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RNAi Plasmid Construction of PttGA 20-oxidase Gene 被引量:3
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作者 周冰彬 陈晓阳 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2008年第4期56-59,77,共5页
[Objective] Genetic Engineering technology was used to regulate the expression of PttGA20-oxidase gene thus restrained plant height growth and internode elongation for cultivating dwarfed plant.[Method] Based on the R... [Objective] Genetic Engineering technology was used to regulate the expression of PttGA20-oxidase gene thus restrained plant height growth and internode elongation for cultivating dwarfed plant.[Method] Based on the RNAi principle,the gene specific sequences of PttGA20-oxidase in the antisense and sense orientations interrupted by a gene sequence from GUS were cloned into a binary vector pBI121.The selection marker gene npt Ⅱ was replaced with bar gene to RNAi plasmid.[Result] After undergone different endonuclease restrictions,the constructed constraint vector released different segments whose sizes were similar to that of target segment,which demonstrated that the RNAi plasmid of PttGA20-oxidase gene was successfully constructed.[Conclusion] The experiment provided a new way for culturing dwarfed plant. 展开更多
关键词 GIBBERELLINS PttGA 20-oxidase gene RNAI VECTOR construction
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奶牛乳房炎病原微生物20联核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)的临床应用评估
2
作者 胡秀花 王子华 +5 位作者 黄鹏成 刘园园 毛君杰 王桂琴 马翀 王少林 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2024年第11期61-69,共9页
为了评估商品化的奶牛乳房炎病原微生物20联核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)(后文简称为“检测试剂盒”)在临床应用中的适用性,本试验采用传统细菌分离培养、检测试剂盒、16S rRNA基因扩增子测序和药物敏感性试验对宁夏回族自治区9个牧... 为了评估商品化的奶牛乳房炎病原微生物20联核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)(后文简称为“检测试剂盒”)在临床应用中的适用性,本试验采用传统细菌分离培养、检测试剂盒、16S rRNA基因扩增子测序和药物敏感性试验对宁夏回族自治区9个牧场155份奶牛乳房炎奶样分别进行菌株鉴定和耐药性检测,并将检测试剂盒与其他3种检测结果进行比较和分析。结果显示,检测试剂盒与传统细菌分离培养在病原菌检出情况上基本保持一致,均主要检出了大肠杆菌、芽孢杆菌属和凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)等;检测试剂盒与16S rRNA基因扩增子测序结果在菌属组成上一致性较高,均主要检出了假单胞菌属、链球菌属和葡萄球菌属等;药物敏感性试验结果显示,检出率较高的66株病原菌分离株对β-内酰胺类抗菌药物的耐药率普遍偏高;奶样中β-内酰胺酶耐药基因blaZ的检测试剂盒检出结果与同一奶样中分离菌株的药物敏感性试验结果一致率达58%(7/12)。综上所述,该检测试剂盒具有较高的准确度和病原覆盖率,可为牧场奶牛乳房炎主要病原的快速诊断和耐药基因(blaZ)监测提供有效的技术支持,从而降低抗菌药物的使用量,以减少牧场经济损失。 展开更多
关键词 奶牛乳房炎病原微生物20联核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 细菌分离培养 16S rRNA基因扩增子测序 药物敏感性试验
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小麦新品种“山农20”抗病基因的分子检测 被引量:14
3
作者 李继发 邓志英 +3 位作者 孙福来 关西贞 王延训 田纪春 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期611-621,共11页
山农20是2011年和2012年分别通过国家黄淮南、北片审定的小麦高产多抗新品种,在国家区试抗病性鉴定和生产中都表现出良好的抗黄淮麦区主要病害的特性。本研究利用与小麦抗白粉病、条锈病、叶锈病、纹枯病基因和抗赤霉病主效QTL紧密连锁... 山农20是2011年和2012年分别通过国家黄淮南、北片审定的小麦高产多抗新品种,在国家区试抗病性鉴定和生产中都表现出良好的抗黄淮麦区主要病害的特性。本研究利用与小麦抗白粉病、条锈病、叶锈病、纹枯病基因和抗赤霉病主效QTL紧密连锁的SSR、SCAR、STS等标记对该品种进行了分子检测,发现山农20含有6个抗白粉病基因(Pm12、Pm24、Pm30、Pm31、Pm35和Pm36),6个抗条锈病基因(Yr5、Yr9、Yr15、Yr24、Yr26和YrTp1),2个抗叶锈病基因(Lr21和Lr26),1个抗纹枯病基因(Ses1),但未检测到抗赤霉病主效QTL。分子检测结果部分解释了山农20的优良抗病性,也为利用分子标记辅助选择培育抗病稳产小麦新品种提供参考。 展开更多
关键词 山农20 抗病性相关基因 分子标记
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苏云金杆菌辅助蛋白P20对杀虫晶体蛋白Cry1Ab表达的影响 被引量:3
4
作者 汤慕瑾 袁美妗 +4 位作者 陈建武 师永霞 曾少灵 余健秀 庞义 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期566-571,共6页
苏云金杆菌 (Bacillusthuringiensis,简称Bt)杀虫晶体蛋白Cry1Ab因其C 半端缺少了一段含 4个半胱氨酸的氨基酸序列而导致蛋白的不稳定 ,报道苏云金杆菌辅助蛋白P2 0帮助Cry1Ab蛋白的表达及晶体的形成。利用穿梭载体pHT310 1构建 3个表... 苏云金杆菌 (Bacillusthuringiensis,简称Bt)杀虫晶体蛋白Cry1Ab因其C 半端缺少了一段含 4个半胱氨酸的氨基酸序列而导致蛋白的不稳定 ,报道苏云金杆菌辅助蛋白P2 0帮助Cry1Ab蛋白的表达及晶体的形成。利用穿梭载体pHT310 1构建 3个表达质粒 ,即pT1B、pP1B和pDP1B ,3个质粒都含有cry1Ab基因 ,不同在于pT1B没有p2 0基因 ,pP1B含有p2 0全基因 ,而pDP1B不仅含有p2 0全基因 ,且在p2 0基因前插入cry1A(c)启动子。分别将这 3个表达质粒经电转化到苏云金杆菌晶体缺陷型菌株CryB中 ,获得转化菌株T1B、P1B和DP1B。Westernblot表明cry1Ab基因在这 3株菌中均表达了 130kD的蛋白 ,部分降解为大约 6 0kD的蛋白。蛋白定量分析显示 ,3株菌 130kD蛋白量的比为 1∶1.4∶1 5 ,降解后的 6 0kD蛋白量的比为 1∶1.1∶1.6 ,Cry1Ab蛋白总量的比为 1∶1∶2∶1 6。镜检发现 ,Cry1Ab在 3株菌中都形成典型的菱形晶体 ,其晶体大小为T1B <P1B <DP1B。生物测定结果显示 ,3个菌株对棉铃虫 (Helicoverpaarmigera)均具有明显的杀虫活性 ,三者的LC50 差异不显著。研究表明 ,P2 0对cry1Ab基因的表达和晶体形成均有帮助 ,P2 展开更多
关键词 苏云金杆菌 辅助蛋白 P20 杀虫晶体蛋白 CRYLAB 表达 生物杀虫剂
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GA20-氧化酶基因转化豆科牧草百脉根的研究 被引量:13
5
作者 张振霞 储成才 符义坤 《草业学报》 CSCD 2002年第3期97-100,共4页
以豆科植物百脉根子叶为转化受体,通过根癌农杆菌介导方法将外源目的基因GA20-氧化酶(GA20-oxidase)和NPTII基因导入,经筛选分化、再生,得到具有卡那霉素抗性的转基因植物。在卡那霉素筛选浓度的选择中,25mg/L是百脉根较为适宜的筛选浓... 以豆科植物百脉根子叶为转化受体,通过根癌农杆菌介导方法将外源目的基因GA20-氧化酶(GA20-oxidase)和NPTII基因导入,经筛选分化、再生,得到具有卡那霉素抗性的转基因植物。在卡那霉素筛选浓度的选择中,25mg/L是百脉根较为适宜的筛选浓度。头孢霉素对农杆菌的抑制作用好于羧卞霉素。转基因植物移栽大田后生长良好。PCR检测证明外源目的基因已整合到百脉根基因组中。 展开更多
关键词 GA20-氧化酶 基因转化 豆科牧草 百脉根 根癌农杆菌 植物再生
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棉花赤霉素氧化酶同源基因GhGA20ox1在烟草中的功能表达(英文) 被引量:7
6
作者 肖月华 叶应福 +6 位作者 冯怡 李先碧 罗明 侯磊 罗小英 李德谋 裴炎 《植物生理与分子生物学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期563-569,共7页
为研究棉花GA20-氧化酶同源基因GhGA20ox1的功能,将该基因转入本明烟(N.benthamiana)中进行超量表达。RT-PCR分析表明GhGA20ox1基因在转基因植株中得到了不同水平的表达。GhGA20ox1基因的超量表达促进了本明烟中的GA4+7合成,并导致赤霉... 为研究棉花GA20-氧化酶同源基因GhGA20ox1的功能,将该基因转入本明烟(N.benthamiana)中进行超量表达。RT-PCR分析表明GhGA20ox1基因在转基因植株中得到了不同水平的表达。GhGA20ox1基因的超量表达促进了本明烟中的GA4+7合成,并导致赤霉素过量的表型出现。转基因本明烟的表型变化程度与GhGA20ox1基因的表达水平和GA4+7的含量一致。这些结果表明,GhGA20ox1基因编码一个有功能的GA20-氧化酶,能够在转基因烟草中促进活性GA(GA4+7)的合成。 展开更多
关键词 赤霉素 GA 20-氧化酶 棉花GA 20-氧化酶基因 GA合成 基因工程
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高等植物GA 20-氧化酶研究进展 被引量:13
7
作者 李伟 陈晓阳 丁霞 《生命科学》 CSCD 2003年第1期42-45,35,共5页
GA 20-氧化酶(GA 20-oxidase)是高等植物体内GA生物合成途径中最重要的限速酶,它能够催化从GA12到GA9及GA53到GA20一系列的氧化反应。作者对近年来有关GA 20-氧化酶的特征、GA 20-氧化酶基因及编码蛋白、GA 20-氧化酶基因表达调控进行... GA 20-氧化酶(GA 20-oxidase)是高等植物体内GA生物合成途径中最重要的限速酶,它能够催化从GA12到GA9及GA53到GA20一系列的氧化反应。作者对近年来有关GA 20-氧化酶的特征、GA 20-氧化酶基因及编码蛋白、GA 20-氧化酶基因表达调控进行了综合评述,并对GA20-氧化酶基因转化在农业、林业、园艺业方面的应用前景进行了展望。 展开更多
关键词 高等植物 GA20-氧化酶 基因转化
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济麦20α-醇溶蛋白基因的克隆与序列分析 被引量:2
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作者 李玉阁 邢冉冉 +1 位作者 李黎 李锁平 《麦类作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期862-868,共7页
α 醇溶蛋白不仅与小麦面粉的加工品质密切相关,也是诱发乳糜泻(celiac disease,CD)的主要活力蛋白。为了解强筋优质小麦济麦20的α 醇溶蛋白组成及其CD毒性,利用1对α 醇溶蛋白特异引物,采用基因组PCR法,从济麦20中扩增、克隆... α 醇溶蛋白不仅与小麦面粉的加工品质密切相关,也是诱发乳糜泻(celiac disease,CD)的主要活力蛋白。为了解强筋优质小麦济麦20的α 醇溶蛋白组成及其CD毒性,利用1对α 醇溶蛋白特异引物,采用基因组PCR法,从济麦20中扩增、克隆了27个具有独特编码区的核苷酸序列(命名为:JM20A 1~ JM20A 27,GenBank注册号为:JN831386~JN831392和JX828280~JX828311)。其中,18个核苷酸序列( JM20A 1~ JM20A 18)具有完整的开放阅读框, 可编码280~313个氨基酸残基组成的α 醇溶蛋白。这18个基因的氨基酸序列除JM20A 1和JM20A 2在特征II区含有1个额外的半胱氨酸外,其他16个均具有α 醇溶蛋白的典型结构特点,含有6个保守的半胱氨酸。对CD免疫肽的分布分析发现,这18个基因的编码蛋白均符合D基因组来源的α 醇溶蛋白的特点,以不同的组合含有2~4种主要的T细胞免疫优势多肽,定位于6D染色体。与来源于栽培一粒小麦(Triticum monococcu)、拟斯脾尔脱山羊草(Aegilops speltoides)和粗山羊草(Aegilops tauschii)的92个α 醇溶蛋白的氨基酸序列的同源性分析表明,这18个基因均与来源于粗山羊的α 醇溶蛋白基因的同源性最高,进一步说明这些基因很可能来源于6D染色体。 展开更多
关键词 α 醇溶蛋白 济麦20 基因克隆 染色体定位
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2例17α-羟化酶/17,20碳链裂解酶缺陷症患者临床及遗传学分析 被引量:2
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作者 虎子颖 赵志刚 +3 位作者 汪艳芳 袁慧娟 张会峰 郑瑞芝 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期375-379,共5页
目的分析2例17α-羟化酶/17,20碳链裂解酶缺陷症患者的临床特点和分子遗传学特征。方法收集2007年9月—2008年7月在河南省人民医院内分泌科治疗的2例患者临床、基础激素测定和影像学检查资料,对患者进行CYP17A1基因检测。结果 2例患者... 目的分析2例17α-羟化酶/17,20碳链裂解酶缺陷症患者的临床特点和分子遗传学特征。方法收集2007年9月—2008年7月在河南省人民医院内分泌科治疗的2例患者临床、基础激素测定和影像学检查资料,对患者进行CYP17A1基因检测。结果 2例患者血压高于正常值,血钾低于正常值,第二性征发育不良。激素测定示血皮质醇水平低于正常,促肾上腺皮质激素反馈性增高;肾素活性受抑制;睾酮、雌二醇低于正常值,而促性腺激素增高。CT示双侧肾上腺增生。CYP17A1基因检测显示,2例患者基因第6外显子上发现c.1 045del和c.1 047C>A,329位密码子发生了TAC-AA纯合突变,引起Tyr329Lys错义突变及以后密码子的移码突变,并提前产生一个终止密码子(418TGA)。结论高血压伴低血钾患者同时存在性发育不良,应考虑17α-羟化酶缺陷症的可能,CYP17A1基因突变导致的P450c17蛋白的结构改变是17α-羟化酶缺陷症的分子基础。 展开更多
关键词 17Α-羟化酶/17 20碳链裂解酶缺陷症 CYP17A1基因 突变
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20-羟基蜕皮酮对棉铃虫免疫系统的影响 被引量:4
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作者 柴连琴 苗迎春 王乐 《四川动物》 北大核心 2015年第5期739-747,共9页
20-羟基蜕皮酮(20-hydroxyecdysone,20E)是昆虫生长发育的重要调节激素,其类似物RH2485常作为杀虫剂使用,对昆虫的影响全面而深刻。然而20E对昆虫免疫系统的影响作用至今我们仍了解较少。为探究20E在棉铃虫Helicoverpa armijera生长发... 20-羟基蜕皮酮(20-hydroxyecdysone,20E)是昆虫生长发育的重要调节激素,其类似物RH2485常作为杀虫剂使用,对昆虫的影响全面而深刻。然而20E对昆虫免疫系统的影响作用至今我们仍了解较少。为探究20E在棉铃虫Helicoverpa armijera生长发育过程中对免疫系统的影响,本研究选取6龄取食期幼虫注射20E,采用半定量RT-PCR检测了24个棉铃虫体液免疫相关基因在脂肪体和血淋巴中的表达变化,并检测了20E对细胞免疫的影响,包括细胞吞噬能力、凋亡状况及细胞密度变化。结果显示20E处理后,在脂肪体和血淋巴中不同免疫基因对20E的响应不同;血细胞密度在处理12 h后增加2倍,24 h后减少近1/2,但其中浆血细胞密度相对增加,细胞间的粘连作用增强,吞噬率提高约15%,凋亡率升高。结果表明,20E对棉铃虫免疫系统有显著影响,其中对体液免疫的影响比较复杂,但对细胞免疫有明显增强作用。 展开更多
关键词 棉铃虫 20-羟基蜕皮酮 体液免疫 细胞免疫 免疫基因
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20(s)-原人参二醇对体外培养Siha细胞caspase-3表达激活的影响 被引量:2
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作者 赵丽晶 许多 +6 位作者 程宏 梁作文 鲁育铭 韩向北 郭亚雄 赵丽娟 董妍 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期26-29,I0001,共5页
目的:观察20(s)-原人参二醇(PPD)对体外培养人宫颈癌Siha细胞中caspase-9和caspase-3转录表达的影响,以及caspase-3的活化形式cleaved caspase-3含量的变化,阐明其诱导Siha细胞凋亡的机制。方法:体外培养人宫颈癌Siha细胞,将其分为阴性... 目的:观察20(s)-原人参二醇(PPD)对体外培养人宫颈癌Siha细胞中caspase-9和caspase-3转录表达的影响,以及caspase-3的活化形式cleaved caspase-3含量的变化,阐明其诱导Siha细胞凋亡的机制。方法:体外培养人宫颈癌Siha细胞,将其分为阴性对照组(乙醇)和实验组(20μg.L-1 PPD),分别用乙醇和PPD处理体外培养的宫颈癌Siha细胞,48h后流式细胞仪检测细胞的凋亡峰,半定量RT-PCR、Western blotting和免疫细胞化学染色方法检测PPD处理后Siha细胞中caspase-9和caspase-3基因的转录与表达水平。结果:与阴性对照组比较,20μg.L-1 PPD处理48h后,Siha细胞凋亡率增加(P<0.05),Siha细胞中caspase-9与caspase-3转录水平升高(P<0.01),表达上调(P<0.01),caspase-3的活化形式cleaved caspase-3含量增加(P<0.01)。细胞免疫化学检测可见实验组细胞出现棕色颗粒。结论:PPD可促进人宫颈癌Siha细胞凋亡,其机制与激活caspase家族级联反应有关。 展开更多
关键词 20(S)-原人参二醇 SIHA细胞 细胞凋亡 CASPASE-3 CASPASE-9 基因表达
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应用whaF基因序列鉴定20型肺炎链球菌血清型 被引量:3
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作者 陈琼 李康 +5 位作者 徐潇 黄洋 李红 王春娥 陈翠萍 叶强 《微生物学免疫学进展》 2016年第2期16-21,共6页
目的应用wha F基因测序方法,对20型肺炎链球菌进行血清型鉴定。方法采用血清凝集法和用20型肺炎链球菌型特异性基因(wci L基因)合成的引物进行PCR扩增,对中国医学细菌保藏管理中心所保藏的20型肺炎链球菌进行血清学鉴定;根据Gen Bank上... 目的应用wha F基因测序方法,对20型肺炎链球菌进行血清型鉴定。方法采用血清凝集法和用20型肺炎链球菌型特异性基因(wci L基因)合成的引物进行PCR扩增,对中国医学细菌保藏管理中心所保藏的20型肺炎链球菌进行血清学鉴定;根据Gen Bank上发表的wha F基因设计合成引物,PCR扩增wha F基因,利用测序获得基因序列,分析wha F基因多态性。结果 7株20型肺炎链球菌菌株均能与20型血清产生血清凝集反应,wci L基因PCR扩增产物,可见与预期相符大小500 bp的特异性条带。wha F基因PCR扩增产物,除20-3外,其余6株菌均可见1 000bp大小与预期相符的PCR扩增产物。wha F基因测序和分析显示:20-2、20-4、20-5、20-7与20B亚型(Gen Bank accession No.:CR931679和JQ653093)的wha F基因序列相同;20-6与20A亚型(Gen Bank accession No.:JQ653094)的wha F基因序列相同;20-1与CR931679和JQ653093相比,在898有点突变(A→C)。20-3的wha F基因比20A亚型和20B亚型的wha F基因均少了约600 bp。结论 20-6为20A亚型肺炎链球菌,20-2、20-4、20-5、20-7均为20B亚型肺炎链球菌。 展开更多
关键词 20型肺炎链球菌 血清型 wha F基因 基因多态性 点突变
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NIH3T3细胞及小鼠骨骼肌中人PH-20基因疫苗的表达 被引量:1
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作者 陈雪梅 郝莉 +4 位作者 任秀花 石冰涛 曹靖 赵青赞 臧卫东 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2007年第6期1080-1082,共3页
目的:研究人PH-20基因疫苗在体内外的表达。方法:以脂质体介导基因转染法将pcDNA3.1(+)-hPH-20基因疫苗导入NIH3T3细胞中,RT-PCR和原位杂交检测hPH-20mRNA的表达。以脂质体介导基因转染法将疫苗接种于BALB/C小鼠后腿股内侧肌,分别于接... 目的:研究人PH-20基因疫苗在体内外的表达。方法:以脂质体介导基因转染法将pcDNA3.1(+)-hPH-20基因疫苗导入NIH3T3细胞中,RT-PCR和原位杂交检测hPH-20mRNA的表达。以脂质体介导基因转染法将疫苗接种于BALB/C小鼠后腿股内侧肌,分别于接种后第4、7、11、16天取小鼠股内侧肌进行RT-PCR检测。结果:体外转染的NIH3T3细胞阳性克隆经RT-PCR检测,可见1530bp目的条带;原位杂交结果显示阳性细胞胞浆中可见蓝紫色颗粒。取注射基因疫苗后的小鼠注射部位肌肉以RT-PCR法检测到1530bp的目的条带,空载体及生理盐水对照组未见目的条带。结论:人PH-20基因疫苗体内外均可表达。 展开更多
关键词 PH-20 基因疫苗 免疫避孕
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高等植物赤霉素20-氧化酶基因的克隆、表达及其调控技术的研究进展 被引量:2
14
作者 石海燕 张玉星 《贵州农业科学》 CAS 北大核心 2011年第4期19-22,共4页
揭示赤霉素20-氧化酶基因的分子特征,通过转基因技术调控植物体内活性赤霉素的含量,可为改良品种提供新的思路。从赤霉素20-氧化酶基因的克隆、表达调控及其在植物基因工程中的应用等方面进行了综述。
关键词 赤霉素20-氧化酶 基因克隆 表达调控 高等植物
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CYP17A1基因的复合杂合突变导致17α-羟化酶/17,20-碳链裂解酶缺陷症 被引量:2
15
作者 聂敏 李玉秀 +3 位作者 张葵 孙梅励 陆召麟 陶红 《生殖医学杂志》 CAS 2009年第3期261-265,共5页
目的通过1例17α-羟化酶/17,20-碳链裂解酶缺陷症(17-OHD)患者的临床特点和基因突变分析,探讨17-OHD的基因分子机制及突变对P450 c17蛋白功能的影响。方法收集患者临床资料,提取患者外周血白细胞DNA,PCR扩增CYP17A1基因的8个外显子及内... 目的通过1例17α-羟化酶/17,20-碳链裂解酶缺陷症(17-OHD)患者的临床特点和基因突变分析,探讨17-OHD的基因分子机制及突变对P450 c17蛋白功能的影响。方法收集患者临床资料,提取患者外周血白细胞DNA,PCR扩增CYP17A1基因的8个外显子及内含子边界,测序确定CYP17A1基因的突变位点,用突变位点保守性分析和计算机模拟P450 c17蛋白三维结构,分析突变对P450 c17蛋白功能的影响。结果患者临床表现及内分泌功能检查完全符合17-OHD特点,PCR产物和克隆测序发现,CYP17A1基因的一个等位基因的第2外显子125位密码子发生了CGA→CAA的突变,导致Arg125 Gln错义突变,另一个等位基因的第6外显子的第360和361密码子缺失G核苷酸及C转换为A核苷酸,导致Leu361Phe错义突变和以后的移码突变,形成一个只包含417个氨基酸的截短蛋白,该蛋白缺乏17α-羟化酶和17,20碳链裂解酶催化活性部位。通过P450 c17蛋白分子三维建模分析表明,121位色氨酸与血红素和125位精氨酸分别形成氢键,当125位精氨酸突变为谷氨酰胺时,121位色氨酸不能再与125位谷氨酰胺形成氢键,从而使P450 c17蛋白分子结构的稳定性受到影响,影响了其功能。结论通过CYP17A1基因突变分析,进一步从分子遗传学方面证实了患者的临床诊断,CYP17A1突变导致的P450 c17蛋白的结构改变是该17-OHD患者临床表现的基因分子基础。 展开更多
关键词 17α-羟化酶/17 20-碳链裂解酶缺陷症 CYP17A1基因 突变
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检测尿脱落细胞中CK-20表达的临床意义 被引量:1
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作者 狄金明 吴穷 +1 位作者 李庆文 章尧 《实用肿瘤学杂志》 CAS 2004年第2期83-85,共3页
目的 探讨膀胱癌病人尿脱落细胞CK-20的表达情况及其可能的临床意义。方法 尿液标本经适当处理后,采用RT-QCR方法检测尿脱落细胞中CK-20 mRNA的表达情况,分析其与临床病理参数的关系,了解其能否为膀胱癌的一种无创检测手段。结果CK-20 m... 目的 探讨膀胱癌病人尿脱落细胞CK-20的表达情况及其可能的临床意义。方法 尿液标本经适当处理后,采用RT-QCR方法检测尿脱落细胞中CK-20 mRNA的表达情况,分析其与临床病理参数的关系,了解其能否为膀胱癌的一种无创检测手段。结果CK-20 mRNA表达在膀胱癌病人尿中阻性率为40.48%(17/42),在浸润性肿瘤病人尿中阳性率较高,但元统计学意义(P>0.05);在复发病例中阳性率(60%)比初发者中(22.73%)明显要高(P<0.05)。但在所有正常对照者尿中均无表达。结论检测尿脱落细胞CK-20表达可以作为膀胱癌的一种无创诊断及筛查手段。 展开更多
关键词 检测 尿脱落细胞 CK-20 表达 膀胱癌
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PttGA20-氧化酶基因dsRNA抑止载体的构建 被引量:2
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作者 周冰彬 陈晓阳 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2008年第32期14005-14007,共3页
[目的]通过基因工程手段抑止赤霉素调控基因PttGA20-氧化酶基因的表达,从而抑制植物高生长和节间伸长,达到培育矮化植株的目的。[方法]依据RNAi原理,设计引物扩增正义及反义PttGA20ox片段插入pBI121载体CaMV35S启动子下游区域,并在正义... [目的]通过基因工程手段抑止赤霉素调控基因PttGA20-氧化酶基因的表达,从而抑制植物高生长和节间伸长,达到培育矮化植株的目的。[方法]依据RNAi原理,设计引物扩增正义及反义PttGA20ox片段插入pBI121载体CaMV35S启动子下游区域,并在正义和反义片段间隔区插入茎环结构GUS基因片段,将npⅡt标记基因替换为抗除草剂基因bar,构建dsRNA抑止载体。[结果]所构建的抑止载体经经不同内切酶酶切鉴定后均可释放出与目的条带大小相同片段,表明已成功构建PttGA20-氧化酶基因dsRNA抑止载体。[结论]该研究为培育矮化植株提供了新的途径。 展开更多
关键词 赤霉素 PttGA20-氧化酶基因 RNAI 载体构建
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LncRNASNHG20在前列腺癌组织中的表达及其对前列腺癌细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响 被引量:1
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作者 田超 曹正国 +6 位作者 刘治 韩庆杰 张朝胜 黎建欣 蒋茂林 王航涛 钟苏权 《中国性科学》 2022年第5期28-33,共6页
目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)小核仁RNA宿主基因20(SNHG20)在前列腺癌组织中的表达及其对前列腺癌细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响。方法根据细胞处理方法将DU145细胞分为对照组(Control组)、过表达对照质粒组(Lnc-con组)、过表达组... 目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)小核仁RNA宿主基因20(SNHG20)在前列腺癌组织中的表达及其对前列腺癌细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响。方法根据细胞处理方法将DU145细胞分为对照组(Control组)、过表达对照质粒组(Lnc-con组)、过表达组(Lnc SNHG20组)、沉默对照组(si-con组)和沉默表达组(si-SNHG20组)。实时荧光定量聚合酶链反应检测Lnc SNHG20 mRNA表达水平;噻唑蓝(MTT)法检测前列癌细胞24h、48h、72h的增殖率;培养细胞24h后Transwell检测细胞迁移率,Western blot检测迁移相关蛋白表达水平;流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot检测凋亡相关蛋白表达水平。结果相较于癌旁组织和人前列腺正常上皮细胞RWPE-1,前列腺癌组织和人前列腺癌细胞PC3、DU145、LNCaP中SNHG20的表达水平显著升高(P<0.05);SNHG20的表达水平与前列腺癌患者的年龄无关,与肿瘤大小、病理学分级、TMN分期和转移相关。过表达SNHG20促进细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的表达,抑制半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)的表达,促进细胞增殖、迁移和侵袭,抑制细胞凋亡;沉默SNHG20后,Cyclin D1、MMP-2表达受抑制,Caspase-3表达增加,抑制细胞增殖、迁移和侵袭,促进细胞凋亡。结论LncRNA SNHG20在前列腺癌组织中高表达,沉默SNHG20可抑制前列腺癌细胞增殖、迁移和侵袭,并促进细胞凋亡,可为前列腺癌的早期诊断、预防和治疗提供新标志物和新靶点。 展开更多
关键词 长链非编码RNA小核仁RNA宿主基因20 前列腺癌 增殖 迁移 侵袭 凋亡
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hPH-20 DNA疫苗对雌性小鼠生育的影响
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作者 陈雪梅 刘晓东 +1 位作者 任秀花 臧卫东 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期799-801,共3页
目的:观察pcDNA3.1(+)-hPH-20基因疫苗经基因枪介导肌肉接种后在小鼠体内的表达及对小鼠受孕率的影响。方法:以小鼠为实验材料,将实验组经后腿股内侧肌以基因枪多点注射重组质粒pcDNA3.1(+)-hPH-205μg,空载体对照组注射pcDNA3.1(+)5μg... 目的:观察pcDNA3.1(+)-hPH-20基因疫苗经基因枪介导肌肉接种后在小鼠体内的表达及对小鼠受孕率的影响。方法:以小鼠为实验材料,将实验组经后腿股内侧肌以基因枪多点注射重组质粒pcDNA3.1(+)-hPH-205μg,空载体对照组注射pcDNA3.1(+)5μg,空白对照组注射生理盐水200μl,于接种后取股内侧肌检测hPH-20 mRNA和蛋白的表达。采集抗血清做人精子穿去透明带仓鼠卵细胞实验,动物合笼观察受孕情况,持续4个月后进行基因疫苗的安全性检测。结果:注射部位肌肉检测到目的条带;原位杂交在肌细胞膜、胞质和部分肌细胞核可见到蓝紫色颗粒;免疫组织化学显色在肌细胞膜和胞质可见到棕褐色颗粒;实验组小鼠受孕率和对照组相比下降77.78%,同时用鼠抗hPH-20血清能明显降低精子穿卵率;外源性基因没有整合至宿主染色体。结论:hPH-20基因疫苗经基因枪介导肌肉接种有一定的免疫避孕效果。 展开更多
关键词 hPH-20 基因疫苗 基因枪 生育 小鼠
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膀胱癌CK20表达的临床应用 被引量:2
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作者 张志刚 《广州医药》 2010年第3期14-16,共3页
目的探讨CK20在膀胱癌中的表达与膀胱癌的侵袭、转移及预后的关系。方法用免疫组化SP法检测154例膀胱癌组织中CK20的表达。结果 CK20在103例肿瘤组织中有表达,阳性率为66.9%。CK20的表达和膀胱癌的T分期及远处转移呈正相关(P<0.05)... 目的探讨CK20在膀胱癌中的表达与膀胱癌的侵袭、转移及预后的关系。方法用免疫组化SP法检测154例膀胱癌组织中CK20的表达。结果 CK20在103例肿瘤组织中有表达,阳性率为66.9%。CK20的表达和膀胱癌的T分期及远处转移呈正相关(P<0.05)。结论 CK20可能参与了膀胱癌的侵袭与转移,CK20可作为预后判断因子,结合病理分级和临床分期分析能提高对膀胱癌患者预后判断的准确性。 展开更多
关键词 细胞角蛋白20(CK20) 膀胱癌 基因表达 预后
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