食管鳞癌LncRNA FAL1、miR-637表达与临床病理参数及预后关系研究初探

目的检测食管鳞癌组织中的长链非编码RNA(LncRNA)FAL1与miR-637表达情况,并探讨其与患者临床特征及预后的关系。方法选取2018年1月至2021年6月在广西中医药大学附属国际壮医医院住院治疗的48例食管鳞癌患者,检测食管鳞癌组织及癌旁组织LncRNA FAL1、miR-637表达水平,并探讨其与临床特征及预后的关系。结果食管鳞癌组织中LncRNA FAL1表达量高于癌旁组织,miR-637表达量低于癌旁组织,差异具有统计学意义(P<0.01)。年龄、性别、吸烟、嗜酒情况不影响食管鳞癌组织LncRNA FAL1、miR-637表达量(P>0.05);TNM分期、淋巴结转移以及癌细胞分化程度影响食管鳞癌组织LncRNA FAL1、miR-637表达量(P<0.05)。Kaplan-Meier分析结果显示,LncRNA FAL1高表达组的3年总生存率低于LncRNA FAL1低表达组(P=0.004);miR-637高表达组和miR-637低表达组的3年总生存率比较,差异无统计学意义(P=0.542)。结论食管鳞癌组织中LncRNA FAL1表达量高于癌旁组织,miR-637表达量低于癌旁组织,二者与肿瘤TNM分期、淋巴结转移以及癌细胞分化程度有关,有望成为食管鳞癌诊断、治疗以及评估预后的新生物学指标。

lncRNA FAL1通过调控MAPK通路对卵巢癌细胞化疗耐药性的影响及其机制

目的观察lncRNA FAL1在卵巢癌细胞及其耐药细胞株中的表达差异,探索下调lncRNA FAL1对细胞化疗耐药性的影响及机制。方法qRT-PCR法检测SKOV3和COC1细胞及其耐药细胞株FAL1基因表达水平,转染FAL1-siRNA下调FAL1基因,MTT检测细胞增殖能力,Transwell法检测细胞侵袭能力,平板克隆形成实验检测细胞克隆能力,Western blot法检测细胞耐药相关蛋白MDR-1、MPR-1、ABCG2和MAPK通路相关蛋白p38 MAPK、ERK1/2、JNK磷酸化水平。将已转染FAL1-siRNA的SKOV3/DDP和COC1/DDP细胞注射到BALB/c裸鼠皮下,定期测量瘤体积并称重。结果与SKOV3和COC1细胞比较,SKOV3/DDP和COC1/DDP细胞对DDP的敏感度降低,FAL1基因的表达水平升高(P<0.01)。转染FAL1-siRNA后,SKOV3/DDP和COC1/DDP细胞对DDP的敏感度增加(P<0.01),侵袭能力(P<0.05)和克隆能力降低(P<0.01),细胞中MDR-1、MPR-1、ABCG2表达水平(P<0.01)和p38 MAPK、ERK1/2、JNK磷酸化水平降低(P<0.05),皮下移植瘤的体积和瘤质量显著降低(P<0.01)。结论下调lncRNA FAL1可显著降低卵巢癌耐顺铂细胞株的化疗耐药性,抑制耐药细胞在体内的增殖能力,其作用机制与抑制MAPK信号通路的活化有关。

下调lncRNA FAL1对甲状腺癌TPC-1细胞功能的影响及其机制

目的探讨下调lncRNA FAL1对甲状腺癌TPC-1细胞增殖、周期分布、凋亡、侵袭和迁移的影响及其机制。方法将体外培养的TPC-1细胞分为空白对照组、阴性对照组和FAL1干扰组,采用实时荧光定量PCR检测TPC-1细胞中FAL1表达水平,MTT实验检测TPC-1细胞增殖活力,流式细胞仪检测TPC-1细胞周期分布和凋亡,Transwell小室检测TPC-1细胞侵袭和迁移,Western blotting检测TPC-1细胞中AKT磷酸化和CyclinD1、Bcl-2、MMP-9蛋白表达水平。结果与空白对照组比较,阴性对照组TPC-1细胞中各指标差异无统计学意义(P>0.05);与空白对照组或阴性对照组比较,FAL1干扰组TPC-1细胞增殖活力、S期细胞百分比、细胞侵袭能力、迁移能力和AKT磷酸化以及CyclinD1、Bcl-2、MMP-9蛋白的表达水平均明显降低,而G0/G1期细胞百分比和细胞凋亡率均明显升高(P<0.05)。结论下调FAL1表达可抑制甲状腺癌TPC-1细胞增殖、侵袭和迁移并诱导细胞周期阻滞和凋亡,其作用机制可能与抑制AKT信号通路有关。

LncRNA FAL1在乳腺癌患者血清外泌体中的表达及对乳腺癌细胞增殖的影响

目的检测长链非编码RNA(LncRNA)FAL1在乳腺癌患者血清外泌体中的表达水平,以及沉默乳腺癌细胞(MCF-7)LncRNA FAL1的表达对人乳腺癌细胞增殖的影响。方法采用外泌体提取试剂盒从乳腺癌患者血清中提取外泌体,透射电镜、Nanoight及Western blot对外泌体进行观察鉴定。利用实时定量PCR(qRT-PCR)技术检测血清外泌体中LncRNA FAL1的表达,利用细胞计数kit-8(CCK-8)试验检测敲除LncRNA FAL1后对乳腺癌细胞株增殖的影响。结果电镜下血清外泌体均呈圆形或椭圆形,直径40～100 nm。乳腺癌患者血清外泌体中LncRNA FAL1的表达水平比乳腺纤维腺瘤患者高5.5倍[(5.89±0.26)vs.(1.16±0.10),P<0.001],乳腺纤维腺瘤患者与正常人比较差异无统计学意义(P>0.05)。CCK-8法对细胞增殖检测发现,从第3天开始,FAL1-siRNA组的细胞增殖受到明显的抑制(P=0.015,t=3.585,df=5)。结论乳腺癌患者血清外泌体中LncRNA FAL1表达增高,FAL1-siRNA可抑制MCF-7细胞增殖,提示LncRNA FAL1的异常增高可能是乳腺癌发生发展的重要分子机制,可以作为克服乳腺癌的一个战略指标。

长链非编码RNA FAL1对宫颈癌Hela细胞增殖、侵袭与迁移的影响

目的:探索人宫颈癌细胞Hela与正常人宫颈永生化上皮细胞H8中长链非编码RNA FAL1分子的表达差异及沉默人宫颈癌细胞Hela中FAL1的表达对人宫颈癌细胞Hela增殖、侵袭和迁移的影响。方法:利用qRT-PCR技术检测细胞中FAL1基因表达水平;设计并合成FAL1的siRNA片段(FAL1-siRNA)转染宫颈癌Hela细胞,qRT-PCR技术检测其沉默效率;MTT检测人宫颈癌细胞Hela增殖;Transwell实验检测人宫颈癌细胞Hela的侵袭、迁移能力的变化。结果:长链非编码RNA FAL1在人宫颈癌细胞Hela中的表达明显高于正常人宫颈永生化上皮细胞H8中的表达,FAL1-siRNA下调了Hela细胞中FAL1的表达,并抑制了宫颈癌细胞Hela的增殖和侵袭迁移能力。结论:FAL1-siRNA能够下调Hela细胞FAL1的表达,进而抑制人宫颈癌细胞Hela的增殖及其侵袭迁移能力,提示长链非编码RNA FAL1在宫颈癌中是一种癌基因,FAL1的表达异常增高可能是宫颈癌发生发展的重要分子机制。