合物的毒性,研究复合物的肝靶向转染效率。结果：在GC-PEI与DNA质量比为1∶1-2.5∶1时,GC-PEI聚合物能有效地结合和保护所携带的DNA免受核酸酶和血清的降解。复合物粒子呈规则的球形,有明显的核壳结构。GC-PEI聚合物在检测细胞中未显示出明显毒性;动物体内急性毒性实验显示：通过尾静脉注射50-300μg的GC-PEI聚合物入小鼠后,实验小鼠2周内无急性毒性反应和死亡发生。荧光显微镜和流式细胞仪检测证实GC-PEI/DNA复合物在肝细胞系（QSG7701/core,L02）中的绿色荧光蛋白（green fluorescent protein,GFP）表达明显高于非肝细胞系（SGC-7901,HBE）细胞。体内实验表明转染48 h后,小鼠肝组织在荧光显微镜下可以检测到明显的绿色荧光,而其他主要脏器未见明显荧光。结论：GC-PEI聚合物能够在体内外特异性将外源基因或DNA导入肝细胞,具有良好的肝靶向性。

3.0T MR磁化传递成像评价慢性乙型肝炎肝纤维化

目的:初步探讨3.0T MR磁化传递成像(MTI)技术评价肝纤维化程度的价值。方法:选取肝穿诊断肝纤维化者27例,代偿期肝硬化患者14例及健康人10例行磁化传递成像(MTI)检查,据肝纤维化程度分6组:S0(健康人,10例)、S1(5例)、S2(7例)、S3(8例)、S4(7例)、S5(代偿期肝硬化,14例),通过测量MR信号强度,计算获得各受试者肝脏磁化传递率(MTR),分析各组间MTR值差异及其与肝脏纤维化、炎症程度的相关性;采用受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析MTR值诊断肝纤维化、肝硬化程度的能力。结果:MTR值与肝纤维化程度及炎症程度均有正相关趋势(P≤0.001),S0、S1、S2组间及S3、S4、S5组间MTR值无统计学差异,S0与S3、S4、S5之间及S1+2与S3+4+5之间MTR值有统计学差异;ROC曲线显示MTR值评价中重度肝纤维化(S3+4+5)有统计学意义(P=0.000),以MTR≥0.077诊断S≥3的敏感性为69.0%、特异性为90.9%。结论:MTR尚不能诊断早期轻度肝纤维化,但对鉴别轻度肝纤维化与中重度肝纤维化及肝硬化有一定的临床价值,可与临床生化等检查结合作为诊断肝纤维化的补充手段。

肝癌基因治疗的研究

肝癌是我国常见肿瘤,基因治疗是正在发展的新疗法。本文对肝癌的基因治疗的基因转移方法、治疗策略、存在问题和发展方向等作一综述,旨在对此有所认识,为今后相关研究打下基础。