EB病毒编码的潜伏膜蛋白与泛素蛋白酶系统

EB病毒(Epstein-Barrvirus,EBV)是人类疱疹病毒,与淋巴系统、上皮细胞肿瘤相关。其编码潜伏性膜蛋白(LMP1、LMP2A和LMP2B)特别是LMP1,由于它是众多EBV编码蛋白质中唯一被明确证明能恶性转化原代B细胞、鼠成纤维细胞和人上皮细胞的蛋白质,所以被列为癌基因。最近对潜伏膜蛋白的研究显示,潜伏膜蛋白与病毒利用泛素蛋白酶系统来达到逃避宿主免疫应答等机制有关,研究这个过程也许可以开发新的策略来防治EBV相关肿瘤。

EB病毒潜伏膜蛋白LMP1与P53在鼻咽癌中表达的意义

目的 探讨 EB病毒潜伏感染和抑癌基因 P5 3异常表达与鼻咽癌的关系。方法 用免疫组化 S- P方法对 5 9例鼻咽癌 (NPC)和 12例鼻咽部正常或慢性炎症组织进行单克隆抗体 L MP1、P5 3标记 ,并结合组织学类型、分化程度、发病年龄进行分组研究。结果 正常和慢性炎症的鼻咽粘膜均呈阴性表达。NPC中 ,L MP1阳性率 6 9.4 9%(4 1/ 5 9) ,P5 3阳性率 4 4 .0 6 % (2 6 / 5 9) ,双阳性率 30 .5 1% (18/ 5 9)。L MP1在非角化性癌、低分化癌及青年组 NPC中高表达 ;在鳞癌、高分化癌及老年组中低表达。P5 3在低分化癌中高表达 ;但与 NPC组织学类型、发病年龄不存在明显相关性。结论 在 NPC发生、发展过程中 EBV潜伏感染起主导作用 ,P5 3基因异常表达可能起协同作用。EB病毒潜伏感染是

基于长度修正的预测算法优化

当自变量之间存在多重相关性时,若利用最小二乘法建立预测模型,参数估计会存在误差。若应用偏最小二乘回归算法建立预测模型,可以克服自变量之间多重相关性问题,计算结果更为可靠。长度修正的偏最小二乘回归算法从预测的角度对偏最小二乘模型进行了改进。以芹山水电站的水平位移预测为例,验证了长度修正的偏最小二乘回归法比普通偏最小二乘回归法在预测方面效果更好。

EGCG干预LMP1激活的AP-1信号转导通路

目的 探讨EGCG对鼻咽癌细胞激活蛋白 1(AP 1)信号转导通路的干预作用 ,阐明在鼻咽癌细胞中茶多酚干预EB病毒潜伏膜蛋白 1(LMP1)活化的AP 1信号转导通路中靶分子的机制。方法 采用EB病毒阴性及阳性的鼻咽癌细胞系CNE1和CNE1 LMP1细胞。利用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法观察EGCG对CNE1和CNE1 LMP1细胞的生存率的影响。采用瞬间转染及报道基因法观察EGCG对AP 1活性的作用。利用间接免疫荧光法观察EGCG对JNK核移位的影响 ,再分别提取CNE1和CNE1 LMP1的胞浆及胞核蛋白 ,Westernblot分析EGCG抑制JNK的核移位后 ,胞浆及胞核蛋白中JNK的变化。采用Westernblot分析EGCG对c Jun的磷酸化水平的影响。采用瞬间转染及报道基因法观察EGCG对cyclinD1启动子活性的影响 ,并用Westernblot分析EGCG对cyclinD1蛋白表达的作用。结果 EGCG对鼻咽癌细胞的抑制作用有剂量依赖性 ,并可抑制AP 1的活性。EGCG能抑制JNK的核移位 ,并抑制c Jun的磷酸化。EGCG对AP 1信号通路下游的靶基因cyclinD1的启动子活性及其蛋白表达都有抑制作用。结论 EGCG对信号转导通路上的AP 1、JNK、c Jun、cyclinD1多个靶点分子具有干预作用。LMP1是EB病毒这种编码的蛋白 ,因此 ,EGCG抑制与病毒相联系的信号转导通路 。

鼻咽癌增殖与转移机制荧光检测的研究进展

鼻咽癌是一种高转移性的头颈部肿瘤,EB病毒编码潜伏膜蛋白-1(LMP1)被认为与鼻咽癌的发展、侵袭、转移关系密切,但是LMP1诱导鼻咽癌增殖、转移的机制尚不明确。本文对近年鼻咽癌增殖、转移机制方面的研究进展作简要介绍;荧光检测技术作为一种有效技术手段被广泛应用于生命科学,对应用于鼻咽癌增殖、转移机制研究中的荧光检测技术(免疫荧光、双分子荧光互补、荧光共振能量转移)进行详细总结,并分析了各自的优缺点。针对鼻咽癌增殖、转移与肿瘤细胞质膜关系密切的特点,展望了利用全内反射荧光显微镜(TIRF)结合荧光共振能量转移(FRET)技术获取鼻咽癌细胞质膜上LMP1蛋白高分辨率成像,破解鼻咽癌增殖、转移机制的前景。

LMP1通过Survivin抑制^(60)Co诱导鼻咽癌细胞凋亡

目的 研究EB病毒编码的潜伏膜蛋白 1(LMP1)介导凋亡抑制蛋白 (Survivin)表达对辐射效应的影响。方法 利用LMP1可调控表达鼻咽癌细胞系 (Tet on LMP1HNE2 )诱导LMP1表达 ,同时 60 Co照射 5Gy ,采用形态学观察、流式细胞术和半胱氨酸蛋白酶 3(Caspase 3)活性检测等方法 ,分析LMP1表达对60 Co诱导鼻咽癌细胞凋亡的影响。用反义Survivin寡核苷酸阻断Survivin表达 ,观察Sur vivin表达阻断对60 Co辐射效应的影响。结果 LMP1表达抑制60 Co诱导鼻咽癌细胞凋亡 ,LMP1表达60 Co照射组形态学和流式细胞术检测凋亡率 (32 .7%± 2 .1% ,6 .3% )明显低于LMP1表达阴性组 (6 6 .0 %± 3.0 % ,2 9.6 % ) (P <0 .0 5 ) ;转染Survivin反义寡核酸后细胞凋亡率 (5 9.3%± 3.2 % ,3.0 % )明显高于对照组 (2 6 .0 %± 2 .6 % ,8.6 % ) (P <0 .0 5 ) ;同样转染Survivin反义寡核酸组Caspase 3活性 (3.78nmol/ 10 6)高于对照组 (2 .79nmol/ 10 6)。结论 提示LMP1通过介导Survivin表达而抑制60 Co照射诱导凋亡 ,Survivin反义核酸协同辐射诱导肿瘤细胞凋亡 ,Survivin作为增敏放射治疗靶 ,具有潜在的临床意义。