过氧化物酶6在肝脏缺血再灌注损伤模型中的表达及其意义

【目的】探讨过氧化物酶6（PRDX6）在肝脏缺血再灌注损伤模型中的表达及其意义。【方法】建立肝脏缺血再灌注损伤模型，并设立正常对照组、假手术组、缺血再灌注组及槲皮素处理组。分别收集各组肝脏组织并提取总蛋白质，进行双向凝胶电泳、基质辅助激光解析离子化飞行时间质谱鉴定，并用免疫组织化学法对PRDX6的表达进行验证。【结果】双向凝胶电泳显示，缺血再灌注损伤组、槲皮素组分别可检测到大约（825±29）、（831±27）个蛋白质点，经成组比较共计有44个蛋白质点差异明显，上调25个，下调19个。槲皮素能够诱导PRDX6的表达，且在再灌注后12 h点表达最高。【结论】PRDX6可能与槲皮素保护肝脏缺血再灌注损伤有关，将为槲皮素保护肝脏缺血再灌注损伤提供新的实验依据。

中国成人肝微粒体P450酶活性研究

目的观察中国成人肝微粒体细胞色素P450(CYP450)、细胞色素b5(CYb5)的含量及常见几种药物代谢酶活性水平及在性别、民族间的分布差异。方法肝组织匀浆10000×g离心去除沉淀,再以100000×g超速离心60min,取沉淀加PBS甘油缓冲液,充分溶解制成微粒体悬液,用Lowry法测定蛋白含量;用双光道紫外分光光度计测定CYP450和CYb5的含量及P450酶活性。结果48例成人肝微粒体CYP450和CYb5含量分别为(0.46±0.07)nmol/mg和(0.44±0.04)nmol/mg;男性组CYP450和CYb5含量分别为0.49±0.05)nmol/mg和(0.46±0.06)nmol/mg,均高于女性组的(0.41±0.08)nmol/mg、(0.42±0.05)nmol/mg,P<0.05;汉族、回族和壮族3个民族P450和CYb5含量作q检验进行两两比较,各组间差异均无统计学意义(P>0.05)。药物代谢酶NADPH细胞色素C还原酶(NR)、乙基吗啡N-脱甲基酶(EDM)、氨基比林N-脱甲基酶(ADM)、苯并芘羟化酶(BPH)和戊巴比妥侧链羟化酶(PSCH)等酶活性水平分别为(0.71±0.13)nmol/(mg.min),(0.89±0.18)nmol/(mg.min),(0.99±0.17)nmol/(mg.min),(0.07±0.01)nmol/(mg.min),(4.15±0.65)μmol/(mg.min),其中EDM活性水平女性组高于男性组(P<0.05),PSCH活性水平男性组高于女性组(P<0.05),其他各种酶活性男女之间无显著性差异;上述5种酶活性水平经q检验,汉族、回族和壮族3个民族之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论测定了中国成人肝微粒体CYP450、CYb5含量及NR,EDM,ADM,BPH,PSCH等酶活性水平,男性组CYP450、CYb5含量及PSCH活性高于女性组,而EDM活性水平女性组高于男性组,上述7种指标在汉族、回族和壮族之间差异均无统计学意义。

经ERC介入治疗肝移植术后胆管狭窄

目的探讨经ERC介入治疗肝移植术后胆管狭窄的效果。方法收集2005年1月至2007年6月我院收住的肝移植术后胆管狭窄的60例患者的相关资料,归纳分析ERC介入治疗的效果。结果患者就诊的症状主要为胆道梗阻和胆管炎表现。60例胆管狭窄的ERC介入治疗治愈率为55%(33/60),好转率为30%(18/60),总有效率为85%(51/60)。吻合口型、肝外型、肝内型及肝内外混合型BS的介入治疗治愈率分别为100%(6/6)、63.6%(7/11)、27.2%(3/11)及53.1%(17/32)。结论肝移植术后胆管狭窄既有特征性表现,又有多样性表现,已成为肝移植术后再次就诊的主要原因,经ERC介入治疗是肝移植术后胆管狭窄的首选。但目前肝移植术后胆管狭窄总体疗效尚不是很理想,治疗效果与其类型密切相关,吻合口型疗效最好,肝外型次之,肝内外混合型和肝内型疗效较差。

右美托咪定预处理对大鼠肝门阻断所致肠道损伤的保护作用

目的探讨α2-肾上腺素能受体激动剂右美托咪定预处理对大鼠肝门阻断所致肠道损伤的保护作用。方法24只雄性 SD大鼠随机分为3组（n=8）：假手术组（Sham组）、肝门阻断组（PTC组）、右美托咪定预处理组（Dex组）。应用Pringle法行肝门阻断,持续30 min,阻断解除后4 h 处死大鼠,取血清测肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平,取回肠组织测定超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）水平,行病理镜检并作 Chiu评分。结果阻断解除后4 h,PTC组及Dex组血清TNF-α水平、回肠组织MDA含量及病理学Chiu评分均显著高于 Sham组,回肠组织 SOD活性显著低于 Sham 组；Dex 组 TNF-α、MDA 及 Chiu 评分结果显著低于PTC组,而 SOD结果显著高于PTC组（P＜ 0.05）。结论右美托咪定可通过减轻组织炎症及氧化应激反应,保护肠黏膜,减轻肝门阻断后肠道的损伤。

单一腹主动脉阻断式无血切肝术与Pringle式及Heaney式的对照实验研究——兼论我国腹主动脉阻断式无血外科学科之率先建立

目的探讨单一腹主动脉阻断式下无血切肝术式的效果。方法1980年以来,我们进行了一系列常温下单一腹主动脉阻断(SAAC)实验研究,其结果首次证实犬SAAC安全时限为25min。在此时限内,仅有轻度可逆性的血液动力学,酸碱平衡、血液生化,以及主要脏器的超微结构变化;超过此时限,则将会导致不可逆难以代偿的体内严重病理生理变化。我们还进行了一系列SAAC式腹部无血外科实验研究。本实验中18犬被随机分成3组(各组n=6)做下列对照研究:单一腹主动脉阻断式无血切肝术"SAAC-BH式";Pringle’s式切肝术;Heaney式无血切肝术。结果(1)3组切肝术平均时间:A组5.80min,B组5.85min,C组5.90min,3组组间比较无显著性差异(P>0.05);(2)3组术中切肝平均出血量:A组5.60mL,B组28.40mL,C组5.80mL,A、C两组与B组相比较存在显著性差异(P<0.05);(3)A组6犬术后均苏醒与进食,并能长期生存;B、C组各有1犬与2犬死于术后1周之内;余犬术后均能苏醒与进食,并能长期生存;(4)SAAC-BH组阻断后与撤钳后均发生某些生理生化与脏器超微结构变化,均在可逆性范围之内。结论在严格遵循"二叉树耐受法则"条件下,SAAC-BH式(膈下,腹腔干动脉之上水平)像Heaney式一样均能达到无血切肝之目的,且能安全施行,控制术中出血优于Pringle’s式切肝式。本文提出现代肝脏切除术发展经过4个阶段,并将SAAC-BH式与现有切肝术各式家系做了详细利弊分析。最后指出,我国腹主动脉阻断式无血外科学科在国际上已率先建立。

奥曲肽对兔肝缺血再灌注后肺损伤的影响

目的 探讨奥曲肽在兔肝缺血再灌注后对远处器官肺损伤的影响.方法 采用Pring＇s兔肝脏再灌注模型,将24只新西兰大白兔随机分为三组：Ⅰ组（假手术组）、Ⅱ组（肝脏缺血再灌注生理盐水组）、Ⅲ组（奥曲肽预适应组）.Ⅲ组于腹腔内注射20μg/kg奥曲肽和皮下注射30μg/kg奥曲肽,均用0.9%的生理盐水稀释至2 ml,其他组在同一时间点用同样途径注射等量生理盐水.观察三组动物肝门阻断前（T1）、阻断后30 min（T2）、再灌注后30 min（Ts）、60 min（T4）、120 min（T5）、240min（T6）平均动脉压和心率的变化,以及T1、T2、T3、T4、T5、T6各时间点肿瘤坏死因子α（TNF-α）和白介素-1β（IL-1β）的变化,再灌注后240rain时处死兔子,取肺组织在透射电镜下观察各组肺细胞超微结构的变化,采用TUNEL法检测其凋亡细胞.结果 MAP和HR在T2至T4时间点Ⅱ组、Ⅲ组明显低于Ⅰ组,而Ⅱ组显著低于Ⅲ组（P〈0.05）;Ⅱ组从T2开始、Ⅲ组从T3开始两组血浆TNF-α、IL-β显著高于Ⅰ组（P〈0.05）,且Ⅲ组从T2开始后各时点血浆TNF-α和IL-β明显低于Ⅱ组（P〈0.01）;透射电镜下Ⅲ组肺的亚细胞结构损伤显著轻于Ⅱ组,采用TUNEL法检测肺组织中的凋亡细胞数在5个高倍镜下Ⅱ组（55.82±4.19）、Ⅲ组（32.17±3.10）明显多于Ⅰ组（3.96±0.87）,而Ⅲ组显著少于Ⅱ组（P〈0.01）.结论 奥曲肽对于兔肝缺血再灌注后远处器官肺的损伤确有保护作用.

兔肝VX2瘤血供程度对HIFU作用效果影响的初步研究

目的 探讨兔肝VX2瘤实质期血供程度对高能聚焦超声（HIFU）后肿瘤靶点处温度及凝固性坏死体积（V）大小的影响,为进一步精确控制HIFU剂量、提高治疗效率提供实验依据.方法 制作瘤兔24只并分成：10、15、20 d、无血供组（10 d成模后处死）4组,在对应时间进行相同参数HIFU辐照,对靶点实时测温,做出时间-温度曲线（TTC）,测量V,对坏死周边残存肿瘤组织及正常肝组织进行微血管密度（MVD）计数.结果 （1）肿瘤MVD：10 d组＞15 d组＞20 d组（P＜0.05）.（2）峰值温度（Tmax）、峰值时间（T1）、温升斜率（k1）：10 d组、15 d组、20 d组之间比较差异无统计学意义（P＞0.05）,此三组与无血供组比较差异有统计学意义（P＜0.05）.（3）温降斜率（k2）：10 d组＞15d组＞20 d组＞无血供组（P＜0.05）;温降时间（T2）：10 d组＜15 d组＜20 d组＜无血供组（P＜0.05）;（4）V：10 d组＜15 d组＜20 d组＜无血供组（P＜0.05）.结论 肿瘤血供程度对HIFU“温升”过程无显著影响,而对“冷却”过程有显著的影响.肿瘤血供越丰富,辐照后散热越快,组织越易恢复到正常温度,形成V越小.

单磷酸类脂A预处理对大鼠肝缺血再灌注损伤的保护作用及其机制

目的研究单磷酸类脂A（MPLA）是否通过血红素氧合酶-1-一氧化碳-环磷酸鸟苷（HO-1-CO-cGMP）途径促进降钙素基因相关肽（CGRP）释放，发挥其对大鼠肝缺血再灌注损伤的保护作用。方法健康雄性SD大鼠分为对照组、假手术组、肝脏缺血再灌注组、MPLA低、中、高剂量组（肝脏缺血再灌注＋MPLA0．2、0．5、1．0mg／kg），复制肝缺血再灌注模型，随后电子显微镜观察细胞超微结构；多功能生化分析仪测定血清丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）、乳酸脱氢酶（LDH）和肝组织CO水平；免疫组化检测肝组织HO-1表达；放射免疫分析法测定肝组织CGRP、cGMP浓度。结果和缺血再灌注组比较，MPLA低、中、高剂量组细胞损害相对较轻；各项肝功能指标显著降低；HO-1、CO、cGMP、CGRP含量升高（P〈0．05），且HO—1与CO、CO与cGMP、cGMP与CGRP两两者之间存在明显的正相关关系（P〈0．05）。结论MPLA通过HO—1—CO-cGMP途径促进肝脏缺血／再灌注期间CGRP的合成和释放，这可能是MPLA减轻大鼠肝缺血再灌注损伤作用机制之一。