瓦尼木层孔菌WN-3分类地位的分子生物学验证及生理学特性研究

[目的]研究瓦尼木层孔菌WN-3分类地位的分子生物学验证及生理学特性。[方法]采用分子生物学方法对瓦尼木层孔菌WN-3菌株进行分类地位验证,通过生长速率法研究该菌株的生理学特性。[结果]菌株WN-3的ITS序列长度为756 bp,在Genbank核酸序列数据库中比对,试验菌株与瓦尼木层孔菌的相似率为98%,确定菌株WN-3为瓦尼木层孔菌,GenBank登陆号为HQ845057。瓦尼木层孔菌WN-3生长的最佳碳源为葡萄糖和甘露糖,最佳氮源为麦麸和玉米;菌株在pH6.5条件下生长最好,适宜生长温度为28℃。[结论]该方法研究了瓦尼木层孔菌WN-3分类地位的分子生物学验证及生理学特性,为进一步研究其人工栽培和规模化生产提供了理论基础。

瓦尼木层孔菌菌丝体多糖提取工艺的研究

为优化瓦尼木层孔菌菌丝体多糖提取工艺,在单因素试验的基础上,以提取温度、提取时间、水料比3个因素为自变量,以瓦尼木层孔菌菌丝体多糖提取率为响应值,使用BOX-Benhnken中心组合试验和响应面分析法,优化瓦尼木层孔菌菌丝体多糖提取工艺,并确定瓦尼木层孔菌菌丝体多糖的最佳工艺条件为:提取温度80.99℃、提取时间2.13 h、水料比32.06∶1(mL/g)。在此条件下,实际提取率为10.49%,与预测值基本吻合。

野生和不同栽培方式桑黄药材质量分析

目的通过对桑黄药材的超高效液相色谱(UPLC)特征图谱和多组分含量测定结果进行分析, 比较并评价野生和不同栽培方式桑黄药材质量。方法采用UPLC建立桑黄药材的特征图谱及多组分含量测定方法, 并运用聚类分析、正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)方法进行化学模式识别分析。结果 18批桑黄药材特征图谱有10个共有峰, 指认出麦角硫因(峰1)、原儿茶酸(峰2)、原儿茶醛(峰3)、咖啡酸(峰4)、Hispidin(峰5)5个成分, 聚类分析、OPLS-DA可将野生品及不同栽培方式桑黄药材明确区分。结论段木栽培桑黄较袋料栽培桑黄与野生桑黄更接近, 建立的UPLC特征图谱和多成分含量测定方法可为桑黄药材的质量评价提供参考。

荷移荧光光谱法测定杨树桑黄子实体的总黄酮

建立了荷移荧光光谱法测定杨树桑黄提取物中总黄酮含量的方法。以芦丁为对照品,1%三氯化铝为受电子试剂,测定荷移复合物荧光强度,并系统考察了荷移反应条件对荧光强度的影响。芦丁在4—20μg·mL^(-1)浓度范围内线性关系良好,RSD为2.21%,平均回收率为100.3%。荷移反应后黄酮类物质产生荧光,可用于定量测定,方法简便、快速,适用于杨树桑黄总黄酮的含量测定。

荷移-UV分光光度法测定杨树桑黄提取物总黄酮含量

建立了荷移-UV分光光度法测定杨树桑黄提取物中总黄酮含量的方法。以芦丁为对照品,AlCl3为受电子试剂,408.2nm处测定荷移复合物吸光度。杨树桑黄提取物总黄酮浓度在8—40μg.mL-1范围内线性良好,RSD为1.48%,平均回收率为98.44%。该方法稳定、简便、快速,适用于杨树桑黄中黄酮类物质含量测定。